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桃離體快繁體系的建立及葉片不定芽的再生

發(fā)布時間:2020-06-09 20:26
【摘要】:本文以桃栽培品種‘甜桃王’、‘金童5號’、雜交后代‘1-6’(秦王×中油16)和野生種‘山桃’的莖段為外植體,進行離體快繁體系的建立,并以‘山桃’和‘1-6’的無菌苗葉片為試材,對桃葉片不定芽的再生和桃葉片的抗生素敏感性進行試驗,為桃遺傳轉化體系的建立奠定基礎。主要結果如下:(1)桃離體快繁體系的建立:以‘甜桃王’、‘金童5號’的莖段作為外植體,最適宜的消毒滅菌方法為:75%酒精30 s與0.1%HgCl_2溶液10 min,莖段的污染率和萌發(fā)率分別為:33.56%和29.19%、89.48%和84.82%。最適宜‘甜桃王’、‘金童5號’、‘1-6’莖段萌發(fā)的初代培養(yǎng)基為MS+1.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IBA,萌發(fā)率分別為:92.17%、90.21%、93.33%;莖段的污染率與萌發(fā)率不受品種與生理年齡的影響!教摇c‘1-6’的最適繼代增殖培養(yǎng)基和最大增殖系數(shù)存在差異;最適宜‘山桃’繼代增殖的培養(yǎng)基為:MS+1.5 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IBA,最大增殖系數(shù)為5.62;最適宜‘1-6’繼代增殖的培養(yǎng)基為:MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA,最大增殖系數(shù)為3.50!教摇钸m宜生根的培養(yǎng)基為MS+0.8 mg/L IBA,此時的生根率最高為25.00%,平均生根數(shù)為1.79;‘1-6’最適宜生根的培養(yǎng)基為1/2 MS+0.5 mg/L NAA,生根率最高為36.67%,平均生根數(shù)為1.76。(2)桃葉片不定芽再生:對‘1-6’(栽培種)和‘山桃’(野生種)的葉片不定芽再生能力進行了比較,暗培養(yǎng)3周后,‘山桃’葉片所形成的愈傷組織比‘1-6’的葉片所形成的愈傷組織更大,更加致密;光培養(yǎng)3周以后,‘山桃’葉片的愈傷組織再生出了不定芽而‘1-6’葉片的愈傷組織沒有再生出不定芽,因此‘山桃’葉片的再生能力要比‘1-6’強。云芝多糖對‘山桃’葉片愈傷組織的形成無明顯的促進作用,暗培養(yǎng)3周以后,濃度為2 g/L時‘山桃’葉片愈傷組織形成率最高,而且此時形成的愈傷組織比較好;光培養(yǎng)以后,含有高濃度的云芝多糖的葉片愈傷組織褐化現(xiàn)象比較嚴重;所有處理沒有再生出不定芽。硝酸銀對‘1-6’葉片不定芽的再生無明顯的促進作用,但是含有硝酸銀的培養(yǎng)基中所形成的愈傷組織,在光下培養(yǎng)3周以后均無褐化現(xiàn)象,而且硝酸銀濃度越大,愈傷組織的綠色越深,適宜桃葉片愈傷組織形成的硝酸銀濃度為0.5 mg/L;最終沒有再生出不定芽。(3)桃葉片抗生素敏感性試驗:以‘甜桃王’葉片為材料,對桃葉片卡那霉素和頭孢敏感性進行試驗,發(fā)現(xiàn)卡那霉素為20 mg/L時對桃葉片的抗性篩選是比較適宜的;桃葉片共培養(yǎng)時添加200 mg/L頭孢比較適宜。
【圖文】:

莖段,萌發(fā)率


西北農(nóng)林科技大學碩士學位論文.2 不同濃度的 6-BA 與 IBA 配比對初代培養(yǎng)莖段萌發(fā)率的影響 3-1 為不同初代培養(yǎng)基對‘甜桃王’、‘金童 5 號’、‘1-6’莖段萌發(fā)率可知,‘甜桃王’、‘金童 5 號’、‘1-6’的莖段的萌發(fā)率在 3 個處理下各不種都是在處理 2 下的萌發(fā)率最大,處理 1 的萌發(fā)率最小,三個品種的最為 92.17%、90.21%、93.33%;但是三個品種在各個處理之間都不存在說明 3 個處理對莖段‘甜桃王’、‘金童 5 號’、‘1-6’莖段的萌發(fā)率影響析,最適莖段萌發(fā)的初代培養(yǎng)基為 MS+1.5 mg/L6-BA+0.5 mg/LIBA。

莖段,萌發(fā)率,山桃,增殖系數(shù)


圖 3-2 不同品種莖段的污染率與萌發(fā)率的差異e 3-2 Differences between pollution rate and germination rate of stem segmenvarieties代培養(yǎng)基的篩選山桃’繼代培養(yǎng)基中激素的篩選’在不同組合和濃度的植物生長調(diào)節(jié)劑下的增殖系數(shù)如表 3-2以發(fā)現(xiàn),與對照相比,各個處理組合對‘山桃’的繼代增殖均有果存在差異;‘山桃’的繼代增殖數(shù)與增殖系數(shù)隨著生長素種當 IBA 濃度不變時,濃度為 1.5 mg/L 時的增殖系數(shù)與增殖數(shù)L 的增殖數(shù)與增殖系數(shù);而當 6-BA 濃度不變時,山桃的增殖數(shù)的變化沒有呈現(xiàn)出一定規(guī)律性;但是當 6-BA 的濃度為 1.0 mg/L.3 mg/L 時,‘山桃’的增殖數(shù)與增殖系數(shù)隨著 IBA 濃度的增加呈濃度為 1.5 mg/L 時,‘山桃’的增殖數(shù)與增殖系數(shù)隨著 IBA 濃;從表中可以看出‘山桃’增殖數(shù)與增殖系數(shù)最大時植物生長1.5 mg/L6-BA 與 0.3 mg/L IBA,,此時山桃的增殖數(shù)與增殖系數(shù)
【學位授予單位】:西北農(nóng)林科技大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2019
【分類號】:S662.1

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本文編號:2705210

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