發(fā)布時(shí)間：2020-06-07 10:02

【摘要】：蕓薹種(Brassica rapa.2n=20,AA)屬于蕓薹屬植物,是一種重要的農(nóng)作物,包括蔬菜,油料和飼料作物。蕓薹種作物在中國、韓國和日本主要作為葉菜類蔬菜廣泛種植,在印度、中國和加拿大多用于生產(chǎn)植物油,在歐洲作為飼料作物種植。大白菜,小白菜和蕪菁都屬于蕓薹種的不同亞種的不同形態(tài)類型。本研究在構(gòu)建的大白菜-菜心染色體片段替換系(chromosome segment substitution lines,CSSLs)的基礎(chǔ)上,對(duì)種子休眠和生長發(fā)育相關(guān)農(nóng)藝性狀進(jìn)行了QTL的定位,主要研究結(jié)果如下:1.在前人初步構(gòu)建的大白菜-菜心CSSLs的基礎(chǔ)上,本研究結(jié)合MAS技術(shù),對(duì)CSSLs進(jìn)行了完善,獲得一套基本趨于完整的含75個(gè)株系的CSSLs群體。其中單片段替換系有66個(gè),兩個(gè)片段替換系有9個(gè),大白菜染色體插入片段長度為458.27 Mb,目標(biāo)插入片段長度為208.46 Mb,基因組覆蓋率為81.02%,菜心基因組的恢復(fù)率為98.06%。2.對(duì)大白菜-菜心CSSLs群體進(jìn)行了種子休眠的鑒定和QTL定位,通過三次生物學(xué)重復(fù)試驗(yàn),共檢測(cè)到12個(gè)與種子休眠相關(guān)的QTL位點(diǎn),分別位于A01、A02、A03、A04、A05、A06、A09和A10染色體上,并分別命名為q D-1-1、q D-1-2、q D-2-1、q D-3-1、q D-3-2、q D-3-3、q D-4-1、q D-5-1、q D-5-2、q D-6-1、q D-9-1和q D-10-1。通過與擬南芥的同源區(qū)域比較,共找到27個(gè)與種子休眠相關(guān)的基因,為后續(xù)的精細(xì)定位和基因克隆的研究提供了依據(jù)。3.在2017年夏和2017年秋,利用75份大白菜-菜心CSSLs群體進(jìn)行了農(nóng)藝性狀的QTL定位。通過單因素方差分析CSSLs各株系與輪回親本‘四九菜心’之間的顯著性差異,在10條連鎖群上共檢測(cè)出了157個(gè)QTL位點(diǎn)。其中,控制株高QTL有11個(gè),控制株幅的QTL有22個(gè),控制抽薹時(shí)間的QTL有10個(gè),控制開花時(shí)間的QTL有11個(gè),控制葉長的QTL有14個(gè),控制葉寬的QTL有11個(gè),控制葉柄長的QTL有8個(gè),控制葉柄寬的QTL有11個(gè),控制薹粗的QTL有15個(gè),控制薹蠟粉的QTL有12個(gè),控制葉面平整度的QTL有14個(gè),控制葉色的QTL有11個(gè),控制葉裂刻的QTL有7個(gè)。其中,在兩次重復(fù)中穩(wěn)定表達(dá)的QTL有32個(gè)。
【圖文】：

二 材料與方法二 材料與方法料是以蕓薹屬蕓薹種 AA 基因組測(cè)序計(jì)劃（The Multinational BraGP）大白菜模式植物‘Chiifu’為供體親本，小白菜高代自交’為受體親本，在李康寧（2015）通過多代回交和自交，構(gòu)建的替換系群體的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步純化背景，完善替換系�！木挪顺檗烽_花，不結(jié)球，葉面光滑、無刺毛，葉片卵圓或橢圓形、葉早熟品種，，種子有強(qiáng)休眠；‘Chiifu’屬于大白菜亞種，耐抽薹，晚熟品種，種子無休眠現(xiàn)象。

圖 2-2 大白菜-菜心染色體片段替換系構(gòu)建的技術(shù)路線Fig. 2-2 The technical route to construct Chinese cabbage-caixin CSSLs大白菜-菜心染色體片段替換系構(gòu)建的方法 替換系植株基因組總 DNA 的提取實(shí)驗(yàn)采用改良 CTAB 法（Paterson et al，1993）提取基因組總 DNA，具體1）在 2.0 ml 的離心管中放入白菜幼嫩葉片約 1 g 左右。2）加入少量液氮在（1）的離心管中，然后用鑷子將葉片研磨，直至磨碎在液氮環(huán)境下。3）向 2%CTAB 裂解緩沖液加入 0.4%的巰基乙醇，進(jìn)行預(yù)熱，然后取 60TAB 裂解緩沖液加入到（2）離心管中。4）將離心管放入 65℃的水浴鍋中，水浴 40 min 左右，每隔 10 min 搖勻5）水浴完成向離心管中加 600 ul 的氯仿/異戊醇（24:1）抽提液，充分搖勻 rpm 離心 15 min。6）用移液器吸出 450 ul 上清液于 1.5 ml 的新離心管中，再加入等體積
【學(xué)位授予單位】：沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：S634.5

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2701246