【摘要】：梨(Pyrus)是我國(guó)北方重要的果樹之一。類黃酮作為一種天然代謝產(chǎn)物,具有重要的生物功能,因此探究梨類黃酮的合成與代謝具有重要的研究?jī)r(jià)值。本研究以‘早酥’梨及其紅皮芽變‘紅早酥’梨為試驗(yàn)材料,通過比較轉(zhuǎn)錄組鑒定出‘紅早酥’芽變中特異表達(dá)的轉(zhuǎn)錄因子PbMYB12,經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)PbMYB12可以通過提高類黃酮合成基因PbC HS的轉(zhuǎn)錄活性促進(jìn)槲皮素3-O半乳糖苷、槲皮素3-O葡糖苷、槲皮素3-O阿拉伯糖苷的積累,初步闡明該基因在梨類黃酮生物合成途徑中的調(diào)控機(jī)理。主要研究結(jié)果如下:1.從白梨中分離獲得PbMYB12基因的編碼區(qū)序列并進(jìn)行了生物信息學(xué)分析。結(jié)果顯示,該基因編碼區(qū)全長(zhǎng)1461bp,編碼一個(gè)含有486個(gè)氨基酸的蛋白,蛋白序列中含有一個(gè)SG7 motif,且同AtMYB12蛋白序列有較高的同源性,因此確定該基因?qū)儆赟G7MYB,并命名為PbMYB12。2.以白梨品種‘早酥’及其芽變品系‘紅早酥’果皮為材料,通過定量分析和相關(guān)性分析,結(jié)果顯示PbMYB12基因在兩個(gè)品種果皮中的表達(dá)模式是一致的,而且該基因的表達(dá)與PbCHS、PbCHI、PbFLS的表達(dá)呈極顯著正相關(guān),與槲皮素3-O半乳糖苷、槲皮素3-O葡糖苷、槲皮素3-O阿拉伯糖苷的含量呈極顯著正相關(guān)。3.以新鮮洋蔥為材料,亞細(xì)胞定位結(jié)果顯示,PbMYB12基因定位在洋蔥表皮細(xì)胞的細(xì)胞核。4.通過利用啟動(dòng)子激活實(shí)驗(yàn)和熒光素酶互補(bǔ)圖像技術(shù),在本氏煙草上對(duì)PbMYB12基因的靶基因進(jìn)行驗(yàn)證。這兩個(gè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果都表明:PbMYB12基因能誘導(dǎo)PbCHS基因的表達(dá)。5.采用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法將PbMYB12基因轉(zhuǎn)入擬南芥,獲得轉(zhuǎn)基因擬南芥株系。在此材料的基礎(chǔ)上進(jìn)一步對(duì)PbMYB12的功能進(jìn)行研究。結(jié)果顯示,Pb MYB12基因的過表達(dá)促進(jìn)了擬南芥中類黃酮合成相關(guān)基因的表達(dá),包括:AtPAL、AtCHS、AtCHI和AtF3H,其中AtCHS基因的表達(dá)量明顯升高,說明PbMYB12能促進(jìn)AtCHS基因的表達(dá),從而間接性地調(diào)控?cái)M南芥中類黃酮的生物合成。
【圖文】：

第一章 文獻(xiàn)綜述 過直接編碼各種生物合成酶參與類黃酮的合成。涉及到的酶包括：苯丙氨酸解PAL），，查爾酮合成酶（CHS），查爾酮異構(gòu)酶（CHI），黃烷酮-3-羥基化酶（F3H黃酮-3’-羥基化酶（F3’H），黃酮醇合成酶（FLS），花青素合成酶（ANS），酮醇還原酶（DFR），花色素還原酶（LAR），UDP-葡萄糖類黃酮-3-O-葡萄糖（UFGT）等等。另一類是調(diào)節(jié)基因，這類基因通過調(diào)控結(jié)構(gòu)基因的表達(dá)來控制的合成。正是由于這些結(jié)構(gòu)基因具有特定的時(shí)空調(diào)節(jié)機(jī)制，并受到調(diào)節(jié)因子的調(diào)此導(dǎo)致了不同代謝產(chǎn)物的合成（Nix et al. 2015）。

至 OD600=0.6~0.8，靜胞小刀將洋蔥的第四層鱗重懸液中，充分浸泡 2上的多余菌液，再平 h；中洗菌 3 次，即可在倒cDNA 隆幼嫩葉片的 cDNA 為模的片段連接到載體 PB測(cè)的候選基因(LOC103
【學(xué)位授予單位】：西北農(nóng)林科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：S661.2

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 趙國(guó)群;趙一凡;張曉騰;關(guān)軍鋒;;基于主成分與聚類分析的梨酒品質(zhì)分析與綜合評(píng)價(jià)[J];中國(guó)釀造;2018年02期

2 趙瑞娟;薛華柏;王磊;溫晶晶;楊健;王龍;王蘇珂;蘇艷麗;李秀根;;梨屬植物SSR分子標(biāo)記核心引物的篩選及其聚類分析[J];果樹學(xué)報(bào);2017年10期

3 翟銳;房晨;范二婷;蔡猛;王志剛;徐凌飛;;‘早酥’梨及其紅皮芽變‘紅早酥’梨類黃酮組分變化與合成模式研究[J];果樹學(xué)報(bào);2016年S1期

4 楊學(xué)穎;王卓潤(rùn);李秀杰;景澤昊;馬碩;于德欽;李樹壯;;槲皮素在機(jī)械性創(chuàng)傷導(dǎo)致大鼠心臟繼發(fā)性損傷中的保護(hù)作用[J];心臟雜志;2016年05期

5 魯吉珂;郝利民;陶如玉;靳澤楠;圣志存;余堅(jiān)勇;;不同純度茶多酚和茶黃素的抗氧化活性（英文）[J];食品科學(xué);2015年17期

6 江楠;張雷;李春霞;任晨琛;周步海;;影響葡萄果皮顏色的MYB類轉(zhuǎn)錄因子的研究進(jìn)展[J];中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào);2014年13期

7 郭弘光;吳繁花;;MYB轉(zhuǎn)錄因子功能與調(diào)控研究進(jìn)展[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2012年20期

8 劉連亮;吳曉琴;張英;;類黃酮化合物防治動(dòng)脈粥樣硬化的研究進(jìn)展[J];天然產(chǎn)物研究與開發(fā);2012年05期

9 李俊才;李天忠;王志剛;李寶江;;‘紅巴梨’果皮UFGT基因的克隆及表達(dá)分析[J];西北植物學(xué)報(bào);2010年01期

10 喬小燕;馬春雷;陳亮;;植物類黃酮生物合成途徑及重要基因的調(diào)控[J];天然產(chǎn)物研究與開發(fā);2009年02期

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 孟富宣;云南‘火把梨’結(jié)構(gòu)基因UFGT及轉(zhuǎn)錄因子克隆與分析[D];西南林業(yè)大學(xué);2014年

本文編號(hào)：2699773