【摘要】：油梨(Persea Americana.Mill)營(yíng)養(yǎng)價(jià)值豐富,是熱帶亞熱帶水果。建立和形成高效穩(wěn)定的離體再生體系是進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化和培育優(yōu)良品種的前提和基礎(chǔ)。油梨的離體再生較為艱難,在一定程度上妨礙了油梨現(xiàn)代生物技術(shù)育種的進(jìn)程。通過(guò)離體培養(yǎng),可為油梨建立快速、不受季節(jié)限制的繁殖方式。本試驗(yàn)以“哈斯”油梨為試材,利用莖段、葉片等為外植體,通過(guò)對(duì)激素種類及其濃度配比、基本培養(yǎng)基類型和外植體類型等一系列因素的研究,初步建立了“哈斯”油梨(Persea Americana.Mill‘Hass’)離體培養(yǎng)體系,為后期“哈斯”及其它品種系油梨離體再生體系研究和優(yōu)良品種育種工作提供理論借鑒意義。通過(guò)試驗(yàn)得出以下研究結(jié)果:利用誘導(dǎo)形成愈傷組織建立分化不定芽體系:(1)適宜消毒滅菌方法:選取生長(zhǎng)期(3~8月)的外植體(葉片、葉柄、帶芽/不帶芽莖段),75%酒精處理20~30 s+無(wú)菌水沖洗2次+0.1%HgCl_2處理5~6mins+無(wú)菌水沖洗4~5次;(2)適宜誘導(dǎo)愈傷組織的培養(yǎng)基:MS+1.0 mg·L~-11 6-BA+1.0 mg·L~-11 NAA+30g·L~(-1)蔗糖+7 g·L~(-1)瓊脂(84%),pH=5.8±0.1,黑暗處理;(3)愈傷組織誘導(dǎo)最佳的外植體類型:莖段最佳(72.7%),葉柄次之(66.3%),葉片和莖尖較差(30~33.4%);(4)愈傷組織誘導(dǎo)最佳的基本培養(yǎng)基類型:H培養(yǎng)基誘導(dǎo)效果最佳(72.1%),N_6和MS培養(yǎng)基次之(分別為61.4%和39.5%),WPM和B_(5改)較差(分別為27.6%和16.2%),1/2MS誘導(dǎo)率最低(11.6%);(5)葉片直接出芽:光照條件下,在H養(yǎng)基中(附加不同濃度6-BA和NAA)葉片外植體難以直接誘導(dǎo)不定芽,但可誘導(dǎo)愈傷組織;(6)愈傷組織分化不定芽:在MS分化培養(yǎng)基中(含有6-BA和NAA),愈傷組織難以分化不定芽;(7)油梨花藥愈傷組織誘導(dǎo):冷處理后的“哈斯”油梨花藥在愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基中(以MS、N_6、H、WPM和B_(5改)為基本培養(yǎng)基,添加1.0 mg·L~-11 6-BA、2.0 mg·L~(-1) 2,4-D、0.2 mg·L~(-1) NAA、5 g·L~(-1) CH、30 g·L~(-1)蔗糖和7 g·L~(-1)瓊脂)難以誘導(dǎo)形成愈傷組織。利用帶芽莖段(半木質(zhì)化)進(jìn)行快速繁殖:(1)適宜消毒滅菌方法:選取生長(zhǎng)期(3~8月)的外植體,75%酒精處理30~40s+無(wú)菌水沖洗2次+0.1%HgCl_2處理6~8 mins+無(wú)菌水沖洗4~5次;(2)適宜誘導(dǎo)側(cè)芽的基本培養(yǎng)基:MS基本培養(yǎng)基(73.7%),H基本培養(yǎng)基次之(66.6%);(3)適宜誘導(dǎo)側(cè)芽的培養(yǎng)基:MS+1.0 mg·L~(-1) 6-BA+0.2 mg·L~(-1)IBA+30 g·L~(-1)蔗糖+7 g·L~(-1)瓊脂,pH=5.8±0.1;(4)適宜增殖培養(yǎng)基:MS+1.0 mg·L~(-1) 6-BA+0.1 mg·L~(-1) NAA+30 g·L~(-1)蔗糖+7g·L~(-1)瓊脂,pH=5.8±0.1;(5)“哈斯”油梨試管苗生根有困難,后期需作進(jìn)一步的研究探討。
【圖文】：

不同濃度2,4-D/NAA對(duì)葉片愈傷組織誘導(dǎo)的影響

圖 3-2 不同濃度 2,4-D/NAA 下“哈斯”油梨葉片愈傷組織干鮮重Figure 3-2 Dry and fresh weight of callusi nduced by different concentration of 2,4-D/NAA via leexplant from avocado 'Hass'注：同一列數(shù)據(jù)后的不同字母表示差異顯著(p<0.05)，下圖同。
【學(xué)位授予單位】：仲愷農(nóng)業(yè)工程學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：S667.9

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2694932