【摘要】：雞樅菌[Termitomyces albuminosus(Berk.)Heim]健康美味、營(yíng)養(yǎng)豐富,是一種非常珍貴的食藥用真菌。陜西秦嶺地區(qū)地勢(shì)高低懸殊較大,氣候多樣,物種資源豐富,其獨(dú)特的環(huán)境及氣候條件適宜多種食用菌的生長(zhǎng)。隨著市場(chǎng)需求的增加,野生雞樅菌數(shù)量有限,難以滿足市場(chǎng)需要,人工栽培勢(shì)在必行。至今有關(guān)秦嶺地區(qū)野生雞樅菌分布及利用食用菌廢棄料等農(nóng)作物秸稈進(jìn)行雞樅菌人工栽培的研究尚未見報(bào)道。本研究以采自秦嶺地區(qū)一株野生雞樅菌子實(shí)體為供試材料,分離純化獲得營(yíng)養(yǎng)菌絲,對(duì)生物學(xué)特性、遺傳性狀和生長(zhǎng)條件進(jìn)行了研究;利用響應(yīng)面優(yōu)化方法研究了液體發(fā)酵條件影響,確定液體種生產(chǎn)最佳發(fā)酵條件;利用分離菌株進(jìn)行了人工栽培初步研究。研究結(jié)果如下:1.雞樅菌分離及生長(zhǎng)條件研究采用組織分離法對(duì)雞樅菌子實(shí)體進(jìn)行分離純化,通過(guò)平皿培養(yǎng)法和分子生物學(xué)方法研究生物學(xué)特性和遺傳性狀,結(jié)合形態(tài)特征和遺傳特征對(duì)菌絲體進(jìn)行分類鑒定,以日生長(zhǎng)速率為指針,探究雞樅菌生長(zhǎng)營(yíng)養(yǎng)條件即碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽,環(huán)境生長(zhǎng)條件即溫度、濕度、CO_2及酸堿度。研究結(jié)果是形態(tài)特征及ITS序列分析鑒定菌絲體為雞樅菌,該菌營(yíng)養(yǎng)菌絲生長(zhǎng)最適碳源是玉米粉,最適氮源是硝酸銨,無(wú)機(jī)鹽是KH_2PO_4和MgSO_4·7H_2O,濃度在0.10%~0.20%,最適濃度是0.15%;濃度在0.025%~0.075%,最適濃度是0.05%;菌絲生長(zhǎng)溫度范圍26~28℃,最適溫度26℃;菌絲生長(zhǎng)pH5~6,最適pH5;光照對(duì)菌絲生長(zhǎng)有影響,以暗培養(yǎng)為宜;適宜的二氧化碳濃度有利于菌絲生長(zhǎng);菌絲生長(zhǎng)濕度范圍是60%~70%,最適濕度65%。2.雞樅菌液體發(fā)酵條件研究采用單因素試驗(yàn)和Box-Behnken響應(yīng)面設(shè)計(jì)對(duì)雞樅菌菌絲液體培養(yǎng)條件進(jìn)行優(yōu)化研究。研究結(jié)果是雞樅菌菌絲培養(yǎng)生長(zhǎng)最佳碳源是葡萄糖、最佳氮源是酵母?出膏、最佳生長(zhǎng)因子是維生素B_1;雞樅菌菌絲液體培養(yǎng)最佳營(yíng)養(yǎng)條件是葡萄糖2.15%、酵母?出膏0.22%、馬鈴薯20%、KH_2PO_40.27%、MgSO_4·7H_2O0.05%、維生素B_10.015%,雞樅菌菌絲液體培養(yǎng)環(huán)境條件是pH6、裝液量300mL(500 mL三角瓶)、溫度26℃、轉(zhuǎn)速140 r·min~(-1)。3.雞樅菌人工栽培研究以食用菌廢棄料為主料,附加其它原料的培養(yǎng)基配方,進(jìn)行雞樅菌大田仿野生栽培技術(shù)研究。研究結(jié)果是通過(guò)ICP-OES試驗(yàn),得到廢棄菌料中元素Ca含量為10.4 g·kg~(-1),K含量為5.9 g·kg~(-1),P含量為4.8 g·kg~(-1),Mg含量為2.7 g·kg~(-1),Na含量為6.9 g·kg~(-1),其它元素含量均低于2.7 g·kg~(-1)。通過(guò)凱氏定氮試驗(yàn)、重鉻酸鉀加外熱試驗(yàn)和堿解擴(kuò)散試驗(yàn),得到廢棄菌料中銨態(tài)氮含量為1.58 g·kg~(-1)、碳含量為231.4g·kg~(-1)、硝態(tài)氮含量為0.24 g·kg~(-1)。通過(guò)單因素試驗(yàn),得到雞樅菌菌絲生長(zhǎng)的最佳原種培養(yǎng)基為B(20%馬鈴薯,2.0%玉米粉,0.1%KH_2PO_4,0.05%MgSO_4·7H_2O,0.02%NaCl,0.02%MnSO_4,0.015%維生素B_6,0.21%蛋白胨,pH自然),得到雞樅菌菌絲生長(zhǎng)的最佳栽培種培養(yǎng)基配方為廢棄袋料65%,木屑15%,麩皮10%,石膏1.0%,石灰1.0%,蔗糖2.0%,玉米粉5.0%,豆粕2.0%。通過(guò)栽培試驗(yàn),得到4~6月初為發(fā)菌期間,濕度掌握在60%~65%,溫度掌握在26~28℃;6月中旬~7月下旬為出菇期間,濕度掌握在60%~80%,溫度掌握在25~30℃,晝夜溫差控制在10~12℃。
【圖文】：

2-1 菌株菌落形態(tài)及菌絲形態(tài)特ology and mycelial morphologica－PCR 擴(kuò)增后，利用瓊脂糖條帶，序列片段長(zhǎng)度大小為錄號(hào)：MF995630）與雞樅菌樹，如圖 2-3 所示。結(jié)合該菌uminosus）。

析因組 DNA 經(jīng) ITS－PCR 擴(kuò)增后，利用瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行PCR 產(chǎn)物獲得單一條帶，序列片段長(zhǎng)度大小為 500~750 bp。果顯示該菌株（登錄號(hào)：MF995630）與雞樅菌屬（Termitom，建立系統(tǒng)發(fā)育樹，如圖 2-3 所示。結(jié)合該菌株形態(tài)學(xué)特征Termitomyces albuminosus）。圖 2-2 ITS－PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物電泳結(jié)果Fig.2-2 Ectrophoresis of ITS－PCR amplification products樅菌ITS－PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；M為DNAMarker。
【學(xué)位授予單位】：陜西理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：S646

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本文編號(hào)：2682820