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彌勒魔芋生殖發(fā)育特性分析及淀粉合成相關(guān)基因AmAGP的克隆

發(fā)布時(shí)間:2020-05-10 14:07
【摘要】:珠芽魔芋泛指具有氣生珠芽的魔芋類群,這類魔芋對(duì)高溫高濕環(huán)境有較強(qiáng)的適應(yīng)性,并對(duì)軟腐病和白絹病有較強(qiáng)的抗性。珠芽魔芋部分種具有無(wú)融合生殖特性,較好保留了母本的遺傳,近年來(lái)已成為廣泛推廣種植的魔芋新種。目前,對(duì)于珠芽魔芋的研究較為淺顯,開(kāi)展珠芽魔芋的相關(guān)研究可為魔芋產(chǎn)業(yè)的發(fā)展提供理論支撐。針對(duì)魔芋種植業(yè)及加工業(yè)中出現(xiàn)的問(wèn)題,文章對(duì)珠芽魔芋生殖發(fā)育特性及淀粉合成做了初步探討。本文以珠芽魔芋不同種作為研究試材并初步鑒定了具有無(wú)融合生殖性狀的珠芽魔芋種--彌勒魔芋(Amorphophallus muelleri);隨后利用不同濃度梯度的赤霉素溶液處理彌勒魔芋種子,通過(guò)萌發(fā)期間種子內(nèi)含物的變化分析赤霉素對(duì)種子萌發(fā)的影響,為生產(chǎn)中提前打破種子休眠提供理論依據(jù);此外,本文克隆了淀粉合成的相關(guān)基因AmAGP,并對(duì)其功能做了初步分析。主要研究結(jié)果如下:1.彌勒魔芋具有無(wú)融合生殖性狀本文通過(guò)對(duì)八種珠芽魔芋的無(wú)融合生殖性狀進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn),彌勒魔芋具有較高的無(wú)融合生殖率,在生產(chǎn)中頗具推廣價(jià)值與潛力。2.赤霉素促進(jìn)彌勒魔芋種子的萌發(fā)本文探討了赤霉素對(duì)彌勒魔芋種子萌發(fā)的影響,成功篩選出促進(jìn)種子萌發(fā)的赤霉素濃度,為50mg/L,并通過(guò)分析種子萌發(fā)過(guò)程中內(nèi)含物的變化,揭示了赤霉素具有促進(jìn)種子內(nèi)有機(jī)物質(zhì)的分解并提高種子萌發(fā)率的作用。3.彌勒魔芋內(nèi)參基因18S的克隆本文成功克隆了珠芽魔芋的內(nèi)參基因18S,其全長(zhǎng)為841bp,通過(guò)序列比對(duì)發(fā)現(xiàn)其與馬蹄蓮(AF168829.1)同源性最高。對(duì)珠芽魔芋內(nèi)參基因的研究,為今后珠芽魔芋相關(guān)基因的定量表達(dá)實(shí)驗(yàn)提供參考。4.彌勒魔芋ADP-葡萄糖焦磷酸化酶基因(4DP-GLUCOSE PYROPHOSPHORYLASE,AGP)的克隆與序列分析本文成功克隆了淀粉合成相關(guān)基因AmAGP,其cDNA序列全長(zhǎng)1660bp,編碼552個(gè)氨基酸,并與白魔芋(JF727266.1)、花魔芋(AF316326.1)同源性最高。該基因編碼的蛋白含有兩個(gè)保守結(jié)構(gòu)域NTP-transferase和LbH-G1P-AT-C,并定位于細(xì)胞質(zhì)中。蛋白二級(jí)結(jié)構(gòu)中無(wú)規(guī)則卷曲結(jié)構(gòu)所占比例較高,為57.07%,其次是α螺旋,為21.56%。5.AmAG 時(shí)空表達(dá)分析本文利用半定量和qRT-PCR實(shí)時(shí)定量對(duì)AmAGP基因在其球莖、根部、葉柄、葉柄基部、葉片進(jìn)行了時(shí)空表達(dá)特性研究,該基因在球莖和根部中表達(dá)量較高,其余器官中表達(dá)量較少。
【圖文】:

珠芽,魔芋


圖2八種珠芽魔芋花器官形態(tài)逡逑ure邋2邋Flower邋organ邋morphology邋analysis邋in邋eight邋kinds邋oiA.bulb1-8表示珠芽魔芋編號(hào)逡逑32逡逑

果實(shí),珠芽,魔芋,雌蕊


3.1.2珠芽魔芋無(wú)融合生殖率統(tǒng)計(jì)逡逑為進(jìn)一步調(diào)查這8種珠芽魔芋的無(wú)融合生殖率,首先選取長(zhǎng)勢(shì)一致的花序,逡逑當(dāng)佛焰苞尚未打開(kāi)時(shí)(圖3-a),此時(shí)的雄蕊及雌蕊均未成熟(圖3-b),削掉下段雌逡逑蕊上的柱頭(圖3-c)并統(tǒng)計(jì)數(shù)量,并于當(dāng)年12月份統(tǒng)計(jì)果實(shí)坐果情況。通過(guò)調(diào)逡逑查發(fā)現(xiàn),經(jīng)人工授粉后的果實(shí)坐果率較高(圖3-d),處理后的珠芽魔芋果實(shí)數(shù)量逡逑差距較大(圖3-e)。經(jīng)統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn),珠芽魔1號(hào)、3號(hào)、4號(hào)、5號(hào)和7號(hào)均有結(jié)有逡逑果實(shí)。其中,2號(hào)珠芽魔芋果實(shí)數(shù)量最多,,達(dá)到631顆;扒開(kāi)果皮后,統(tǒng)計(jì)種子的逡逑34逡逑
【學(xué)位授予單位】:云南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號(hào)】:S632.3;Q943.2

【參考文獻(xiàn)】

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2 張東華;汪慶平;;中國(guó)魔芋種植業(yè)如何應(yīng)對(duì)日本重返緬甸[J];熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué);2015年07期

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5 王繼s

本文編號(hào):2657421


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