彌勒魔芋生殖發(fā)育特性分析及淀粉合成相關基因AmAGP的克隆
發(fā)布時間:2020-05-10 14:07
【摘要】:珠芽魔芋泛指具有氣生珠芽的魔芋類群,這類魔芋對高溫高濕環(huán)境有較強的適應性,并對軟腐病和白絹病有較強的抗性。珠芽魔芋部分種具有無融合生殖特性,較好保留了母本的遺傳,近年來已成為廣泛推廣種植的魔芋新種。目前,對于珠芽魔芋的研究較為淺顯,開展珠芽魔芋的相關研究可為魔芋產(chǎn)業(yè)的發(fā)展提供理論支撐。針對魔芋種植業(yè)及加工業(yè)中出現(xiàn)的問題,文章對珠芽魔芋生殖發(fā)育特性及淀粉合成做了初步探討。本文以珠芽魔芋不同種作為研究試材并初步鑒定了具有無融合生殖性狀的珠芽魔芋種--彌勒魔芋(Amorphophallus muelleri);隨后利用不同濃度梯度的赤霉素溶液處理彌勒魔芋種子,通過萌發(fā)期間種子內含物的變化分析赤霉素對種子萌發(fā)的影響,為生產(chǎn)中提前打破種子休眠提供理論依據(jù);此外,本文克隆了淀粉合成的相關基因AmAGP,并對其功能做了初步分析。主要研究結果如下:1.彌勒魔芋具有無融合生殖性狀本文通過對八種珠芽魔芋的無融合生殖性狀進行研究發(fā)現(xiàn),彌勒魔芋具有較高的無融合生殖率,在生產(chǎn)中頗具推廣價值與潛力。2.赤霉素促進彌勒魔芋種子的萌發(fā)本文探討了赤霉素對彌勒魔芋種子萌發(fā)的影響,成功篩選出促進種子萌發(fā)的赤霉素濃度,為50mg/L,并通過分析種子萌發(fā)過程中內含物的變化,揭示了赤霉素具有促進種子內有機物質的分解并提高種子萌發(fā)率的作用。3.彌勒魔芋內參基因18S的克隆本文成功克隆了珠芽魔芋的內參基因18S,其全長為841bp,通過序列比對發(fā)現(xiàn)其與馬蹄蓮(AF168829.1)同源性最高。對珠芽魔芋內參基因的研究,為今后珠芽魔芋相關基因的定量表達實驗提供參考。4.彌勒魔芋ADP-葡萄糖焦磷酸化酶基因(4DP-GLUCOSE PYROPHOSPHORYLASE,AGP)的克隆與序列分析本文成功克隆了淀粉合成相關基因AmAGP,其cDNA序列全長1660bp,編碼552個氨基酸,并與白魔芋(JF727266.1)、花魔芋(AF316326.1)同源性最高。該基因編碼的蛋白含有兩個保守結構域NTP-transferase和LbH-G1P-AT-C,并定位于細胞質中。蛋白二級結構中無規(guī)則卷曲結構所占比例較高,為57.07%,其次是α螺旋,為21.56%。5.AmAG 時空表達分析本文利用半定量和qRT-PCR實時定量對AmAGP基因在其球莖、根部、葉柄、葉柄基部、葉片進行了時空表達特性研究,該基因在球莖和根部中表達量較高,其余器官中表達量較少。
【圖文】:
圖2八種珠芽魔芋花器官形態(tài)逡逑ure邋2邋Flower邋organ邋morphology邋analysis邋in邋eight邋kinds邋oiA.bulb1-8表示珠芽魔芋編號逡逑32逡逑
3.1.2珠芽魔芋無融合生殖率統(tǒng)計逡逑為進一步調查這8種珠芽魔芋的無融合生殖率,首先選取長勢一致的花序,逡逑當佛焰苞尚未打開時(圖3-a),此時的雄蕊及雌蕊均未成熟(圖3-b),削掉下段雌逡逑蕊上的柱頭(圖3-c)并統(tǒng)計數(shù)量,并于當年12月份統(tǒng)計果實坐果情況。通過調逡逑查發(fā)現(xiàn),經(jīng)人工授粉后的果實坐果率較高(圖3-d),處理后的珠芽魔芋果實數(shù)量逡逑差距較大(圖3-e)。經(jīng)統(tǒng)計發(fā)現(xiàn),珠芽魔1號、3號、4號、5號和7號均有結有逡逑果實。其中,2號珠芽魔芋果實數(shù)量最多,,達到631顆;扒開果皮后,統(tǒng)計種子的逡逑34逡逑
【學位授予單位】:云南大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2017
【分類號】:S632.3;Q943.2
【圖文】:
圖2八種珠芽魔芋花器官形態(tài)逡逑ure邋2邋Flower邋organ邋morphology邋analysis邋in邋eight邋kinds邋oiA.bulb1-8表示珠芽魔芋編號逡逑32逡逑
3.1.2珠芽魔芋無融合生殖率統(tǒng)計逡逑為進一步調查這8種珠芽魔芋的無融合生殖率,首先選取長勢一致的花序,逡逑當佛焰苞尚未打開時(圖3-a),此時的雄蕊及雌蕊均未成熟(圖3-b),削掉下段雌逡逑蕊上的柱頭(圖3-c)并統(tǒng)計數(shù)量,并于當年12月份統(tǒng)計果實坐果情況。通過調逡逑查發(fā)現(xiàn),經(jīng)人工授粉后的果實坐果率較高(圖3-d),處理后的珠芽魔芋果實數(shù)量逡逑差距較大(圖3-e)。經(jīng)統(tǒng)計發(fā)現(xiàn),珠芽魔1號、3號、4號、5號和7號均有結有逡逑果實。其中,2號珠芽魔芋果實數(shù)量最多,,達到631顆;扒開果皮后,統(tǒng)計種子的逡逑34逡逑
【學位授予單位】:云南大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2017
【分類號】:S632.3;Q943.2
【參考文獻】
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5 王繼s
本文編號:2657421
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