【摘要】：月季(Rose hybrida)原產于中國,是世界四大鮮切花之一。隨著月季產業(yè)的不斷發(fā)展,月季消費者的要求也日趨多樣化,但月季傳統(tǒng)的雜交育種方式由于其技術本身局限性和原始品種遺傳背景較為狹窄的限制使得其在對月季品種內在品質的改良已很難取得突破�，F(xiàn)代分子育種技術可以有針對性把優(yōu)良的目的基因快速的轉入受體植物,從而達到改良其內在品質的目的。正因為其技術的針對性和高效性,分子育種技術在月季的育種領域將發(fā)揮著不可取代的重要作用。本實驗以‘蜜桃雪山月季’(Rose.‘Peach Avalanche’)、‘雪山月季’(Rosa.‘Avalanche’)和‘粉佳人月季’(Rosa.‘Nirvana’)的帶芽莖段和葉片作為外植體,通過研究多組植物生長調節(jié)劑組合處理對月季腋芽萌發(fā)和葉片愈傷組織誘導的影響,研究了不同侵染時間與共培養(yǎng)時間對月季愈傷組織遺傳轉化效率的影響,并對轉化完成后的抗性愈傷組織進行了選擇擴繁的初步探索。本研究結果如下:1.通過不同激素配比培養(yǎng)基誘發(fā)‘蜜桃雪山’、‘雪山’和‘粉佳人’的帶芽莖段的腋芽萌發(fā)實驗得出‘蜜桃雪山’腋芽萌發(fā)最適培養(yǎng)基為MS+6-BA 1.5 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L;‘雪山’腋芽萌發(fā)最適培養(yǎng)基為MS+6-BA 1.5 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L;‘粉佳人’腋芽萌發(fā)最適培養(yǎng)基為MS+6-BA 1.5 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L。2.以‘蜜桃雪山’、‘雪山’和‘粉佳人’的無菌葉片和離體葉片作為外植體進行愈傷組織誘導,在培養(yǎng)基為MS+2,4-D 4.0 mg/L時,其愈傷組織誘導率均最高。其中無菌小葉的愈傷組織誘導率明顯高于離體葉片的愈傷組織誘導率,‘蜜桃雪山’、‘雪山’和‘粉佳人’無菌小葉的愈傷組織誘導率最高分別達到94.64%、97.78%和89.58%。3.研究了不同侵染時間和共培養(yǎng)時間對根癌農桿菌介導的月季愈傷組織遺傳轉化效率的影響。結果顯示,‘蜜桃雪山’、‘雪山’和‘粉佳人’的愈傷組織均在侵染時間為25 min時,共培養(yǎng)時間為3 d,GUS瞬時表達效率最高,分別為79.26%、69.33%和65.27%。4.通過降低選擇培養(yǎng)基中Hyg和Cef的濃度獲取了具有生理活性的抗性愈傷組織�！厶已┥健汀┥健@取的具有HygB抗性的陽性愈傷組織在MS+2,4-D2.0 mg/L+Hyg 10 mg/L+Cef 250 mg/L的培養(yǎng)基中正常生長,且恢復了生理活性。
【圖文】：

技術路線圖

圖3-1月季腋芽萌發(fā)Fig.3-1Roseaxillarybudgermination注：A.部分葉片未展開就發(fā)黃枯萎；B,C.正常生長的葉片；D.莖段中部出現(xiàn)少量愈傷組織；
【學位授予單位】：云南大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：S685.12

【參考文獻】

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本文編號：2644674