【摘要】：硒作為一種自然界中存在量較少但又不可或缺的微量元素,對世界范圍內(nèi)的生物具有重要意義。富硒食品是一種方便有效的方法,可直接補充人體內(nèi)的硒,并利用外源性硒肥培育富硒作物。植物可以有效將硒通過自身生長代謝與吸收轉(zhuǎn)化為有機硒化合物。本研究以土壤富硒葡萄為研究樣品,研究硒對葡萄吸收轉(zhuǎn)化效果及其生物活性;選取微波密閉消解-氫化物發(fā)生原子熒光分光光譜(HG-AFS)法對富硒葡萄中硒元素進行分析;采用紫外可見分光光譜法(UV)研究富硒葡萄中硒蛋白、硒多糖等含硒化合物的抗氧化、清除自由基等生物活性;采用電感耦合等離子體質(zhì)譜(ICP-MS)法研究硒對葡萄中鐵(Fe)、鈣(Ca)等16種元素的促進或拮抗作用;采用高效液相色譜-質(zhì)譜(HPLC-ESI-MS)聯(lián)用技術(shù)對富硒葡萄中有機硒、無機硒等硒的不同形態(tài)進行分析研究。得出結(jié)果如下:1.在土壤噴灑硒肥范圍(20 mg/L-200 mg/L)內(nèi),沒有出現(xiàn)中毒現(xiàn)象,說明噴硒量處于葡萄的耐受范圍。本研究采用微波密閉消解與HG-AFS技術(shù),對富硒葡萄內(nèi)總硒含量進行分析。結(jié)果表明,葡萄中總硒含量為165.64-480.32 ug/kg,是對照組的22-67倍,說明葡萄能夠有效富集施加在土壤的無機硒肥。2.選擇超純水、HCl、NaOH、NaCl、PBS和Tris-HCl作為浸提劑,對富硒葡萄中可溶態(tài)硒進行分析,研究獲得富硒葡萄中不同溶解態(tài)硒的分布情況:NaOH態(tài)HCl態(tài)H_2O態(tài)NaCl態(tài)Tris-HCl態(tài)PBS態(tài),得出在堿溶態(tài)下葡萄中的硒遷移轉(zhuǎn)化能力及硒的可吸收利用性最強。3.單因素實驗獲得富硒葡萄中可溶性蛋白的最佳條件是:NaOH濃度為0.1mol/L、料液比為1:15、提取時間90 min、提取溫度40℃。最佳條件下,富硒葡萄中可溶性蛋白含量最高的施硒梯度為160 mg/L,樣品中可溶性蛋白含量為16.78 mg/g。當施硒梯度增高,富硒葡萄蛋白硒的含量亦增大,最高為44.14μg/kg。4.單因素實驗獲得富硒葡萄中可溶性多糖的最優(yōu)條件是:料液比1:20,浸提時間90 min,浸提溫度75℃。最優(yōu)條件下各施硒梯度富硒葡萄中可溶性多糖含量最高的梯度為160 mg/L,可溶性多糖含量為455.92 mg/g。結(jié)果表明,當施硒梯度變化,富硒葡萄中多糖硒亦增加,當施用的硒量為200 mg/L時,多糖的最大硒含量達到134.50μg/kg,且樣品中多糖硒的分布要優(yōu)于蛋白硒。5.在實驗濃度范圍內(nèi),基于富硒葡萄中多糖的硒結(jié)合能力和還原力等生物活性都大于硒蛋白,硒多糖、硒蛋白均在施硒梯度處于160 mg/L時活性處于最大值,對生產(chǎn)具有抗氧化活性的富硒葡萄具有明顯的指導性,且葡萄內(nèi)硒多糖還原能力明顯優(yōu)于硒蛋白。6.采用ICP-MS法對富硒葡萄中16種元素進行定量分析。研究得到,不同富硒梯度樣品中16種元素呈現(xiàn)各自變化趨勢。隨著噴硒濃度的逐漸增加,Cu、Mg、Cr、Hg元素受硒的生物作用不明顯;Mo、V、Mn、Zn、Ca元素的含量有促進作用;硒對重金屬元素如Co、Ag、As、Pb具有顯著的抑制作用。7.采用HPLC-ESI-MS聯(lián)用技術(shù),定性且定量地分析富硒葡萄中有機硒與無機硒。優(yōu)化酶解葡萄中硒蛋白的條件,獲得硒代氨基酸。選擇MRM模式進行監(jiān)測,結(jié)果表明,富硒葡萄中存在大量硒代氨基酸。在實驗范圍內(nèi),富硒葡萄中硒代氨基酸含量呈現(xiàn)上升趨勢,并在施硒濃度為160 mg/L時處于最大量,SeCys_2,Se-Met,Se-MeSeCys的峰值分別為4.52,16.51,3.87 ug/kg。而無機硒不存在于富硒葡萄內(nèi)。說明葡萄可以從施加硒肥的土壤中吸收硒元素并有將無機硒通過自身代謝機制將其轉(zhuǎn)化為無毒的有機硒,因此,將富硒葡萄作為日常硒補劑十分安全可靠。
【圖文】：

7圖 1-1 富硒葡萄樣品的培育與采集土壤采自培育富硒葡萄的試驗田，在每小區(qū)內(nèi)采用五點取樣法采集試驗田0-10 cm 深處的土壤。土壤樣品經(jīng)風干后，，研堝碾碎過 80 目篩網(wǎng)去除粗大顆粒泥沙，而后過 100 目篩網(wǎng)留存過篩網(wǎng)后顆粒，均勻且細膩的土壤泥沙為研究樣品，最后將所得土壤樣品密封并在室溫下的陰涼干燥處保存待用。1.2.3 富硒葡萄樣品與施硒土壤的前處理本研究中選取優(yōu)級純硝酸（HNO3）作為富硒葡萄微波消解的消解試劑。精確稱取 0.2 g 富硒葡萄粉末，加入 5 mL HNO3，按表 1-2 的消解程序進行消解。

原子化器高度輔陰極電流8 mm40 mA載氣流量屏蔽氣流量延遲時間讀數(shù)方式總電流測定方式400 mL/min1000 mL/min1.6 s峰面積80 mA標準曲線法 結(jié)果與討論.1 方法的標準曲線經(jīng) 1.2.5 配制標準溶液獲得的數(shù)據(jù)制作硒標準曲線，在 0-50 ug/L 范圍內(nèi).54 %，方法檢出限為 0.79 ug/L。
【學位授予單位】：遼寧大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：S663.1

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 孫梅;吳強華;;農(nóng)產(chǎn)品中硒形態(tài)分析的研究進展[J];理化檢驗(化學分冊);2015年11期

2 顧浩峰;;食品中硒元素的形態(tài)分析研究進展[J];食品與發(fā)酵科技;2015年02期

3 陳丹碩;杜艷;梁鋒;郝靜;馬萍;吳晶;季成軍;;國內(nèi)富硒食品研究開發(fā)現(xiàn)狀及發(fā)展趨勢分析[J];微量元素與健康研究;2014年01期

4 王欣;幸苑娜;陳澤勇;梁波;;高效液相色譜-電感耦合等離子體質(zhì)譜法檢測富硒食品中6種硒形態(tài)[J];分析化學;2013年11期

5 張華華;康玉凡;;植物吸收和轉(zhuǎn)化硒的研究進展[J];山地農(nóng)業(yè)生物學報;2013年03期

6 于振;李建科;李夢穎;馬倩倩;黃瑞蕊;何曉葉;李佳;;食品中微量硒測定方法研究進展[J];食品工業(yè)科技;2012年18期

7 路燕;楊惠超;李剛;卜春華;;酵母硒對亞慢性鉛中毒小鼠排鉛作用的實驗研究[J];特產(chǎn)研究;2012年01期

8 夏弈明;;中國人體硒營養(yǎng)研究回顧[J];營養(yǎng)學報;2011年04期

9 劉洪娜;文禮湘;譚琥;成壯;譚周進;;硒多糖的藥理活性研究進展[J];中國藥業(yè);2010年05期

10 田秀英;李會合;王正銀;;施硒對苦蕎N,P,K營養(yǎng)元素和土壤有效養(yǎng)分含量的影響[J];水土保持學報;2009年03期

本文編號：2632180