【摘要】：棗是我國特有經(jīng)濟(jì)果樹及重要木本糧食樹種,具有豐富的營養(yǎng)價值和藥用價。裂果是鮮棗常見的生理性病害。鮮棗在儲藏期間易產(chǎn)生果實開裂,嚴(yán)重影響棗果品質(zhì),造成巨大經(jīng)濟(jì)損失。本研究以湖南省祁東縣新豐果業(yè)有限公司紫沖種植基地為試驗地,以'中秋酥脆棗'為試驗材料,用H2O2、Ca(NO3)2、NaCl和ABA對棗果進(jìn)行浸泡處理,統(tǒng)計分析裂果方式、裂果率、裂果指數(shù)、轉(zhuǎn)紅指數(shù)、吸水率、果實硬度、丙二醛等指標(biāo)的相關(guān)性;采用考馬斯亮藍(lán)法、試劑盒的方法,測定棗果中可溶性蛋白含量及水通道蛋白酶活性,熒光定量PCR測定水通道蛋白基因mRNA的表達(dá)量,并分析它們與裂果率之間的關(guān)系。通過研究得出以下結(jié)論:1.棗裂果方式主要以縱裂和環(huán)裂為主,不規(guī)則列占有比例較小。黑暗環(huán)境下能夠顯著降低裂果率、裂果指數(shù)和轉(zhuǎn)紅指數(shù)。綜合光照和黑暗環(huán)境,l%NaCl處理的裂果率和裂果指數(shù)最低,是最佳防裂果的處理。光照環(huán)境下,僅1%NaCl處理和0.25mg/L ABA處理的轉(zhuǎn)紅指數(shù)高于對照。黑暗環(huán)境下轉(zhuǎn)紅指數(shù)波動較大,且普遍低于光照環(huán)境的轉(zhuǎn)紅指數(shù)。光照環(huán)境下,吸水率最低的是0.01%NaCl處理;而黑暗條件下,吸水率最低的是1%NaCl處理;黑暗環(huán)境下吸水率普遍高于光照環(huán)境的吸水率。光照條件下,90mg/LCa(NO3)2處理的果實硬度最大,且Ca(NO3)2處理的平均果實硬度最大;黑暗條件下,僅120mg/LCa(NO3)2處理的果實硬度大于對照處理;黑暗條件下果實硬度普遍高于光照環(huán)境條件下果實硬度。2.不同裂果方式之間的相關(guān)性多為負(fù)值,其中縱裂和環(huán)裂的相關(guān)性達(dá)到顯著水平。光照條件下,縱裂+環(huán)裂與裂果率顯著相關(guān),與裂果指數(shù)和轉(zhuǎn)紅指數(shù)相關(guān)性達(dá)到極顯著水平;黑暗環(huán)境下,縱裂+環(huán)裂僅與裂果指數(shù)達(dá)到極顯著水平。光照條件下,裂果率與裂果指數(shù)、吸水率、轉(zhuǎn)紅指數(shù)呈正相關(guān),且與裂果指數(shù)的相關(guān)性達(dá)到極顯著水平,與轉(zhuǎn)紅指數(shù)的相關(guān)性達(dá)到顯著水平;但與果實硬度呈負(fù)相關(guān)。黑暗條件下,裂果率與裂果指數(shù)達(dá)到極顯著水平,相關(guān)性系數(shù)為0.85,呈正相關(guān);裂果率與果實硬度、吸水率、轉(zhuǎn)紅指數(shù)均呈正相關(guān),但相關(guān)性不顯著。3.所有處理組丙二醛含量均高于對照組。光照條件下,H2O2處理組的平均丙二醛含量最低,且丙二醛含量與裂果率呈負(fù)相關(guān),相關(guān)性不顯著。在黑暗環(huán)境條件下,Ca(NO3)2處理組的平均丙二醛含量低于其他處理組,但0.005%H2O2處理的丙二醛含量最低,且丙二醛含量與裂果率呈正相關(guān),相關(guān)性不顯著。4.光照條件下果皮和果肉相對電導(dǎo)率具有較好的協(xié)調(diào)性,但黑暗環(huán)境條件下,果肉與果皮的相對電導(dǎo)率隨處理溶液濃度的變化而不同。所有處理組的果皮電導(dǎo)率均高于對照組,其中ABA處理組的果皮和果肉相對電導(dǎo)率平均值低于其他處理組,0.4mg/LABA處理的果皮相對電導(dǎo)率最低,但與對照組差異不顯著,0.01%H2O2處理的果肉相對電導(dǎo)率最低,與對照組差異顯著;黑暗環(huán)境下,所有處理組的相對電導(dǎo)率均高于對照組,其中NaCl處理的果皮的相對電導(dǎo)平均值低于其他處理組,0.1%NaCl處理的果皮相對電導(dǎo)率最低,與對照組差異顯著,Ca(NO3)2處理的果肉的相對電導(dǎo)率平均值低于其他處理組,0.01%NaCl和0.4mg/LABA處理的果肉相對電導(dǎo)率最低,與對照相比均達(dá)到顯著水平。5.ABA處理的角質(zhì)層厚度平均值大于其他處理。光照條件下,裂果率與角質(zhì)層厚度、皮下層厚度和表皮厚度呈正相關(guān),與表皮層厚度呈負(fù)相關(guān),但均達(dá)不到顯著水平。表皮層厚度與皮下層厚度呈正相關(guān),達(dá)到極顯著水平,相關(guān)系數(shù)為0.96。黑暗條件下,裂果率與角質(zhì)層厚度、皮下層厚度和表皮厚度的均呈正相關(guān),與表皮層厚度呈負(fù)相關(guān),但均未達(dá)到顯著水平。皮下層厚度與表皮厚度相關(guān)系數(shù)為0.95,達(dá)到顯著水平。6.ABA處理的可溶性蛋白含量平均值大于其他處理組,其中0.1mg/LABA處理可溶性蛋白含量最高。光照環(huán)境下水通道蛋白酶活性普遍低于黑暗環(huán)境下水通道蛋白酶活性。在光照條件下,Ca(NO3)2處理的水通道蛋白酶活性普遍弱于其他處理組;在黑暗環(huán)境下,H202處理的水通道蛋白酶活性普遍低于其他處理,0.005%H202處理的水通道蛋白酶的活性最低,與對照相比達(dá)到顯著水平,降低了46.2%。綜合光照和黑暗環(huán)境,裂果率與水通道蛋白酶活性呈負(fù)相關(guān),相關(guān)系數(shù)為-0.12;與可溶性蛋白呈正相關(guān),相關(guān)系數(shù)為0.08,但均達(dá)不到顯著水平。7.光照環(huán)境下水通道蛋白基因mRNA相對表達(dá)量普遍低于黑暗環(huán)境下水通道蛋白基因mRNA相對表達(dá)量,光照會抑制水通道蛋白基因mRNA的表達(dá)。光照環(huán)境下,ABA處理的的水通道蛋白基因mRNA相對表達(dá)量普遍低于其他處理。水通道蛋白酶基因mRNA表達(dá)量與裂果率成負(fù)相關(guān),但相關(guān)性不顯著。在黑暗環(huán)境下,NaCl處理的水通道蛋白基因mRNA相對表達(dá)量普遍低于其他處理,水通道蛋白基因mRNA表達(dá)量與裂果率成正相關(guān),但相關(guān)性不顯著。
【圖文】：

將逆轉(zhuǎn)錄后得到的模板ｃＤＮＡ進(jìn)行稀釋，稀釋濃度梯度為１、１０、１０２、１０３、逡逑１０４、１０５倍，各取５ｕｌ作為反應(yīng)模板分別以目的基因ＺｊＰＩＰ２和內(nèi)參基因ＺｊＨ３作逡逑為引物進(jìn)行熒光定量ＰＣＲ，反應(yīng)參數(shù)條件見圖２－１。反應(yīng)結(jié)束后通過ＣＦＸＭａｎａｇｅｒ逡逑軟件建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，當(dāng)目的基因及內(nèi)參基因擴(kuò)增效率在８０％至１２０之間，同時逡逑Ｒ２接近１，說明結(jié)果可信度較高，符合熒光定量ＰＣＲ要求�？蛇M(jìn)一步進(jìn)行待檢逡逑樣品檢測。逡逑（２）熒光定量ＰＣＲ逡逑應(yīng)用ＣＦＸ９６邋Ｒｅａｌ－Ｔｉｍｅ邋ＰＣＲ邋Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ邋Ｓｙｓｔｅｍ操作方法，以獲得的棗果果皮逡逑的ｃＤＮＡ作為模板，進(jìn)行實時熒光定量ＰＣＲ反應(yīng)。每個樣品均作３個復(fù)孔以減逡逑少操作誤差，每個樣品均有內(nèi)參基因ＺｊＨ３作為對照。目的基因和內(nèi)參基因分別逡逑以們／１１１、？２／１１２作為引物進(jìn)行擴(kuò)增。實時熒光定量？０１反應(yīng)通過R%0１＾（１逡逑ＣＦＸ９６ＴＭ邋Ｒｅａｌ－Ｔｉｍｅ邋Ｓｙｓｔｅｍ邋和邋Ｂｉｏ邋Ｒａｄ邋ＣＦＸ邋Ｍａｎａｇｅｒ邋Ｓｏｆｔｗａｒｅ邋得以運(yùn)行。ＰＣＲ逡逑反應(yīng)液按表２－６組份進(jìn)行配制（反應(yīng)液配制均在冰上進(jìn)行），預(yù)混液體積至少多逡逑于所有反應(yīng)用總體積的１０％，以減少吸取誤差，熒光信號的收集設(shè)置在延伸階段。逡逑擴(kuò)增完畢后

圖３－１光照環(huán)境下不同處理裂果率的統(tǒng)計逡逑Ｆｉｇ．邋３－１邋Ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ邋ｏｆ邋ｆｒｕｉｔ邋ｃｒａｃｋｉｎｇ邋ｒａｔｅ邋ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ邋ｔｒｅａｔｍｅｎｔ邋ｕｎｄｅｒ邋ｌｉｇｈｔｉｎｇ邋ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ逡逑由圖３－２可以看出，在黑暗環(huán)境下，不同外源物質(zhì)處理對裂果率的影響表現(xiàn)逡逑不同。Ｈ２０２處理的裂果率隨著處理溶液濃度的增加呈先增加后降低趨勢，逡逑Ｃａ（Ｎ0３）２處理的裂果率隨著處理溶液濃度的增加呈增加趨勢，ＮａＣｌ處理的裂果逡逑率隨著處理溶液濃度的增加呈降低趨勢，ＡＢＡ處理的裂果率隨著處理溶液濃度逡逑的增加呈先降低后增加趨勢。與清水浸泡的對照處理相比，各處理的裂果率均氋逡逑于對照處理，其中以Ｈ２處理的裂果率最高為９６％，比對照增加６４．３％；邋Ｃ１和逡逑Ｎ３處理的裂果率最低為６０％，，比對照增加７．１４％。逡逑黑暗環(huán)境逡逑１００１逡逑ＨＩ邋Ｈ２邋Ｈ３邋Ｃｌ邋Ｃ２邋Ｃ３邋Ｎ１邋Ｎ２邋Ｎ３邋Ａ１邋Ａ２邋Ａ３邋ＣＫ逡逑不同處理逡逑ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ邋ｔｒｅａｔｍｅｎｔ逡逑圖３－２黑暗環(huán)境下不同處理裂果率的統(tǒng)計逡逑Ｆｉｇ．邋３－２邋Ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ邋ｏｆ邋ｆｒｕｉｔ邋ｃｒａｃ
【學(xué)位授予單位】：中南林業(yè)科技大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：S665.1

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2626693