【摘要】：芍藥(Paeonia lactiflora Pall.)隸屬芍藥科芍藥屬,是國內(nèi)外著名的觀賞植物,極具商業(yè)價(jià)值。然而,現(xiàn)代商品花卉廣泛使用的組織培養(yǎng)技術(shù)尚未被成功應(yīng)用在芍藥屬植物上,這不僅限制了芍藥的規(guī)�；a(chǎn),也使分子生物學(xué)方面的研究難以開展。本研究通過對芍藥成熟合子胚和地下芽離體培養(yǎng)的優(yōu)化,為芍藥組培快繁體系的建立提供了技術(shù)支持;同時(shí),應(yīng)用組織切片技術(shù)追蹤不定根的發(fā)生規(guī)律,揭示發(fā)生機(jī)理,為解決芍藥生根難題提供理論依據(jù)。此外,本研究對體細(xì)胞胚間接誘導(dǎo)途徑進(jìn)行了探索,嘗試通過誘導(dǎo)胚性愈傷組織的發(fā)生解決愈傷組織再分化難題。主要結(jié)果如下:1、WPM培養(yǎng)基是'杭白芍'合子胚離體培養(yǎng)的最適基本培養(yǎng)基,1/2MS(Ca2+加倍)是'粉玉奴'的最適基本培養(yǎng)基。二者在啟動(dòng)和增殖培養(yǎng)階段的最佳激素配比為6-BA 1.0 mg·L-1+GA3 0.5 mg·L-1。'杭白芍'組培苗的繼代次數(shù)應(yīng)控制在4次以內(nèi),最佳生根培養(yǎng)基為1/2MS(Ca2+加倍)+IBA 1.0 mg·L-1+腐胺0.5 mg·L-1。2、5個(gè)切花芍藥品種中,'Karl Rosenfield'污染率最低,最適宜進(jìn)行叢生芽誘導(dǎo)。1/2MS(Ca2+加倍)+0.5 mg·L-1 6-BA+0.2 mg·L-1KT 是最佳增殖培養(yǎng)基,'Karl Rosenfield'在該培養(yǎng)基的增殖系數(shù)為6.08,且基本無褐化和玻璃化發(fā)生。生根階段,株高≥ 3cm、葉片數(shù)較多的Ⅲ級(jí)苗生根效果最好,植物生長調(diào)節(jié)劑以單獨(dú)添加1.0 mg·L-1 IBA的1/2MS培養(yǎng)基效果最好。3、芍藥不定根的發(fā)生需要植物生長調(diào)節(jié)劑的誘導(dǎo),屬于誘導(dǎo)生根類型。不定根多位點(diǎn)和不同步的發(fā)生方式是芍藥生根難的重要原因。芍藥組培苗接種到生根培養(yǎng)基后,莖部的維管束處和分裂分化旺盛的愈傷組織處會(huì)逐漸形成排列緊密、呈團(tuán)狀的根原基原始細(xì)胞,根原基原始細(xì)胞分裂分化形成圓球形的根原基,并不斷向表皮生長,最后突破表皮伸出形成不定根。4、胚性愈傷組織的誘導(dǎo)效率由高到低依次為:合子胚子葉胚軸。NAA和TDZ配合使用有利于胚性愈傷組織的誘導(dǎo),當(dāng)激素組合為NAA 0.5 mg.L-1+TDZ 1.0 mg·L-1 或 NAA 0.5 mg·L-1+TDZ 0.5 mg·L-1,成熟的'杭白芍'合子胚可誘導(dǎo)出疏松、黃綠色且表面顆粒狀的胚性愈傷組織。子葉和下胚軸的預(yù)培養(yǎng)時(shí)間不宜過長,以40d之內(nèi)為宜。子葉誘導(dǎo)愈傷組織的最佳激素組合為MS+2,4-D 2.0 mg·L-1+TDZ 0.2 mg·L-1+CH 300 mg·L-1;下胚軸誘導(dǎo)愈傷組織的最佳激素組合為MS+2,4-D 2.0 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1+TDZ 0.2 mg·L-1。
【圖文】：

圖0由心走寶功獲薄期〕娜

株氋Ｓｌｃｍ，葉片數(shù)較少；ＩＩ級(jí)苗：ｌｃｍ￡株高Ｓ３ｃｍ，葉片數(shù)居中；ＩＩＩ級(jí)苗：逡逑株高２邋３ｃｍ，葉片數(shù)較多。逡逑分級(jí)后，將組培苗（圖３．２，，邋Ｂ）移入到生根培養(yǎng)基。培養(yǎng)３ｄ后，組培苗莖逡逑基部的愈傷處出現(xiàn)可見的凸起。培養(yǎng)５ｄ后，有些組培苗莖基部的凸起處長出白逡逑色的愈傷（圖３．２，邋Ｄ），培養(yǎng)至１０ｄ，這些白色愈傷逐漸長成新根，并不斷伸長逡逑生長（圖３．２，邋Ｆ）。培養(yǎng)１５？３０ｄ天，組培苗的根部伸長并基本保持穩(wěn)定（圖逡逑３．２，邋Ｃ、Ｆ）。逡逑２１逡逑
【學(xué)位授予單位】：北京林業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：S682.12

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本文編號(hào)：2626250