發(fā)布時(shí)間：2020-04-09 01:25

【摘要】：選育品質(zhì)優(yōu)良的無(wú)核果實(shí)是柑橘育種者的主要目標(biāo)。因?yàn)闇p數(shù)分裂過(guò)程發(fā)生異常,三倍體柑橘無(wú)法形成正常類型配子而高度不育,是天然的無(wú)核類型。倍性雜交是獲得三倍體無(wú)核柑橘的重要途徑之一。本研究主要以性狀優(yōu)良但多籽的二倍體柑橘品種作母本,與雙二倍體或異源四倍體體細(xì)胞雜種作父本進(jìn)行倍性雜交,并結(jié)合胚挽救及流式細(xì)胞儀倍性鑒定,以期培育一批具有優(yōu)良性狀的柑橘三倍體有性后代,為選育無(wú)核柑橘新品種及其相關(guān)研究提供豐富的實(shí)驗(yàn)材料。主要實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:1.以單胚性二倍體品種作母本的2X×4X雜交組合創(chuàng)制柑橘三倍體。以沙田柚等6個(gè)單胚性二倍體為母本與5個(gè)異源四倍體和2個(gè)雙二倍體為父本進(jìn)行雜交,配置得到11個(gè)雜交授粉組合。從299個(gè)授粉果實(shí)中共剝?nèi)?526粒種子,經(jīng)胚挽救獲得362株再生植株,對(duì)全部再生植株倍性鑒定后得到285株三倍體和2株四倍體植株,三倍體發(fā)生率為78.73%,四倍體發(fā)生率為0.55%。目前,所有成活的三倍體和四倍體植株均已移栽至溫室,絕大部分植株已嫁接至田間。利用篩選獲得的7對(duì)多態(tài)性SSR引物,對(duì)沙田柚×4Xi*柑等2個(gè)組合的36個(gè)雜交后代植株進(jìn)行遺傳鑒定,結(jié)果表明16株二倍體植株為非雜種后代,20株三倍體植株為雙親的有性后代。2.以多胚性二倍體作母本的2X×4X倍性雜交組合創(chuàng)制柑橘三倍體。以W.默科特橘橙等4個(gè)多胚性二倍體為母本,與9個(gè)四倍體父本材料進(jìn)行有性雜交,配置得到11個(gè)雜交授粉組合。對(duì)2015-2016年829個(gè)幼果的8181粒種子進(jìn)行離體培養(yǎng)后得到2697株再生植株。經(jīng)倍性鑒定共得到185株多倍體,其中三倍體植株107株,占多倍體的57.84%;四倍體植株78株,占多倍體的42.16%,已經(jīng)成活的三倍體植株和四倍體植株均已移栽至溫室,部分生長(zhǎng)健壯的多倍體已嫁接至田間。2017年以W.默科特橘橙為母本的雜交組合,對(duì)223個(gè)幼果的2122粒種子進(jìn)行胚挽救,目前胚狀體仍在誘導(dǎo)生芽與生根階段,暫未獲得多倍體植株。在胚挽救的過(guò)程中發(fā)現(xiàn),從植株下胚軸和幼嫩的胚狀體周圍長(zhǎng)出許多胚性愈傷組織,且父本材料不同,其愈傷組織的胚性發(fā)生能力不同。將這些胚性愈傷組織在MT固體培養(yǎng)基多次繼代后發(fā)現(xiàn)其胚胎發(fā)生能力也逐漸減弱。經(jīng)倍性鑒定,12個(gè)不同株系的愈傷組織為二倍體,1個(gè)為二倍體和三倍體的混倍體,遺傳雜合性有待后續(xù)鑒定。目前這些胚性愈傷組織已被用作本課題組相關(guān)研究的實(shí)驗(yàn)材料。此外,利用篩選獲得的3對(duì)多態(tài)性SSR引物,對(duì)本地早橘×4Xi*柑組合的雜交后代植株進(jìn)行遺傳鑒定,結(jié)果表明29株三倍體植株為雙親的有性后代,1株四倍體植株為母本珠心細(xì)胞加倍形成的雙二倍體。3.利用2X×2X創(chuàng)制柑橘新種質(zhì)。以W.默科特橘橙為母本與2個(gè)二倍體品種為父本進(jìn)行雜交,對(duì)2個(gè)組合476個(gè)幼果的987粒種子進(jìn)行胚挽救,從W.默科特橘橙×紅橘組合90株再生植株中篩選獲得9株三倍體和2株四倍體,發(fā)生率分別為10.00%和2.22%;W.默科特橘橙×鄂柑1號(hào)i*柑組合的胚狀體仍在誘導(dǎo)生芽與生根。對(duì)山金柑×血橙的276粒種子進(jìn)行離體播種培養(yǎng),已獲得再生植株67個(gè)株系,均已移栽至溫室。
【圖文】：

座果數(shù)為210個(gè)，平均座果率26.14%。觀察表4可以發(fā)現(xiàn)，不同的雜交組合，其座果率不同：金沙柚 ×MM的座果率最低，為17.50%；金沙柚 ×4X Suc的座果率最高，，為48.39%。經(jīng)胚挽救（圖1），從133個(gè)幼果中剝?nèi)〉玫?850粒種子并離體培養(yǎng)，最終得到175株再生植株。圖 1 單胚性二倍體為母本的雜交組合胚挽救與植株移栽a-b：金沙柚 ×4X Suc 授粉后 85 d 的果實(shí)（下）及開(kāi)放授粉后 85 d 的果實(shí)（上）；c：接種于萌發(fā)培養(yǎng)基的種子；d：經(jīng)生根培養(yǎng)形成的完整植株；e：三倍體植株煉苗；f：移入塑料杯的三倍體；g：移入大營(yíng)養(yǎng)缽的三倍體Fig. 1 Embryo rescue and transplantation of triploids with monoembryonic cultivars as seed parentsa-b: Fruits obtained from hybridization of Jinsha pummelo ×4X Suc 85 d after pollination (down) and open pollinatedfruits (upper); c: Seeds cultured in medium for germination; d: Seedlings

W. 默科特橘橙 × VP 258 228 88.37 223 2122 ——合計(jì) 3900 1079 31.17 1052 10303 2697經(jīng)胚挽救（圖2），2015年4個(gè)雜交組合授粉總數(shù)為1239朵花，得到340個(gè)幼果，平均座果率為25.97%。由表5可知，同一母本在同一年份內(nèi)與不同父本雜交，其坐果率也有差異：W. 默科特橘橙 ×PO的座果率為24.68%，而W. 默科特橘橙 ×4Xi*柑的座果率為50.37%，明顯高于W. 默科特橘橙 × PO的座果率。從其中的334個(gè)幼果剝?nèi)?868粒種子，經(jīng)萌發(fā)、生芽和生根誘導(dǎo)，最終獲得1265株再生植株；2016年7個(gè)雜交組合共授粉2403朵花
【學(xué)位授予單位】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：S666

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2620093