發(fā)布時(shí)間：2024-05-28 19:47

　　鉀離子通道是細(xì)胞膜上僅允許鉀離子通過的一類重要離子通道,參與機(jī)體多種生理功能的調(diào)節(jié),在魚類先天性免疫防御中起著十分重要的作用。KCNN2屬于小電導(dǎo)鈣激活型鉀離子通道家族,具有Ca2+高敏感性和K+選擇性等特點(diǎn),是淋巴細(xì)胞和中性粒細(xì)胞上的鉀離子通道之一。淋巴細(xì)胞和中性粒細(xì)胞是生物體重要的免疫細(xì)胞,當(dāng)細(xì)胞受刺激被激活時(shí),鉀離子通道通過調(diào)節(jié)胞內(nèi)離子濃度和膜電位水平,參與淋巴細(xì)胞和中性粒細(xì)胞的激活、呼吸爆發(fā)、細(xì)胞因子分泌和整個(gè)機(jī)體的免疫應(yīng)答。星斑川鰈(Platichthys stellatus)是一種極具商業(yè)開發(fā)價(jià)值的比目魚,目前被認(rèn)為是繼大菱鲆(Psetta maxima)、牙鲆(Paralichthys olivaceus)之后潛力巨大的養(yǎng)殖魚類之一。水產(chǎn)養(yǎng)殖病害的頻繁爆發(fā),嚴(yán)重限制了養(yǎng)殖業(yè)在我國的健康可持續(xù)發(fā)展。研究發(fā)現(xiàn)鉀離子通道與機(jī)體的多種免疫功能發(fā)揮作用都有著密不可分的關(guān)系。因此,深入了解鉀離子通道在星斑川鰈先天性免疫防御機(jī)制和調(diào)控機(jī)制中的作用,對于揭示魚類免疫應(yīng)答機(jī)制、控制魚類病害的發(fā)生、推動(dòng)星斑川鰈養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的發(fā)展等都有著重要的理論和現(xiàn)實(shí)意義。本文以星斑川鰈外周血中淋巴細(xì)胞的cDN...

【文章頁數(shù)】：92 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．２鐘離子通道分類［９３Ｊ??

＝個(gè)亞類［８１趙］。??１．３．２．３電壓口控型鐘離子通道（Ｋｖ）??電壓口控型卿離子通道有１個(gè)Ｐ區(qū)和６個(gè)跨膜區(qū)，如圖１．２Ａ所示。該通道的開??放與關(guān)閉是由膜內(nèi)外電位的變化來調(diào)控的，因化該通道又被成為電壓依賴型巧??離子通道。Ｋｖ通道是鐘離子通道家族中成員最多，研巧最深入的一類....

圖１．３星斑川蝶（正面觀）??巧餐．１．３?Ｓｔａｒｒｙ?ｆｌｏｕｎｄｅｒ?（尸ｔｏ／ｃ■知片５化／／幻ｔｏ）??

海水養(yǎng)殖業(yè)的病害問題。??１．４本研究的主要內(nèi)容及意義??本研究的實(shí)驗(yàn)材料為星斑川鱗（如圖１．３所示）。星斑川蝶（巧咕Ｓ??？Ｓ化化前＜５?）隸屬媒形目（Ｐｌｅｕｒｏｎｅｃｔｉｆｏｒｍｅｓ）媒科（Ｐｌｅｕｒｏｎｅｃｔｉｄａｅ?），星媒屬??（巧如Ｗｉ／皆＊），又名星鱗、星突江饌、....

圖２．１星斑川蝶外周血淋己細(xì)胞計(jì)數(shù)??Ｆｉｇ．?２．１?Ｔｈｅ?ｃｏｕｎｔ?ｏｆｌｙｍｐｈｏｃｙ?化?Ｓ?ｓｅｐａｒａｔｅｄ?ｆｒｏｍ?Ｓ?化?ｎｙ?ｆｌｏｕｎｄｅｒ?ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ?ｂｌｏｏｄ??

２．２．１淋田細(xì)跑的計(jì)數(shù)??將過夜培養(yǎng)的淋己細(xì)胞在倒置顯微鏡下觀察，發(fā)現(xiàn)淋己細(xì)胞懸浮生長，呈圓??形和欄圓形，用臺(tái)盼盛染色，進(jìn)行淋己細(xì)胞活細(xì)胞計(jì)數(shù)（圖２．１），經(jīng)計(jì)算分離到??的淋己細(xì)胞達(dá)到１０６個(gè)／ｍＬ，存活率在９９％Ｌ：Ｊ？上，按照這種條件培養(yǎng)的淋臣細(xì)胞??可穩(wěn)定存活４－５天....

圖２．２星斑川魏ｃＤＮＡＰＣＲ結(jié)果??．．

?１．９６１??２．２．３?ｃＤＮＡ?質(zhì)童??Ｗ?ｐ－ａｃｔｉｎ?Ｆ和ｐ－ａｃｔｉｎ民為引物對淋己細(xì)胞ｃＤＮＡ進(jìn)行ＰＣＲ，結(jié)果如圖２．２??所示。Ｐ－ａｃｔｉｎＰＣ民產(chǎn)物大小約在１８０ｂｐ，與預(yù)期片段大小一致，說明逆轉(zhuǎn)錄合成??的ｃＤＮＡ質(zhì)量較好ＵＷ，可１＾作為鐘離子通道基因克隆....

本文編號(hào)：3983640