Wnt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在器官的發(fā)生、癌癥以及多細(xì)胞生物體軸分化過(guò)程中起著重要作用。本論文主要以紅鯽中的Gsk3β和Dvl2基因?yàn)檠芯繉?duì)象。先采用RACE(rapid-amplification of c DNA ends)克隆技術(shù)獲得紅鯽Gsk3β和Dvl2基因的c DNA全長(zhǎng),再分別通過(guò)半定量RT-PCR技術(shù)和蛋白免疫印記(Western Blot)技術(shù)分析Gsk3β和Dvl2基因在m RNA水平和蛋白水平上的表達(dá)差異。最后通過(guò)一定濃度的鎘處理,比較分析了Gsk3β與β-catenin的表達(dá)情況。結(jié)果顯示:(1)Gsk3β基因全長(zhǎng)為2195bp,編碼421個(gè)氨基酸,預(yù)測(cè)蛋白分子量約為46846.40,等電點(diǎn)為9.05。比較不同物種氨基酸的同源相似性,Gsk3β蛋白序列和斑馬魚的相似度是98.5%,與小鼠的相似度是94.2%,與非洲爪蟾的相似度是92.1%,與人的相似度是94.7%�？梢钥闯鱿嗨贫缺戎刀驾^高,表明在進(jìn)化過(guò)程中紅鯽Gsk3β基因中擁有較高的保守性。(2)結(jié)果表明Dvl2基因全長(zhǎng)為3042bp,編碼754個(gè)氨基酸,預(yù)測(cè)蛋白分子量約為82360.64,等電點(diǎn)為5.89。Dvl2基...

【文章頁(yè)數(shù)】：73 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 前言
    1.Wnt信號(hào)通路轉(zhuǎn)導(dǎo)
        1.1 經(jīng)典Wnt信號(hào)通路
        1.2 Wnt/ PCP(planner cell polarity,PCP)通路
        1.3 Wnt/ Ca2+通路
    2.Wnt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑相關(guān)蛋白
        2.1 Dishevelled(DVL/DSH)蛋白
        2.2 Gsk3?蛋白
        2.3 β-catenin蛋白
        2.4 Axin蛋白
        2.5 APC蛋白
    3.鎘脅迫的應(yīng)激反應(yīng)機(jī)制
        3.1 鎘對(duì)動(dòng)物的毒性機(jī)理
        3.2 本課題研究進(jìn)展
第二章 紅鯽Dishevelled2、Gsk3?基因的cDNA克隆
    1 實(shí)驗(yàn)材料和方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料及試劑
        1.2 實(shí)驗(yàn)方法
    2.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.1 紅鯽Dvl2 基因的cDNA序列及分析
        2.2 紅鯽Dvl2 基因的系統(tǒng)發(fā)育分析
        2.3 紅鯽Gsk3β基因的cDNA序列及分析
        2.4 紅鯽Gsk3β基因的系統(tǒng)發(fā)育分析
    3.實(shí)驗(yàn)討論
第三章 紅鯽Dishevelled2、Gsk3β基因在紅鯽胚胎不同時(shí)期及組織中的m RNA水平表達(dá)
    1 材料與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2 實(shí)驗(yàn)方法
    2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.1 紅鯽八個(gè)組織Dvl2 m RNA水平的表達(dá)
        2.2 紅鯽八個(gè)胚胎發(fā)育時(shí)期Dvl2 m RNA水平的表達(dá)
        2.3 紅鯽八個(gè)組織GSK3βm RNA水平的表達(dá)
        2.4 紅鯽八個(gè)胚胎發(fā)育時(shí)期Gsk3βm RNA水平的表達(dá)
    3 實(shí)驗(yàn)討論
第四章 紅鯽Dishevelled2、Gsk3β基因在紅鯽胚胎不同時(shí)期及組織中的蛋白水平表達(dá)
    1 實(shí)驗(yàn)材料與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料與試劑配制
        1.2 實(shí)驗(yàn)方法
    2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.1 紅鯽不同發(fā)育時(shí)期胚胎中Dvl2、GSK3β基因蛋白水平的表達(dá)
        2.2 Dvl2、GSK3β基因在紅鯽不同組織中蛋白水平的表達(dá)
    3 實(shí)驗(yàn)討論
第五章 不同倍性魚應(yīng)答鎘金屬脅迫的分子檢測(cè)
    1 實(shí)驗(yàn)材料與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料與試劑配制
        1.2 實(shí)驗(yàn)方法
    2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3 實(shí)驗(yàn)討論
參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號(hào)：3934330