Wnt信號轉(zhuǎn)導通路在器官的發(fā)生、癌癥以及多細胞生物體軸分化過程中起著重要作用。本論文主要以紅鯽中的Gsk3β和Dvl2基因為研究對象。先采用RACE(rapid-amplification of c DNA ends)克隆技術(shù)獲得紅鯽Gsk3β和Dvl2基因的c DNA全長,再分別通過半定量RT-PCR技術(shù)和蛋白免疫印記(Western Blot)技術(shù)分析Gsk3β和Dvl2基因在m RNA水平和蛋白水平上的表達差異。最后通過一定濃度的鎘處理,比較分析了Gsk3β與β-catenin的表達情況。結(jié)果顯示:(1)Gsk3β基因全長為2195bp,編碼421個氨基酸,預(yù)測蛋白分子量約為46846.40,等電點為9.05。比較不同物種氨基酸的同源相似性,Gsk3β蛋白序列和斑馬魚的相似度是98.5%,與小鼠的相似度是94.2%,與非洲爪蟾的相似度是92.1%,與人的相似度是94.7%。可以看出相似度比值都較高,表明在進化過程中紅鯽Gsk3β基因中擁有較高的保守性。(2)結(jié)果表明Dvl2基因全長為3042bp,編碼754個氨基酸,預(yù)測蛋白分子量約為82360.64,等電點為5.89。Dvl2基...

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 前言
    1.Wnt信號通路轉(zhuǎn)導
        1.1 經(jīng)典Wnt信號通路
        1.2 Wnt/ PCP(planner cell polarity,PCP)通路
        1.3 Wnt/ Ca2+通路
    2.Wnt信號轉(zhuǎn)導途徑相關(guān)蛋白
        2.1 Dishevelled(DVL/DSH)蛋白
        2.2 Gsk3?蛋白
        2.3 β-catenin蛋白
        2.4 Axin蛋白
        2.5 APC蛋白
    3.鎘脅迫的應(yīng)激反應(yīng)機制
        3.1 鎘對動物的毒性機理
        3.2 本課題研究進展
第二章 紅鯽Dishevelled2、Gsk3?基因的cDNA克隆
    1 實驗材料和方法
        1.1 實驗材料及試劑
        1.2 實驗方法
    2.實驗結(jié)果
        2.1 紅鯽Dvl2 基因的cDNA序列及分析
        2.2 紅鯽Dvl2 基因的系統(tǒng)發(fā)育分析
        2.3 紅鯽Gsk3β基因的cDNA序列及分析
        2.4 紅鯽Gsk3β基因的系統(tǒng)發(fā)育分析
    3.實驗討論
第三章 紅鯽Dishevelled2、Gsk3β基因在紅鯽胚胎不同時期及組織中的m RNA水平表達
    1 材料與方法
        1.1 實驗材料
        1.2 實驗方法
    2 實驗結(jié)果
        2.1 紅鯽八個組織Dvl2 m RNA水平的表達
        2.2 紅鯽八個胚胎發(fā)育時期Dvl2 m RNA水平的表達
        2.3 紅鯽八個組織GSK3βm RNA水平的表達
        2.4 紅鯽八個胚胎發(fā)育時期Gsk3βm RNA水平的表達
    3 實驗討論
第四章 紅鯽Dishevelled2、Gsk3β基因在紅鯽胚胎不同時期及組織中的蛋白水平表達
    1 實驗材料與方法
        1.1 實驗材料與試劑配制
        1.2 實驗方法
    2 實驗結(jié)果
        2.1 紅鯽不同發(fā)育時期胚胎中Dvl2、GSK3β基因蛋白水平的表達
        2.2 Dvl2、GSK3β基因在紅鯽不同組織中蛋白水平的表達
    3 實驗討論
第五章 不同倍性魚應(yīng)答鎘金屬脅迫的分子檢測
    1 實驗材料與方法
        1.1 實驗材料與試劑配制
        1.2 實驗方法
    2 實驗結(jié)果
    3 實驗討論
參考文獻
致謝



本文編號：3934330