洪湖碘泡蟲造成異育銀鯽大規(guī)模病變死亡,帶來巨大經(jīng)濟損失,因此對該寄生蟲病的早期檢測尤為重要,但目前并沒有洪湖碘泡蟲的早期檢測方法。本研究精確鑒定了一例洪湖碘泡蟲,采用化學(xué)方法在不破壞蟲體免疫學(xué)性質(zhì)的前提下進行了純化,并制備了蟲體可溶性成分與不溶性成分,借助免疫學(xué)手段,初步探索洪湖碘泡蟲的免疫原性,根據(jù)相關(guān)抗原特性建立相應(yīng)的ELISA檢測方法。并以此作為基礎(chǔ),對病魚進行了實際檢測。通過對蟲體形態(tài)學(xué)進行觀察加以生物信息學(xué)分析后,鑒定了一例洪湖碘泡蟲。采用極性有機溶劑洗脫離心法,分離純化得到純凈的洪湖碘泡蟲。經(jīng)過液氮與溫浴反復(fù)凍融、超聲波破碎提取蟲體可溶性蛋白與不溶性抗原成分。兩種抗原分別免疫小鼠與豚鼠制備得到多克隆抗體,分別采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)、SDS-PAGE蛋白電泳、間接免疫熒光試驗(IFAT)對多克隆抗體的免疫學(xué)性質(zhì)進行分析。ELISA測定可溶性成分攻毒組小鼠多抗血清與豚鼠多抗血清效價均達到1:20000以上。不溶成分攻毒組小鼠與豚鼠的多抗血清效價均小于1:50。SDS-PAGE蛋白電泳顯示可溶蛋白主要分布于10kDa²00kDa,不溶成分無明顯分布...

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【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1.1洪湖碘泡蟲成熟孢子Fig.1.1MaturesporeofHonghuensissp.n.

見圖1.1。

圖2.1病魚臨床癥狀Fig.2.1Clinicalsymptomsofsickfish

癥狀觀察瘦，體表粗糙，顏色蒼白，黏液分泌較少，眼球外凸鰭條鰓蓋下鰓弓近眼端的咽喉部存在大片乳白色囊腫，囊腫質(zhì)酪樣黏稠包囊液。病魚癥狀詳，見圖2.1。

圖2.2病魚咽腔組織蘇木精-伊紅染色切片（×400）比例尺：50μmFig.2.2DiseasedfishpharyngealcavitytissueHEstainingslice（×400）Scale:50μm

咽腔組織蘇木精-伊紅染色切片（×400）比hpharyngealcavitytissueHEstainingslice（×咽腔組織蘇木精-伊紅染色切片（×800）比hpharyngealcavitytissueHEstainingslice（×可量形狀測定....

圖2.3病魚咽腔組織蘇木精-伊紅染色切片（×800）比例尺：25μmFig.2.3DiseasedfishpharyngealcavitytissueHEstainingslice（×800）Scale:25μm

組織蘇木精-伊紅染色切片（×800）aryngealcavitytissueHEstainingslic量形狀測定觀呈梭形，擁有兩個極囊，大見表2-1，根據(jù)顯微圖繪制的模

本文編號：3930556