作為我國北方地區(qū)主要的人工養(yǎng)殖海水魚類之一，半滑舌鰨以肉質(zhì)鮮美聞名，的產(chǎn)量及市場需求量逐年增加。然而在自然條件下，雄性個(gè)體的發(fā)育遠(yuǎn)滯后于雌性，影響受精卵質(zhì)量和數(shù)量。因而，從基因水平研究半滑舌鰨精子發(fā)生過程，對提高雄魚精子質(zhì)量，大規(guī)模培育優(yōu)質(zhì)、高產(chǎn)苗種，推動半滑舌鰨人工養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展具有重大意義。 根據(jù)全基因組測序獲得的部分序列信息，本研究對半滑舌鰨piwil2基因進(jìn)行了cDNA全長克隆，表達(dá)分析，啟動子甲基化水平檢測及染色體定位。Piwil2基因全長3314bp，包括3’UTR92bp,5’UTR60bp,一個(gè)3162bp的開放閱讀框（ORF），其編碼的PIWIL2蛋白相對分子質(zhì)量為117kDa，理論等電點(diǎn)為8.81，由1053個(gè)氨基酸殘基組成。經(jīng)預(yù)測分析，PIWIL2蛋白含有典型的piwi結(jié)構(gòu)域和PAZ結(jié)構(gòu)域，無信號肽位點(diǎn)，是Argonaute蛋白家族，Piwi亞家族的一員。RT-qPCR結(jié)果顯示，在性成熟雌性、雄性半滑舌鰨的11種組織中，piwil2基因只在其性腺中特異表達(dá)，且精巢中的表達(dá)量明顯高于卵巢。而在半滑舌鰨雌、雄仔魚的性腺中，出膜后20天至80天時(shí)均檢測不到piwil2基因表...

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【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖2-1半滑舌鰨遺傳性別鑒定的電泳結(jié)果

組織塊經(jīng)固定透徹后，轉(zhuǎn)入70%的乙醇中。如組織塊較大長固定時(shí)間。保存于70%乙醇中的半滑舌鰨性腺組織，經(jīng)水乙醇，然后經(jīng)過二甲苯透明、石蠟浸潤、固體石蠟包埋等步驟，置于尼康光學(xué)顯微鏡（Nikoneclipse80i）下觀察以5~6μm為宜，組織切片的具體步驟參照[71]。為模....

圖2-2性成熟半滑舌鰨性腺組織石蠟切片

還能觀察到處于卵巢結(jié)構(gòu)中央的大而明顯的卵巢腔。二倍體生理雄魚有完整的精巢結(jié)構(gòu)精巢內(nèi)有按區(qū)域分布的精小葉結(jié)構(gòu)，精小葉外側(cè)是輸精管和儲精囊。大多數(shù)精小葉內(nèi)充精細(xì)胞，輸精管、儲精囊中也有大量成熟精子存在。一些二倍體雄魚的精小葉中，精細(xì)已完全成熟并被排放到儲精囊內(nèi)，精小葉結(jié)構(gòu)內(nèi)顯示出較多....

圖3-1半滑舌鰨遺傳性別鑒定的電泳結(jié)果

圖3-1半滑舌鰨遺傳性別鑒定的電泳結(jié)果。Fig3-1Electrophoresisofgeneticsexidentification.性別鑒定舌鰨幼魚性腺部位的生理鑒定結(jié)果見圖3-2�；�80天的仔魚中，雌魚、雄魚的原始生殖細(xì)胞經(jīng)過有絲分裂分別分化為原細(xì)胞....

圖3-2半滑舌鰨不同發(fā)育時(shí)期性腺部位的石蠟切片觀察

圖3-2半滑舌鰨不同發(fā)育時(shí)期性腺部位的石蠟切片觀察。a:出膜后80d仔魚的精巢；b:出膜后8仔魚的卵巢；c:出膜后95d仔魚的精巢；d:出膜后95d仔魚的卵巢；e:出膜后120d仔魚的精巢；f:膜后120d仔魚的卵巢；g:出膜后150d....

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