本文利用光鏡及電鏡技術(shù)對(duì)馬氏珠母貝（Pinctada martensii）的血液細(xì)胞和外套膜外液細(xì)胞進(jìn)行分類(lèi)研究，并分別構(gòu)建了這兩種細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄組文庫(kù)，運(yùn)用RNA高通量測(cè)序（RNA-seq）技術(shù)對(duì)構(gòu)建的文庫(kù)開(kāi)展測(cè)序和生物信息學(xué)分析。 根據(jù)細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)特征將馬氏珠母貝的血液細(xì)胞分為四類(lèi)：淋巴樣細(xì)胞、大顆粒細(xì)胞、小顆粒細(xì)胞和透明細(xì)胞。淋巴樣細(xì)胞約占細(xì)胞總數(shù)的24.7%，細(xì)胞平均大小為4.13μm，胞質(zhì)中無(wú)顆粒。大顆粒細(xì)胞約占細(xì)胞總數(shù)的25%，細(xì)胞平均大小為6.40μm，內(nèi)含多個(gè)瑞氏-姬姆薩染色呈藍(lán)紫色的顆粒物質(zhì)。小顆粒細(xì)胞約占細(xì)胞總數(shù)的3.7%，細(xì)胞平均大小為4.35μm，細(xì)胞質(zhì)中充滿顆粒物質(zhì)，瑞氏-姬姆薩染色反應(yīng)為鮮紅色。透明細(xì)胞約占細(xì)胞總數(shù)的46.6%，細(xì)胞核平均大小2.67μm，細(xì)胞中沒(méi)有顆粒物質(zhì)。血液細(xì)胞透射電子顯微鏡觀察顯示：淋巴樣細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)有少量線粒體和小空泡存在，細(xì)胞質(zhì)較均一；大顆粒細(xì)胞線粒體較多，小空泡密集，有電子密度高的顆粒存在，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及核糖體豐富；小顆粒細(xì)胞細(xì)胞內(nèi)有小空泡、中型空泡和高電子密度的小顆粒；透明細(xì)胞小空泡很少，但有大空泡存在，沒(méi)有發(fā)現(xiàn)高電子密度的顆粒。 根據(jù)...

【文章頁(yè)數(shù)】：60 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 前言
    1.1 血細(xì)胞的形態(tài)與分類(lèi)
        1.1.1 國(guó)內(nèi)研究進(jìn)展
        1.1.2 國(guó)外研究進(jìn)展
    1.2 外套膜外液研究進(jìn)展
    1.3 轉(zhuǎn)錄組
        1.3.1 Illumina/Solexa 測(cè)序原理
        1.3.2 轉(zhuǎn)錄組在貝類(lèi)研究中的應(yīng)用
    1.4 本研究的目的和意義
2 馬氏珠母貝血液細(xì)胞的分類(lèi)
    2.1 材料
    2.2 方法
        2.2.1 血細(xì)胞計(jì)數(shù)
        2.2.2 血細(xì)胞微分干涉觀察
        2.2.3 血細(xì)胞爬片觀察
        2.2.4 血細(xì)胞經(jīng)固定后光鏡下觀察
        2.2.5 血細(xì)胞透射電鏡觀察
    2.3 結(jié)果
        2.3.1 細(xì)胞計(jì)數(shù)
        2.3.2 血液細(xì)胞光鏡下分類(lèi)
        2.3.3 血液細(xì)胞電鏡觀察
    2.4 討論
3 馬氏珠母貝外液細(xì)胞的分類(lèi)
    3.1 材料
    3.2 方法
        3.2.1 外液細(xì)胞計(jì)數(shù)
        3.2.2 外液細(xì)胞微分干涉觀察
        3.2.3 外液細(xì)胞爬片觀察
        3.2.4 外液細(xì)胞經(jīng)固定后光鏡下觀察
        3.2.5 外液細(xì)胞透射電鏡觀察
    3.3 結(jié)果
        3.3.1 細(xì)胞計(jì)數(shù)
        3.3.2 外液細(xì)胞光鏡下分類(lèi)
        3.3.3 外液細(xì)胞電鏡觀察
    3.4 討論
4 馬氏珠母貝血液細(xì)胞與外液細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組的比較分析
    4.1 材料
    4.2 方法
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)樣品提取
        4.2.2 總 RNA 的提取
        4.2.3 總 RNA 質(zhì)量檢測(cè)
        4.2.4 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序?qū)嶒?yàn)流程
        4.2.5 轉(zhuǎn)錄組生物信息學(xué)分析流程
    4.3 結(jié)果
        4.3.1 總 RNA 質(zhì)量檢測(cè)
        4.3.2 轉(zhuǎn)錄組生物信息學(xué)分析
        4.3.3 基因差異表達(dá)分析
    4.4 討論
5 總結(jié)
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)介
導(dǎo)師簡(jiǎn)介



本文編號(hào)：3874529