作為最重要的鯉科魚(yú)類，鯉魚(yú)是世界上養(yǎng)殖范圍最廣的淡水魚(yú)類之一。鏡鯉和普通鯉魚(yú)是鯉魚(yú)中常見(jiàn)的兩個(gè)品種。在魚(yú)類的養(yǎng)殖過(guò)程中，鱗被的特征是比較容易發(fā)現(xiàn)的。目前，對(duì)鱗被的研究很少，尤其在鯉魚(yú)方面。長(zhǎng)期的研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，鏡鯉在肉質(zhì)、生長(zhǎng)速度等方面都顯著優(yōu)于建鯉，而二者最明顯的性狀在于皮膚表面覆蓋的鱗被，而且鱗被在魚(yú)類的抗病性研究中具有不可忽視的作用，并且有研究表明魚(yú)類的鱗被與哺乳動(dòng)物皮膚表面附屬物，如毛發(fā)、汗腺甚至牙齒等有共同的進(jìn)化祖先，因此從鯉魚(yú)的鱗被入手。通過(guò)差異篩選出鱗被發(fā)育相關(guān)因子，本研究選取其中兩個(gè)基因，進(jìn)行克隆測(cè)序和功能分析，為應(yīng)用基因工程技術(shù)提高魚(yú)類尤其是哺乳動(dòng)物毛發(fā)、汗腺等的研究，提供了更加豐富的優(yōu)良候選基因。 Ectodysplasin-A（EDA）基因最早是在哺乳動(dòng)物中發(fā)現(xiàn)的，其在皮膚附屬物的發(fā)育中具有重要的生物學(xué)功能。利用Genfishing差異篩選技術(shù)對(duì)普通鯉魚(yú)和德國(guó)鏡鯉的皮膚轉(zhuǎn)錄表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行了篩選，得到EDA基因的部分片段。然后我們利用實(shí)驗(yàn)室的鯉魚(yú)EST數(shù)據(jù)庫(kù)設(shè)計(jì)包含CDS全長(zhǎng)的特異引物。克隆測(cè)序后發(fā)現(xiàn)，鏡鯉EDA基因全長(zhǎng)CDS包含1062個(gè)堿基，編碼一個(gè)含有354個(gè)氨基...

【文章頁(yè)數(shù)】：56 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 引言
    1 .1 魚(yú)類的鱗
        1.1 .1 鱗的分類
        1.1.2 魚(yú)鱗的發(fā)育模式
    1.2 鱗被發(fā)育過(guò)程研究進(jìn)展
        1.2.1 鱗被發(fā)育研究的科學(xué)問(wèn)題
        1.2.2 鱗被發(fā)育的未來(lái)趨勢(shì)
    1.3 鯉魚(yú)天然存在鱗被突變且穩(wěn)定遺傳的種群
        1.3.1 突變體遺傳學(xué)方法解析鱗被發(fā)育過(guò)程
        1.3.2 鯉魚(yú)中的天然突變體-鏡鯉
    1.4 候選基因的研究進(jìn)展
        1.4.1 基因 EDA 的研究進(jìn)展
        1.4.2 基因 EDAR 的研究進(jìn)展
第二章 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)用魚(yú)的獲得及喂養(yǎng)管理
    2.2 主要的儀器設(shè)備和試劑及其試劑盒
        2.2.1 主要的儀器設(shè)備
        2.2.2 主要試劑的配制和試劑盒的訂購(gòu)
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 鏡鯉各組織 RNA 的提取并反轉(zhuǎn)錄
        2.3.2 基因的克隆分析
第三章 ：結(jié)果
    3.1 基因在鏡鯉各個(gè)組織中的表達(dá)
    3.2 基因 5，-UTR 和 3，-UTR 的克隆
        3.2.1 EDA 基因 5，端 UTR 區(qū)的克隆
        3.2.2 EDAR 基因 5，端 UTR 區(qū)的克隆
        3.2.3 EDAR 基因 3，端 UTR 區(qū)的克隆
    3.3 多物種 CDS 序列比對(duì)
        3.3.1 EDA 基因 CDS 的多物種比對(duì)
        3.3.2 EDAR 基因 CDS 的多物種比對(duì)
    3.4 構(gòu)建進(jìn)化樹(shù)
        3.4.1 EDA 基因的氨基酸序列與其他物種構(gòu)建進(jìn)化樹(shù)
        3.4.2 EDAR 基因的氨基酸序列與其他物種構(gòu)建進(jìn)化樹(shù)
    3.5 基因在建鯉和鏡鯉皮膚中的表達(dá)
        3.5.1 EDA 基因在建鯉和鏡鯉皮膚中的表達(dá)
        3.5.2 EDAR 基因在建鯉和鏡鯉皮膚中的表達(dá)
第四章 討論和結(jié)論
    4.1 討論
        4.1.1 EDA 基因的分析
        4.1.2 EDAR 基因的分析
    4.2 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
碩士期間發(fā)表論文
致謝



本文編號(hào)：3855132