肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶I (CPT I)是線(xiàn)粒體脂肪酸β-氧化的一種“限速酶”,它在脊椎動(dòng)物中控制長(zhǎng)鏈脂肪酸的β氧化,在降解脂肪過(guò)程中發(fā)揮著重要作用。近年來(lái),哺乳動(dòng)物中對(duì)于CPT I基因的結(jié)構(gòu)和功能的研究取得了一定程度的進(jìn)展。但是卻很少有對(duì)魚(yú)類(lèi)CPT I基因研究和酶學(xué)性質(zhì)的相關(guān)報(bào)道,也沒(méi)有任何研究涉及外源營(yíng)養(yǎng)素對(duì)魚(yú)類(lèi)CPT I基因表達(dá)和動(dòng)力學(xué)性質(zhì)的影響。鋅是魚(yú)類(lèi)一種必需的微量元素,它的存在維系著魚(yú)類(lèi)生理發(fā)育的不同功能。迄今大量的學(xué)者研究了鋅對(duì)魚(yú)類(lèi)生長(zhǎng)、金屬富集、氧化應(yīng)激和組織病變等方面的影響,但是很少有學(xué)者關(guān)注鋅對(duì)魚(yú)類(lèi)脂代謝的影響。本論文克隆了矛尾復(fù)蝦虎魚(yú)(Javelin goby, Synechogobius hasta)和黃顙魚(yú)(yellow catfish, Pelteobagrus fulvidraco) CPT I的全長(zhǎng)cDNA序列,并對(duì)其結(jié)構(gòu)、進(jìn)化、表達(dá)和動(dòng)力學(xué)性質(zhì)進(jìn)行了研究。同時(shí)從CPT I的基因表達(dá)和動(dòng)力學(xué)的角度探討了水體和飼料鋅水平對(duì)CPT I的影響機(jī)制。 論文的主要研究結(jié)果和結(jié)論如下： 1矛尾復(fù)蝦虎魚(yú)CPT I的克隆與動(dòng)力學(xué)性質(zhì)的研究 在脊椎動(dòng)物中,CPT I的調(diào)節(jié)在控制...

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
目錄
摘要
Abstract
縮略詞表
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1 CPT I的研究進(jìn)展
        1.1 CPT I基因的分子特征
            1.1.1 多重的CPT I構(gòu)型
            1.1.2 多重CPT I構(gòu)型產(chǎn)生的原因
        1.2 CPT I基因的蛋白特征
            1.2.1 CPT I蛋白的膜拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)
            1.2.2 CPT I的功能域和功能氨基酸
        1.3 CPT I的酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)
            1.3.1 動(dòng)力學(xué)參數(shù)的求取
            1.3.2 酶動(dòng)力學(xué)的影響因素
            1.3.3 CPT I的酶動(dòng)力學(xué)性質(zhì)
        1.4 CPT I的調(diào)節(jié)
            1.4.1 依賴(lài)M-CoA的調(diào)節(jié)
            1.4.2 不依賴(lài)M-CoA的調(diào)節(jié)
            1.4.3 脂肪對(duì)CPT I的調(diào)節(jié)
    2 鋅對(duì)脂代謝調(diào)節(jié)的研究進(jìn)展
        2.1 飼料鋅對(duì)脂代謝的調(diào)節(jié)
        2.2 水體鋅暴露對(duì)魚(yú)類(lèi)脂代謝的影響
    3 本研究的目的和意義
第二章 蝦虎魚(yú)CPT I cDNA的分子克隆及動(dòng)力學(xué)性質(zhì)分析
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 實(shí)驗(yàn)材料
            2.1.1 實(shí)驗(yàn)魚(yú)
            2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.2 CPT I全長(zhǎng)cDNA的克隆
            2.2.1 引物設(shè)計(jì)和擴(kuò)增策略
            2.2.2 總RNA的提取、cDNA的合成和PCR
            2.2.3 序列分析
        2.3 CPTI的動(dòng)力學(xué)性質(zhì)
            2.3.1 CoASH的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)
            2.3.2 線(xiàn)粒體的分離及其完整性評(píng)價(jià)
            2.3.3 反應(yīng)條件對(duì)CPTI酶活的影響
            2.3.4 動(dòng)力學(xué)參數(shù)的求取
        2.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
    3 結(jié)果與分析
        3.1 CPTI的序列和結(jié)構(gòu)
        3.2 CPTI的進(jìn)化和一致性分析
        3.3 CPTI的動(dòng)力學(xué)性質(zhì)
    4 討論
第三章 黃顙魚(yú)CPT I cDNA的分子克隆及表達(dá)
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2 CPTI全長(zhǎng)cDNA的克隆
            2.2.1 引物設(shè)計(jì)和擴(kuò)增策略
            2.2.2 總RNA的提取、cDNA的合成和PCR
            2.2.3 全長(zhǎng)cDNA的擴(kuò)增
            2.2.4 序列分析
        2.3 組織和發(fā)育表達(dá)
        2.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
    3 結(jié)果與分析
        3.1 CPTI的序列和結(jié)構(gòu)
        3.2 CPTI的進(jìn)化分析
        3.3 CPTI的組織和發(fā)育表達(dá)
    4 討論
第四章 黃顙魚(yú)CPTI的動(dòng)力學(xué)性質(zhì)研究
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 實(shí)驗(yàn)材料
            2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
            2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑及配制
        2.2 CoASH的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的制作
        2.3 線(xiàn)粒體的分離及其完整性評(píng)價(jià)
        2.4 反應(yīng)條件對(duì)CPTI酶活性的影響
        2.5 動(dòng)力學(xué)參數(shù)的求取
        2.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
    3 結(jié)果與分析
    4 討論
第五章 水體慢性和急性鋅暴露對(duì)黃顙魚(yú)脂肪沉積、肉堿組成、CPT I的表達(dá)及其動(dòng)力學(xué)性質(zhì)的影響
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 慢性鋅暴露
        2.2 急性鋅暴露
        2.3 取樣
        2.4 脂肪和鋅含量的測(cè)定
        2.5 組織肉堿含量的測(cè)定
        2.6 組織CPT I酶活的測(cè)定
        2.7 組織CPT I動(dòng)力學(xué)性質(zhì)的測(cè)定
        2.8 組織CPT I mRNA的表達(dá)水平
        2.9 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
    3 結(jié)果與分析
        3.1 水體鋅暴露對(duì)生長(zhǎng)、脂肪含量和鋅的富集的影響
        3.2 水體鋅暴露對(duì)CPT I動(dòng)力學(xué)性質(zhì)的影響
        3.3 水體鋅暴露對(duì)肉堿組成的影響
        3.4 鋅暴露對(duì)CPT I表達(dá)的影響
        3.5 相關(guān)性分析
    4 討論
第六章 飼料鋅缺乏和過(guò)量對(duì)黃顙魚(yú)脂肪沉積、肉堿組成、CPT I的表達(dá)及其動(dòng)力學(xué)性質(zhì)的影響
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 實(shí)驗(yàn)飼料
        2.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
        2.3 取樣
        2.4 脂肪和鋅含量的測(cè)定
        2.5 組織肉堿含量的測(cè)定
        2.6 組織CPT I的酶活測(cè)定
        2.7 組織CPT I動(dòng)力學(xué)性質(zhì)的測(cè)定
        2.8 組織CPT I mRNA的表達(dá)水平
        2.9 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
    3 結(jié)果與分析
        3.1 飼料鋅對(duì)生長(zhǎng)、脂肪含量和鋅的富集的影響
        3.2 飼料鋅對(duì)CPT I動(dòng)力學(xué)性質(zhì)的影響
        3.3 飼料鋅對(duì)肉堿組成的影響
        3.4 飼料鋅對(duì)CPT I表達(dá)的影響
        3.5 相關(guān)性分析
    4 討論
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝



本文編號(hào)：3854906