石頭魚生活在印度洋和太平洋的熱帶及亞熱帶淺水區(qū)域，是世界上毒性最強的魚。其毒液可以引起一系列中毒癥狀，如劇痛、水腫、肌肉麻痹、低血壓等。目前已在石頭魚粗毒液中分離出毒素neoVTX。中國海域的石頭魚為玫瑰毒鲉,主要分布于南海海域。 目的：獲得南海石頭魚毒素的毒性狀況、組分的蛋白質(zhì)序列及蛋白質(zhì)表達方法，為其抗毒素的制備及石頭魚刺傷的防治奠定基礎(chǔ)。 方法：提取南海石頭魚的粗毒液,利用SDS-PAGE及MS鑒定粗毒液的主要成分，再用GF-HPLC小量分離粗毒液的主要成分，然后用AKTA蛋白質(zhì)分離系統(tǒng)對粗毒液進行大量分離，并測定粗毒液及其分離組分的LD50；分離石頭魚毒囊組織,提取石頭魚毒囊RNA,運用RACE技術(shù),獲得毒素的cDNA全序列，連入pET-22b(+)中，進行原核表達。 結(jié)果： 1.在粗毒液的電泳條帶中，發(fā)現(xiàn)了2個已知蛋白質(zhì)和4個未知蛋白質(zhì)。其中2個已知蛋白質(zhì)被鑒定為已報道的neoVTX α、β亞基；4個未知蛋白質(zhì)中，有 2個蛋白質(zhì)與已報道的neoVTX β條帶有最高匹配度；另有2個分別與β微管蛋白，3-磷酸甘油醛脫氫酶匹配度最高； 2.對粗毒液進行GF-HPLC分離后，發(fā)現(xiàn)了5...

【文章頁數(shù)】：91 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
主要英文縮略詞
1 前言
    1.1 石頭魚簡介
    1.2 石頭魚的生物學(xué)特征
    1.3 石頭魚粗毒液的主要成分
    1.4 石頭魚毒素的生化特征
    1.5 石頭魚毒素的藥理作用
    1.6 石頭魚中毒治療
    1.7 石頭魚毒素的抗體制備
    1.8 石頭魚毒素的表達
    1.9 國內(nèi)的石頭魚研究
    1.10 本課題的研究目的、內(nèi)容和意義
2 石頭魚毒素的分離純化和毒性測定
    2.1 引言
    2.2 實驗材料
    2.3 實驗步驟
    2.4 實驗結(jié)果
    2.5 討論
    2.6 小結(jié)
3 neoVTX 的基因克隆與原核表達
    3.1 引言
    3.2 實驗材料
    3.3 實驗步驟
    3.4 實驗結(jié)果
    3.5 討論
    3.6 小結(jié)
4 結(jié)論
參考文獻
綜述
    參考文獻
附錄
致謝



本文編號：3823927