日本沼蝦表皮幾丁質(zhì)結(jié)合蛋白基因的克隆及分析
發(fā)布時(shí)間:2023-04-09 20:39
甲殼動(dòng)物體表被覆的堅(jiān)硬表皮具有保護(hù)作用的同時(shí)也限制其生長(zhǎng),但可通過(guò)周期性蛻皮克服這一弊端。幾丁質(zhì)結(jié)合蛋白(chitin-binding proteins,CBPs)作為甲殼動(dòng)物表皮的主要成分,與蛻皮過(guò)程中新表皮的形成密切相關(guān),有關(guān)日本沼蝦CBPs(Macrobrachium nipponense chitin-binding proteins,MnCBPs)尚未見(jiàn)報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)室前期研究發(fā)現(xiàn),咪唑類(lèi)物質(zhì)KK-42能明顯縮短日本沼蝦幼蝦蛻皮周期的時(shí)程,顯著增加蛻皮前晚期內(nèi)表皮厚度,提示:MnCBPs的表達(dá)水平及其表達(dá)的時(shí)序性特征可能是影響蛻皮周期時(shí)程的關(guān)鍵因素之一。本文首次從日本沼蝦步足表皮組織內(nèi)克隆出5條MnCBPs基因的部分cDNA片段,并采用Real-time PCR技術(shù)研究了MnCBPs基因的時(shí)空表達(dá)規(guī)律及KK-42處理縮短了蛻皮周期之后MnCBPs基因表達(dá)的變化,據(jù)此確定MnCBPs與蛻皮周期之間可能的聯(lián)系,為闡明KK-42縮短日本沼蝦蛻皮周期的機(jī)制積累資料。選取體長(zhǎng)3.0±0.5 cm的健康日本沼蝦600尾,分為2組:實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組,其中,實(shí)驗(yàn)組用1.95×10-4 mol/L...
【文章頁(yè)數(shù)】:73 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
縮略語(yǔ)表
第一章 前言
1 甲殼動(dòng)物表皮結(jié)構(gòu)和成分在蛻皮周期中的變化
1.1 蛻皮周期及其調(diào)節(jié)
1.2 表皮結(jié)構(gòu)及其在蛻皮周期中的變化
1.3 表皮成分及其在蛻皮周期中的變化
2 甲殼動(dòng)物CBPS的研究進(jìn)展
2.1 節(jié)肢動(dòng)物CPs的種類(lèi)及其命名
2.2 CBPs的種類(lèi)及結(jié)構(gòu)
2.3 CBPs的功能
2.4 蛻皮激素對(duì)CBPs表達(dá)的調(diào)節(jié)作用
3 CBPS的研究展望
4 研究目的與意義
第二章 材料和方法
1 實(shí)驗(yàn)材料
1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
1.2 主要試劑
1.3 試劑配置
1.4 實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備
2 實(shí)驗(yàn)方法
2.1 總RNA的提取
2.2 RNA檢測(cè)
2.3 cDNA第一鏈的合成
2.4 日本沼蝦幾丁質(zhì)結(jié)合蛋白基因的克隆及表達(dá)
第三章 結(jié)果
1 日本沼蝦總RNA的提取
2 日本沼蝦CBPS基因的克隆及序列分析
3 MnCBPS基因的時(shí)空表達(dá)分析
3.1 MnCBPS基因的組織表達(dá)
3.2 MnCBPS基因的蛻皮周期表達(dá)
4 KK-42 對(duì)MnCBPS基因表達(dá)的影響
4.1 KK-42 對(duì)MnCBP-1 基因表達(dá)的影響
4.2 KK-42 對(duì)MnCBP-2 基因表達(dá)的影響
4.3 KK-42 對(duì)MnCBP-3 基因表達(dá)的影響
4.4 KK-42 對(duì)MnCBP-4 基因表達(dá)的影響
4.5 KK-42 對(duì)MnCBP-5 基因表達(dá)的影響
第四章 討論
第五章 結(jié)論
第六章 創(chuàng)新性
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間參加的科研項(xiàng)目和發(fā)表的論文
本文編號(hào):3787698
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ABSTRACT
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第一章 前言
1 甲殼動(dòng)物表皮結(jié)構(gòu)和成分在蛻皮周期中的變化
1.1 蛻皮周期及其調(diào)節(jié)
1.2 表皮結(jié)構(gòu)及其在蛻皮周期中的變化
1.3 表皮成分及其在蛻皮周期中的變化
2 甲殼動(dòng)物CBPS的研究進(jìn)展
2.1 節(jié)肢動(dòng)物CPs的種類(lèi)及其命名
2.2 CBPs的種類(lèi)及結(jié)構(gòu)
2.3 CBPs的功能
2.4 蛻皮激素對(duì)CBPs表達(dá)的調(diào)節(jié)作用
3 CBPS的研究展望
4 研究目的與意義
第二章 材料和方法
1 實(shí)驗(yàn)材料
1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
1.2 主要試劑
1.3 試劑配置
1.4 實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備
2 實(shí)驗(yàn)方法
2.1 總RNA的提取
2.2 RNA檢測(cè)
2.3 cDNA第一鏈的合成
2.4 日本沼蝦幾丁質(zhì)結(jié)合蛋白基因的克隆及表達(dá)
第三章 結(jié)果
1 日本沼蝦總RNA的提取
2 日本沼蝦CBPS基因的克隆及序列分析
3 MnCBPS基因的時(shí)空表達(dá)分析
3.1 MnCBPS基因的組織表達(dá)
3.2 MnCBPS基因的蛻皮周期表達(dá)
4 KK-42 對(duì)MnCBPS基因表達(dá)的影響
4.1 KK-42 對(duì)MnCBP-1 基因表達(dá)的影響
4.2 KK-42 對(duì)MnCBP-2 基因表達(dá)的影響
4.3 KK-42 對(duì)MnCBP-3 基因表達(dá)的影響
4.4 KK-42 對(duì)MnCBP-4 基因表達(dá)的影響
4.5 KK-42 對(duì)MnCBP-5 基因表達(dá)的影響
第四章 討論
第五章 結(jié)論
第六章 創(chuàng)新性
參考文獻(xiàn)
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本文編號(hào):3787698
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