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日本沼蝦表皮幾丁質(zhì)結(jié)合蛋白基因的克隆及分析

發(fā)布時間:2023-04-09 20:39
  甲殼動物體表被覆的堅硬表皮具有保護作用的同時也限制其生長,但可通過周期性蛻皮克服這一弊端。幾丁質(zhì)結(jié)合蛋白(chitin-binding proteins,CBPs)作為甲殼動物表皮的主要成分,與蛻皮過程中新表皮的形成密切相關(guān),有關(guān)日本沼蝦CBPs(Macrobrachium nipponense chitin-binding proteins,MnCBPs)尚未見報道。本實驗室前期研究發(fā)現(xiàn),咪唑類物質(zhì)KK-42能明顯縮短日本沼蝦幼蝦蛻皮周期的時程,顯著增加蛻皮前晚期內(nèi)表皮厚度,提示:MnCBPs的表達水平及其表達的時序性特征可能是影響蛻皮周期時程的關(guān)鍵因素之一。本文首次從日本沼蝦步足表皮組織內(nèi)克隆出5條MnCBPs基因的部分cDNA片段,并采用Real-time PCR技術(shù)研究了MnCBPs基因的時空表達規(guī)律及KK-42處理縮短了蛻皮周期之后MnCBPs基因表達的變化,據(jù)此確定MnCBPs與蛻皮周期之間可能的聯(lián)系,為闡明KK-42縮短日本沼蝦蛻皮周期的機制積累資料。選取體長3.0±0.5 cm的健康日本沼蝦600尾,分為2組:實驗組和對照組,其中,實驗組用1.95×10-4 mol/L...

【文章頁數(shù)】:73 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
縮略語表
第一章 前言
    1 甲殼動物表皮結(jié)構(gòu)和成分在蛻皮周期中的變化
        1.1 蛻皮周期及其調(diào)節(jié)
        1.2 表皮結(jié)構(gòu)及其在蛻皮周期中的變化
        1.3 表皮成分及其在蛻皮周期中的變化
    2 甲殼動物CBPS的研究進展
        2.1 節(jié)肢動物CPs的種類及其命名
        2.2 CBPs的種類及結(jié)構(gòu)
        2.3 CBPs的功能
        2.4 蛻皮激素對CBPs表達的調(diào)節(jié)作用
    3 CBPS的研究展望
    4 研究目的與意義
第二章 材料和方法
    1 實驗材料
        1.1 實驗動物
        1.2 主要試劑
        1.3 試劑配置
        1.4 實驗儀器設(shè)備
    2 實驗方法
        2.1 總RNA的提取
        2.2 RNA檢測
        2.3 cDNA第一鏈的合成
        2.4 日本沼蝦幾丁質(zhì)結(jié)合蛋白基因的克隆及表達
第三章 結(jié)果
    1 日本沼蝦總RNA的提取
    2 日本沼蝦CBPS基因的克隆及序列分析
    3 MnCBPS基因的時空表達分析
        3.1 MnCBPS基因的組織表達
        3.2 MnCBPS基因的蛻皮周期表達
    4 KK-42 對MnCBPS基因表達的影響
        4.1 KK-42 對MnCBP-1 基因表達的影響
        4.2 KK-42 對MnCBP-2 基因表達的影響
        4.3 KK-42 對MnCBP-3 基因表達的影響
        4.4 KK-42 對MnCBP-4 基因表達的影響
        4.5 KK-42 對MnCBP-5 基因表達的影響
第四章 討論
第五章 結(jié)論
第六章 創(chuàng)新性
參考文獻
致謝
攻讀碩士學位期間參加的科研項目和發(fā)表的論文



本文編號:3787698

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