南方鲇(Silurus meridionalis Chen)性腺體細(xì)胞系的建立、鑒定及應(yīng)用
發(fā)布時(shí)間:2023-03-25 03:30
魚類細(xì)胞系的建立對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物病毒學(xué)、環(huán)境毒理學(xué)、魚類資源保護(hù)與遺傳育種、魚類內(nèi)分泌學(xué)等方面研究具有重要地位與作用。自世界上首株魚類細(xì)胞系即虹鱒(Oncorhynchus mykiss)性腺細(xì)胞系RTG-2建立以來,迄今已建立了包括淡水魚、海水魚在內(nèi)的不同組織來源的280余株細(xì)胞系,但性腺來源的體細(xì)胞系相對(duì)稀少。魚類性腺體細(xì)胞包括卵巢的顆粒細(xì)胞、鞘膜細(xì)胞、間質(zhì)細(xì)胞,及精巢的Sertoli細(xì)胞、Leydig細(xì)胞等,在生殖細(xì)胞的增殖、分化發(fā)育方面具有決定性的作用,特別是近年來對(duì)生殖干細(xì)胞研究的關(guān)注,使得性腺體細(xì)胞的培養(yǎng)及細(xì)胞系的建立尤為必要。研究顯示,用斑馬魚(Danio rerio)性腺體細(xì)胞作為飼養(yǎng)層,可在體外培養(yǎng)其生殖干細(xì)胞達(dá)數(shù)月之久。南方鲇(Silurus meridionalis Chen)屬于鲇形目,鲇科,是主要分布于我國長(zhǎng)江中上游的名貴經(jīng)濟(jì)魚類,具有生長(zhǎng)速度快、肉質(zhì)細(xì)嫩、適溫范圍廣、抗病性強(qiáng)等優(yōu)良性狀,目前已成為我國重要的養(yǎng)殖魚類之一。在自然條件下,南方鲇性比約為1:1,有趣的是,在人工繁殖條件下南方鲇后代幾乎全為雌性。盡管目前已對(duì)此進(jìn)行了多年的探索,但其具體機(jī)制仍有待進(jìn)一步研究...
【文章頁數(shù)】:75 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
目錄
摘要
ABSTRACT
縮略詞表
第一章 文獻(xiàn)綜述
1. 魚類細(xì)胞培養(yǎng)研究進(jìn)展及應(yīng)用
1.1. 魚類細(xì)胞培養(yǎng)研究進(jìn)展
1.2. 魚類細(xì)胞系的應(yīng)用
2. 環(huán)境雌激素檢測(cè)
2.1. 環(huán)境雌激素
2.2. 環(huán)境雌激素的危害
2.3. 環(huán)境雌激素檢測(cè)方法
3. 本論文研究的目的和意義
第二章 南方鲇卵巢細(xì)胞系的建立及生物學(xué)特征
1. 材料與方法
1.1. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
1.2. 實(shí)驗(yàn)試劑
1.3. 實(shí)驗(yàn)溶液配置方法
1.4. 實(shí)驗(yàn)儀器
1.5. 原代培養(yǎng)
1.6. 最適生長(zhǎng)條件的確定
1.7. 傳代培養(yǎng)
1.8. 細(xì)胞系的凍存和復(fù)蘇
1.9. 分子表達(dá)
1.10. 核型分析
1.11. 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
2. 結(jié)果
2.1. 原代培養(yǎng)和繼代培養(yǎng)
2.2. 最適培養(yǎng)基
2.3. 最適培養(yǎng)溫度
2.4. 最適血清濃度
2.5. 細(xì)胞系的凍存和復(fù)蘇
2.6. 分子表達(dá)
2.7. 核型分析
2.8. 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
3. 討論
第三章 南方鲇精巢細(xì)胞系的建立及生物學(xué)特征
1. 材料與方法
1.1. 實(shí)驗(yàn)材料
1.2. 實(shí)驗(yàn)試劑
1.3. 實(shí)驗(yàn)溶液配制方法
1.4. 實(shí)驗(yàn)儀器
1.5. 原代培養(yǎng)
1.6. 最適生長(zhǎng)條件的確定
1.7. 傳代培養(yǎng)
1.8. 細(xì)胞系的凍存和復(fù)蘇
1.9. 分子表達(dá)
1.10. 核型分析
1.11. 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
2. 結(jié)果
2.1. 原代培養(yǎng)和繼代培養(yǎng)
2.2. 細(xì)胞系的凍存和復(fù)蘇
2.3. 分子表達(dá)
2.4. 核型分析
2.5. 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
3. 討論
第四章 環(huán)境雌激素檢測(cè)體系的建立
1. 引言
2. 材料與方法
2.1. 實(shí)驗(yàn)試劑
2.2. 實(shí)驗(yàn)溶液配置方法
2.3. 實(shí)驗(yàn)儀器
2.4. ERα基因克隆及重組質(zhì)粒構(gòu)建
2.5. ERE4基因克隆及重組質(zhì)粒構(gòu)建
2.6. 環(huán)境雌激素?zé)晒馑孛富钚詸z測(cè)
3. 結(jié)果
3.1. 重組質(zhì)粒的構(gòu)建
3.2. 環(huán)境雌激素?zé)晒馑孛富钚詸z測(cè)
4. 討論
全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
在讀期間所發(fā)表的文章
在讀期間參加科研情況
本文編號(hào):3770442
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ABSTRACT
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第一章 文獻(xiàn)綜述
1. 魚類細(xì)胞培養(yǎng)研究進(jìn)展及應(yīng)用
1.1. 魚類細(xì)胞培養(yǎng)研究進(jìn)展
1.2. 魚類細(xì)胞系的應(yīng)用
2. 環(huán)境雌激素檢測(cè)
2.1. 環(huán)境雌激素
2.2. 環(huán)境雌激素的危害
2.3. 環(huán)境雌激素檢測(cè)方法
3. 本論文研究的目的和意義
第二章 南方鲇卵巢細(xì)胞系的建立及生物學(xué)特征
1. 材料與方法
1.1. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
1.2. 實(shí)驗(yàn)試劑
1.3. 實(shí)驗(yàn)溶液配置方法
1.4. 實(shí)驗(yàn)儀器
1.5. 原代培養(yǎng)
1.6. 最適生長(zhǎng)條件的確定
1.7. 傳代培養(yǎng)
1.8. 細(xì)胞系的凍存和復(fù)蘇
1.9. 分子表達(dá)
1.10. 核型分析
1.11. 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
2. 結(jié)果
2.1. 原代培養(yǎng)和繼代培養(yǎng)
2.2. 最適培養(yǎng)基
2.3. 最適培養(yǎng)溫度
2.4. 最適血清濃度
2.5. 細(xì)胞系的凍存和復(fù)蘇
2.6. 分子表達(dá)
2.7. 核型分析
2.8. 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
3. 討論
第三章 南方鲇精巢細(xì)胞系的建立及生物學(xué)特征
1. 材料與方法
1.1. 實(shí)驗(yàn)材料
1.2. 實(shí)驗(yàn)試劑
1.3. 實(shí)驗(yàn)溶液配制方法
1.4. 實(shí)驗(yàn)儀器
1.5. 原代培養(yǎng)
1.6. 最適生長(zhǎng)條件的確定
1.7. 傳代培養(yǎng)
1.8. 細(xì)胞系的凍存和復(fù)蘇
1.9. 分子表達(dá)
1.10. 核型分析
1.11. 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
2. 結(jié)果
2.1. 原代培養(yǎng)和繼代培養(yǎng)
2.2. 細(xì)胞系的凍存和復(fù)蘇
2.3. 分子表達(dá)
2.4. 核型分析
2.5. 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
3. 討論
第四章 環(huán)境雌激素檢測(cè)體系的建立
1. 引言
2. 材料與方法
2.1. 實(shí)驗(yàn)試劑
2.2. 實(shí)驗(yàn)溶液配置方法
2.3. 實(shí)驗(yàn)儀器
2.4. ERα基因克隆及重組質(zhì)粒構(gòu)建
2.5. ERE4基因克隆及重組質(zhì)粒構(gòu)建
2.6. 環(huán)境雌激素?zé)晒馑孛富钚詸z測(cè)
3. 結(jié)果
3.1. 重組質(zhì)粒的構(gòu)建
3.2. 環(huán)境雌激素?zé)晒馑孛富钚詸z測(cè)
4. 討論
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