三疣梭子蟹（Portunus trituberculatus）是我國沿海地區(qū)重要的海水養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)蟹類之一,在我國海洋捕撈對(duì)象中占據(jù)重要的地位。當(dāng)前,三疣梭子蟹人工養(yǎng)殖規(guī)模在逐漸擴(kuò)大,但在規(guī)�；B(yǎng)殖過程中出現(xiàn)了三疣梭子蟹性腺發(fā)育不良、個(gè)體偏小等問題,優(yōu)質(zhì)的三疣梭子蟹產(chǎn)量不能滿足人們的需求。近年來,人們?cè)絹碓街匾暼嗨笞有贩敝嘲l(fā)育調(diào)控機(jī)制的相關(guān)研究,而性腺是繁殖發(fā)育的重要器官,承擔(dān)著繁殖后代的重任,有眾多調(diào)節(jié)因子參與了配子發(fā)生過程的調(diào)控。DNA甲基化修飾作為表觀遺傳重要組成部分之一,在真核生物生長發(fā)育中有重要的功能。本實(shí)驗(yàn)將從DNA甲基化角度初步研究DNA甲基化對(duì)三疣梭子蟹性腺、胚胎和幼體發(fā)育的調(diào)控機(jī)制,為深入研究三疣梭子蟹繁殖發(fā)育提供參考。主要研究結(jié)果如下:1.三疣梭子蟹性腺、胚胎和幼體DNA甲基化水平分析為了更直觀的了解DNA甲基化在三疣梭子蟹發(fā)育中的作用,我們采用Methylflash方法分析了三疣梭子蟹性腺、胚胎和幼體發(fā)育不同時(shí)期的DNA甲基化水平。結(jié)果顯示,卵巢發(fā)育不同時(shí)期DNA甲基化的水平大約0.005%-0.07%,DNA甲基化在卵巢發(fā)育不同時(shí)期都存在。其中,VI期卵巢的DNA... 

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 引言
    1 三疣梭子蟹概述
        1.1 三疣梭子蟹分類和分布
        1.2 形態(tài)結(jié)構(gòu)
        1.3 生活習(xí)性和性腺分期
    2 甲基化研究概述
        2.1 DNA甲基化作用機(jī)制
        2.2 DNA甲基轉(zhuǎn)移酶(Dnmts)
        2.3 UHRF1基因
        2.4 甲基轉(zhuǎn)移酶連接蛋白(MBD)
        2.5 DNA去甲基化
    3 DNA甲基化在性腺發(fā)育中的作用
        3.1 DNA甲基化在卵巢發(fā)育中的研究
        3.2 DNA甲基化在精巢發(fā)育中的研究
    4 本研究的目的與意義
第二章 三疣梭子蟹在性腺、胚胎和幼體發(fā)育過程中DNA甲基化水平分析
    1 材料與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        1.3 實(shí)驗(yàn)方法
    2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作
        2.2 三疣梭子蟹卵巢發(fā)育不同時(shí)期DNA甲基化水平分析
        2.3 三疣梭子蟹胚胎、幼體發(fā)育不同時(shí)期DNA甲基化水平分析
    3 討論
第三章 三疣梭子蟹甲基化相關(guān)基因在性腺、胚胎和幼體發(fā)育過程中的表達(dá)分析
    1 材料與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2 實(shí)驗(yàn)方法
    2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.1 三疣梭子蟹甲基化基因Dnmt2、Dnmt3b、UHRF1、MBD2、MBD4基因cDNA全長的獲得和序列分析
        2.2 三疣梭子蟹Dnmt2、Dnmt3b、UHRF1、MBD2、MBD4基因序列同源性分析
        2.3 Dnmt2、Dnmt3b、UHRF1、MBD2、MBD4基因在三疣梭子蟹中組織差異性表達(dá)分析
        2.4 三疣梭子蟹甲基化相關(guān)基因Dnmt2,Dnmt3b,UHRF1,MBD2,MBD4在卵巢發(fā)育中的表達(dá)分析
        2.5 DNA甲基化相關(guān)基因Dnmt2,Dnmt3b,UHRF1,MBD2和MBD4在三疣梭子蟹精巢發(fā)育不同時(shí)期的差異表達(dá)分析
        2.6 Dnmt2,Dnmt3b、UHRF1等5個(gè)基因在三疣梭子胚胎和幼體發(fā)育不同時(shí)期的差異表達(dá)分析
    3 討論
        3.1 本實(shí)驗(yàn)克隆了三疣梭子蟹甲基化相關(guān)基因Dnmt2,Dnmt3b,UHRF1,MBD2,MBD4cDNA序列全長
        3.2 甲基化相關(guān)基因在組織分布以及在性腺、胚胎和幼體中表達(dá)分析
小結(jié)
參考文獻(xiàn)
致謝
碩士期間論文發(fā)表情況


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]三疣梭子蟹細(xì)胞周期蛋白H基因克隆及其在卵巢發(fā)育中的表達(dá)分析[J]. 賈復(fù)龍,孟憲亮,劉萍,李健,高保全,高天翔,宋娜.  中國海洋大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2016(07)
[2]無脊椎動(dòng)物DNA甲基化研究進(jìn)展[J]. 柳瑩,唐永政,高麗.  生物技術(shù)通報(bào). 2015(08)
[3]表觀遺傳學(xué)研究進(jìn)展[J]. 康靜婷,梁前進(jìn),梁辰,王鵬程.  科技導(dǎo)報(bào). 2013(19)
[4]三疣梭子蟹“黃選1號(hào)”鹽度耐受性及適宜生長鹽度分析[J]. 隋延鳴,高保全,劉萍,任憲云,李洋,丁金強(qiáng),段亞飛.  大連海洋大學(xué)學(xué)報(bào). 2012(05)
[5]三疣梭子蟹生物學(xué)特性及繁養(yǎng)殖現(xiàn)狀[J]. 程國寶,史會(huì)來,樓寶,毛國民,詹煒,徐冬冬,薛寶貴.  河北漁業(yè). 2012(04)
[6]哺乳動(dòng)物中的DNA主動(dòng)去甲基化[J]. 肖遙,張華林,白莉雅,王曉民,李文功,楊利國.  遺傳. 2011(04)
[7]三疣梭子蟹4個(gè)野生群體線粒體16S rRNA和COⅠ基因片段的比較分析[J]. 戴艷菊,劉萍,高保全,李健,王清印.  中國海洋大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2010(03)
[8]DNA甲基轉(zhuǎn)移酶分類、功能及其研究進(jìn)展[J]. 王志剛,吳建新.  遺傳. 2009(09)
[9]東海三疣梭子蟹成熟群體生殖特征和條件狀況[J]. 管衛(wèi)兵,宣富君,陳輝輝,戴小杰,朱江峰.  海洋漁業(yè). 2009(02)
[10]東海三疣梭子蟹精子發(fā)生及精莢形成[J]. 管衛(wèi)兵,宣富君,戴小杰,朱江峰.  中國水產(chǎn)科學(xué). 2009(02)

博士論文
[1]甲殼動(dòng)物DNA甲基轉(zhuǎn)移酶2（Dnmt2）基因的分子特征、表達(dá)分析及DNA甲基化水平檢測(cè)[D]. 馮琛卓.浙江大學(xué) 2007

碩士論文
[1]小鼠成熟精子中tRNA裂解與DNMT2的關(guān)系[D]. 徐丹丹.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016



本文編號(hào)：3686400