為了研究蛻皮激素受體（EcR）在甲殼動物生長和生殖過程中的作用，采用反轉(zhuǎn)錄PCR（RT-PCR）和cDNA末端快速擴增（RACE）技術(shù)，克隆得到了三疣梭子蟹Portunus trituberculatus蛻皮激素受體（PtEcR）的全長cDNA序列（GenBank登錄號：KC354381），運用實時熒光定量PCR（qRT-PCR）方法，分析該基因在不同組織、蛻皮時期和卵巢發(fā)育階段的表達特征。結(jié)果表明，PtEcR cDNA全長2231bp，包含一個206bp的5’非編碼區(qū)、一個756bp的3’非編碼區(qū)，和一個1269bp的開放閱讀框（ORF），共編碼422個氨基酸。推導(dǎo)的PtEcR氨基酸序列與已公布的其他甲殼動物EcR進行比對，發(fā)現(xiàn)一致性為67%-97%，其與凡納濱對蝦（Litopenaeus vannamei）一致性最低，為67%；與擬穴青蟹（Scylla paramamosain）EcR氨基酸序列一致性最高，與其三種亞型的一致性分別為95%、95%和97%。系統(tǒng)進化樹分析PtEcR與其它甲殼動物EcR聚為一支，而昆蟲EcR聚為另一支。PtEcR在檢測的10個三疣梭子蟹組織（表皮，性腺... 

【文章來源】：寧波大學(xué)浙江省

【文章頁數(shù)】：47 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

昆蟲蛻皮激素與EcR-USP的轉(zhuǎn)錄調(diào)控機制模型（李康等，2011）

可與輔激活因子（coactivators）的相互作用，促進目的基因的轉(zhuǎn)錄（Nakagawa et al, 2009）。圖1.2 核受體的結(jié)構(gòu)特征(Verhaegen et al, 2011)虛線：A/B域和D域；圓柱和箭頭：α螺旋和β折疊Fig.1.2 Simplified protein structure of a theoretical nuclear hormone receptor.The variant A/B- and D-domain are represented by dotted lines; α-helices and β-sheets by cylinders andarrows, respectively.

3.1 PCR 引物序列. 3.1 Nucleotide sequences of primers used for PCR物 Primer 序列 Sequence (5′→3′) 用途 pEcR-FEcR-Ractin-Factin-RTAAGTGATGACGACTCGGATGCACGAGCAAGCCTTTAGCAGTGCGAAACCTTCAACACTCCCGGATAGCGTGAGGAAGGGCATAqRqRqRqREcR 在不同組織中的表達差異定量 PCR 分析表明，PtEcR 在 10 個組織中均有表達（圖 3.1）。無達量均最高。雌蟹中，Ov 和 Ms 表達量較高；雄蟹中，ES、MO 和

【參考文獻】：
期刊論文
[1]蝦蟹類卵巢發(fā)育調(diào)節(jié)機制研究進展[J]. 王曉偉,張子平,王藝?yán)?賈錫偉,林鵬.  生物技術(shù)通報. 2013(07)
[2]三疣梭子蟹蛻皮周期中MIH基因mRNA水平與蛻皮激素濃度變化[J]. 汪春建,朱冬發(fā),亓一舟,胡則輝,謝熙,沈潔.  水生生物學(xué)報. 2013(01)
[3]昆蟲蛻皮激素生物合成及其神經(jīng)肽調(diào)控[J]. 王升,李勝.  應(yīng)用昆蟲學(xué)報. 2012(03)
[4]三疣梭子蟹蛻皮周期的分期[J]. 沈潔,朱冬發(fā),胡則輝,亓一舟,汪春建.  水產(chǎn)學(xué)報. 2011(10)
[5]蛻皮激素與其受體EcR-USP的轉(zhuǎn)錄調(diào)控機制[J]. 李康,李勝,曹陽.  昆蟲學(xué)報. 2011(08)
[6]三化螟蛻皮激素受體和超氣門蛋白基因的克隆和序列分析[J]. 謝子正,韓召軍.  南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2010(05)
[7]日本沼蝦不同亞型維甲酸類X受體（RXR）cDNA克隆及序列分析[J]. 王文青,朱小玲.  淡水漁業(yè). 2010(01)
[8]三疣梭子蟹的第二次卵巢發(fā)育規(guī)律[J]. 姚桂桂,吳旭干,楊筱珍,成永旭,王春琳.  動物學(xué)研究. 2007(04)
[9]東海三疣梭子蟹第一次卵巢發(fā)育規(guī)律的研究[J]. 吳旭干,姚桂桂,楊筱珍,成永旭,王春琳.  海洋學(xué)報(中文版). 2007(04)
[10]蟹類繁殖力和卵巢發(fā)育研究進展[J]. 江新琴,俞存根,陳全振.  上海水產(chǎn)大學(xué)學(xué)報. 2007(03)

碩士論文
[1]三疣梭子蟹卵黃蛋白原的基因克隆及分子特征分析[D]. 楊帆.浙江大學(xué) 2005



本文編號：3087973