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中華鱉il6的cDNA克隆及其在急性低溫脅迫和細(xì)菌免疫應(yīng)答中的表達(dá)變化情況

發(fā)布時(shí)間:2021-03-02 15:47
  為了研究低溫脅迫對(duì)中華鱉(Pelodiscus sinensis)早期炎性因子IL6腸道表達(dá)的影響,本論文首先細(xì)致劃分了中華鱉的腸道。采用形態(tài)學(xué)觀察、組織切片的方式研究了中華鱉的九段腸道。使用已經(jīng)在哺乳動(dòng)物和魚類的腸道中報(bào)道的9個(gè)基因,從功能上區(qū)分中華鱉腸道各區(qū)段。其次,為研究腸道部分的免疫功能,聚焦于免疫因子il6,在克隆了中華鱉il6的cDNA全長(zhǎng)后,從啟動(dòng)子、基因結(jié)構(gòu)、共線性關(guān)系、相似性分析、系統(tǒng)發(fā)育和蛋白結(jié)構(gòu)等方面對(duì)其進(jìn)行生物信息學(xué)分析;采用qPCR手段進(jìn)行了組織表達(dá)模式分析。最后,為了探究il6免疫功能,利用免疫刺激劑(LPS、Con A和PolyI:C)在體外刺激脾臟原代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn);為了探究低溫脅迫對(duì)il6的影響,我們采用兩個(gè)溫度(25°C,15°C)、兩種細(xì)菌(革蘭氏陰性與陽性菌)體內(nèi)攻毒的方式從5個(gè)時(shí)間點(diǎn)(6h,12h,24h,72h和7d)來檢測(cè)il6在腸道以及脾臟中的表達(dá)變化情況。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:1.傳統(tǒng)手段與分子生物學(xué)方法相結(jié)合對(duì)中華鱉腸道的劃分根據(jù)標(biāo)記分子在各區(qū)段的表達(dá)情況,對(duì)比形態(tài)學(xué)、組織學(xué)觀察分析得到,從S1到S3(從腸道起始占總長(zhǎng)度的29.9%的位置,29.... 

【文章來源】:山西大學(xué)山西省

【文章頁(yè)數(shù)】:91 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

中華鱉il6的cDNA克隆及其在急性低溫脅迫和細(xì)菌免疫應(yīng)答中的表達(dá)變化情況


每部分分別標(biāo)1:腸道區(qū)段標(biāo)記為S1,S2段劃分2,S3,S4,S5,,S6,S7,S8和S9;黑點(diǎn)表示取

中華鱉il6的cDNA克隆及其在急性低溫脅迫和細(xì)菌免疫應(yīng)答中的表達(dá)變化情況


均采用HE染m

中華鱉,腸道,腸絨毛,絨毛


A:腸絨毛高度 B:腸壁厚度 圖中有相同字母表示組間無顯著性差異(P>0.05)Fig 2.4 Soft-shelled turtle intestinal villi height and wall thicknessA: The height of the intestinal villi. B: Intestine wall thickness. Where there is a same letter ifigures means no significant difference between group表 2.3:中華鱉腸道各區(qū)段腸絨毛及腸壁厚度統(tǒng)計(jì)(平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差,n=3)Table 2.3 Chinese soft-shelled turtle intestinal villus height in each section and wall thickness (standard deviation, n=3)腸區(qū)段編號(hào) 腸絨毛高度(μm) 腸壁厚度(μm)S1 190.48 ±27.07 636.47 ±29.94S2 197.29 ±29.18 584.02 ±7.95S3 168.79 ±38.64 626.20 ±27.45S4 156.41 ±25.80 534.84 ±33.25S5 129.41 ±15.36 508.46 ±36.20S6 —— 539.63 ±130.15S7 —— 557.26 ±91.93S8 —— 435.69 ±88.44

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]腸道黏膜免疫耐受機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 左增妍,張彩.  現(xiàn)代免疫學(xué). 2015(01)
[2]轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1和白介素-6對(duì)CD4+CD25-T細(xì)胞表型、細(xì)胞因子分泌及功能的影響[J]. 于艷輝,李鵬飛,盧思廣.  臨床兒科雜志. 2013(03)
[3]為什么近年有些教材將鳥類歸入“爬行綱”[J]. 鄭光美.  生物學(xué)通報(bào). 2010(11)
[4]CD4+T細(xì)胞與炎癥性腸病[J]. 晁康,張盛洪,陳旻湖,鐘碧慧.  胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志. 2010(11)
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[7]IL-6及其受體與炎癥性疾病關(guān)系的新進(jìn)展[J]. 林麗艷,張慧云,何韶衡.  中國(guó)熱帶醫(yī)學(xué). 2008(04)
[8]Th17細(xì)胞分化、調(diào)節(jié)及效應(yīng)研究進(jìn)展[J]. 韓根成,沈倍奮.  生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 2008(02)
[9]細(xì)胞凋亡研究進(jìn)展[J]. 李超,伏圣博,劉華玲,馬欣榮.  世界科技研究與發(fā)展. 2007(03)
[10]增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)的分子結(jié)構(gòu)及其生物學(xué)功能研究進(jìn)展[J]. 宋楠萌,桑建利,徐恒.  自然科學(xué)進(jìn)展. 2006(10)

博士論文
[1]中華鱉腸道、脾臟和腦垂體的主要功能細(xì)胞學(xué)研究[D]. 包慧君.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010

碩士論文
[1]團(tuán)頭魴白細(xì)胞介素6的表達(dá)分析及啟動(dòng)子活性的研究[D]. 扶曉琴.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[2]急性低溫脅迫及恢復(fù)對(duì)吉富羅非魚血清生化、免疫以及應(yīng)激蛋白HSP70基因表達(dá)的影響[D]. 王美垚.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009



本文編號(hào):3059525

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