玻璃扯旗魚性腺發(fā)育及其相關(guān)基因Vasa的克隆與表達(dá)研究
發(fā)布時(shí)間:2021-02-08 14:50
玻璃扯旗魚成體通體透明,可清晰地看到骨骼、肌肉以及性腺等內(nèi)臟組織,因此可以作為研究魚類性腺發(fā)育極為理想的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。本研究綜合形態(tài)學(xué)、解剖學(xué)、組織學(xué)等多種實(shí)驗(yàn)手段系統(tǒng)分析了玻璃扯旗魚性腺發(fā)育及性別分化的基本時(shí)間節(jié)點(diǎn);同時(shí)利用同源克隆和RACE-PCR技術(shù),獲得了玻璃扯旗魚性腺相關(guān)基因Vasa的cDNA全長,并利用半定量RT-PCR及原位雜交分析了其表達(dá)定位情況。本研究的主要結(jié)果如下:1玻璃扯旗魚性別特征及其幼魚性別分化的組織學(xué)初探通過對4月齡以上的透明系魚和5月齡以上的銀膜系魚腹部進(jìn)行觀察,如其腹部隆起或出現(xiàn)淡黃色顆粒狀組織則可判定為雌魚。通過石蠟切片H.E.染色發(fā)現(xiàn)6月齡卵巢中包括初級生長期、皮質(zhì)泡時(shí)期、卵黃增生期和卵母細(xì)胞成熟期4個(gè)時(shí)相的卵母細(xì)胞;此時(shí)雄魚精巢精小管腔內(nèi)充滿大量成熟精子。通過臀鰭出現(xiàn)鉤狀小齒可間接判定100日齡以后的玻璃扯旗魚為雄魚,2月齡以前的幼魚無這一性別差異。利用石蠟組織切片法分析5至50日齡幼魚性腺發(fā)育狀態(tài)發(fā)現(xiàn)10日齡之前的幼魚體內(nèi)無分化明顯的生殖腺;15日齡幼魚體內(nèi)觀察到生殖包囊的存在,且15日齡之前性腺組織僅在腹腔一側(cè)出現(xiàn);25日齡幼魚腹腔兩側(cè)出現(xiàn)對稱分布...
【文章來源】:湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)湖南省
【文章頁數(shù)】:83 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
玻璃扯旗魚Figure1-1Pristellamaxillaris
圖 1-2 DEAD-box RNA 解旋酶參與細(xì)胞的過程[55]Figure 1-2 Cellular processes require DEAD-box RNA helicases[55]07 年)[73]、中國明對蝦(2007 年)[74]、太平洋白蝦(2007 年)[75]、仿08 年)[76]、南方鲇(2008 年)[77]、刺參(2008 年)[78]、日本沼蝦([79]、金槍魚(2009 年)[80]、蝦夷馬糞海膽(2010 年)[81]、擬穴青蟹([82]、中華絨螯蟹(2010 年)[83]、中華卵索線蟲(2011 年)[84]、黑脊倒11 年)[85]、半滑舌鰨(2012 年)[86]、大菱鲆(2013 年)[87]、牙鲆([88]、塞內(nèi)加爾鰨(2013 年)[89]、哲羅魚(2014 年)[90]、日本血吸蟲([91]、翹嘴紅鲌(2014 年)[92]、脊尾白蝦(2014 年)[93]、優(yōu)雅蟈螽([94]、馬氏珠母貝(2016 年)[95]、中華鱉(2017)[96]等。通過對多類物因編碼的氨基酸數(shù)目統(tǒng)計(jì),陳玉冬(2010 年)等人發(fā)現(xiàn)不同物種之間大,其中家蠶一種 isoform(亞型)的 Vasa 基因只能編碼最少的 93 個(gè)而櫛孔扇貝 Vasa mRNA 最多可以編碼 801 個(gè)氨基酸[95]。Vasa 基因的外
在之前的一部分研究中,如呂博彥(2010 年)、林帆(2013 年)、黃進(jìn)強(qiáng)014 年)等人認(rèn)為 Vasa 與 PL10、P68 亞族一樣,具有 8 個(gè) DEAD-box 家族蛋型的保守結(jié)構(gòu)域[52,53,97],即 AxxGxGKT、PTREL、GG、TPGR、DEAD、S、ARGID 和 HRxGRxGR,如圖 1-3 所示[96]。而 Rocak 和 Linder 的研究中確
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]中華鱉vasa基因克隆及在卵母細(xì)胞中的表達(dá)分析[J]. 張飄逸,李偉,朱新平,洪孝友,陳昆慈,徐紅艷. 水生生物學(xué)報(bào). 2017(02)
[2]細(xì)鋸脂鯉背鰭和脂鰭的發(fā)育觀察和轉(zhuǎn)錄組比較分析[J]. 劉小玉,劉志偉,鮑寶龍. 上海海洋大學(xué)學(xué)報(bào). 2016(06)
[3]卡拉白魚性腺發(fā)育組織學(xué)觀察[J]. 姜愛蘭,劉俊得,丁辰龍,王信海,藺玉華. 青島農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2016(02)
[4]馬氏珠母貝PmCOLVIA6基因的克隆和表達(dá)分析[J]. 梁金連,鄭哲,黃榮蓮,王慶恒,鄧岳文,焦鈺,杜曉東. 基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué). 2016(04)
[5]EE2抑制斑馬魚雌性內(nèi)源雌激素合成酶的表達(dá)[J]. 劉虹余,蔡靜,饒劍軍,劉智皓. 重慶師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2016(01)
[6]優(yōu)雅蟈螽VASA蛋白cDNA序列的克隆與生物信息學(xué)分析[J]. 寇曉艷,劉靜,周志軍,騫蕾陽,石福明. 環(huán)境昆蟲學(xué)報(bào). 2015(03)
[7]人工養(yǎng)殖七彩神仙魚性腺發(fā)育的研究[J]. 徐亞飛,陳再忠,高建忠,謝松. 安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2015(01)
[8]魚類性別異形和性別決定的遺傳基礎(chǔ)及其生物技術(shù)操控[J]. 梅潔,桂建芳. 中國科學(xué):生命科學(xué). 2014(12)
[9]翹嘴紅鲌Vasa基因cDNA克隆及其組織表達(dá)特征[J]. 曹訪,劉莉,采克俊,李景芬. 中國畜牧雜志. 2014(13)
[10]脊尾白蝦(Exopalaemon carinicauda)vasa基因cDNA克隆及其在卵巢發(fā)育中的表達(dá)分析[J]. 徐文斐,劉萍,李吉濤,李健,陳萍. 海洋與湖沼. 2014(03)
博士論文
[1]SF-1是尼羅羅非魚性類固醇激素生成、性腺發(fā)育以及性別分化所必需的關(guān)鍵因子[D]. 謝慶平.西南大學(xué) 2016
[2]半滑舌鰨生殖細(xì)胞標(biāo)記基因的克隆、表達(dá)及調(diào)控區(qū)功能驗(yàn)證[D]. 黃進(jìn)強(qiáng).中國海洋大學(xué) 2014
[3]基于vasa/dnd基因標(biāo)記的兩種海水魚原始生殖細(xì)胞發(fā)生發(fā)育的研究[D]. 林帆.中國科學(xué)院研究生院(海洋研究所) 2013
[4]羅非魚和南方鲇生殖細(xì)胞幾種分子標(biāo)記的克隆和表達(dá)研究[D]. 胡重江.西南大學(xué) 2008
碩士論文
[1]雌、雄激素對羅非魚性別分化和性腺基因表達(dá)的影響[D]. 陳立黎.西南大學(xué) 2016
[2]哲羅魚早期發(fā)育階段免疫指標(biāo)變化及vasa基因的克隆與表達(dá)分析[D]. 豐程程.上海海洋大學(xué) 2014
[3]日本血吸蟲Vasa樣蛋白基因的獲得、表達(dá)及初步鑒定[D]. 刁玉潔.安徽醫(yī)科大學(xué) 2014
[4]牙鲆vasa基因的克隆、表達(dá)分析及其啟動(dòng)子調(diào)控的GFP報(bào)告載體構(gòu)建[D]. 吳曉萌.中國海洋大學(xué) 2013
[5]青鳉性腺發(fā)育的組織學(xué)觀察和DMY、Dmrt1基因的表達(dá)分析[D]. 張靜.上海海洋大學(xué) 2013
[6]黑脊倒刺鲃幾種生殖系標(biāo)記基因的克隆、鑒定及其在生殖細(xì)胞發(fā)育中的表達(dá)[D]. 呂博彥.福建師范大學(xué) 2011
[7]久效磷農(nóng)藥對斑馬魚性別分化的影響及機(jī)制研究[D]. 高蕾.中國海洋大學(xué) 2011
[8]中華絨螯蟹(Eriocheir sinensis)精巢vasa基因克隆與表達(dá)分析[D]. 孫江玲.華東師范大學(xué) 2010
[9]斑馬魚早期性腺發(fā)育及甲基睪酮對其性分化的影響[D]. 張立濤.河北大學(xué) 2010
[10]久效磷對斑馬魚性別決定相關(guān)基因Vasa和Cyp3cl基因表達(dá)影響的研究[D]. 尹德玉.中國海洋大學(xué) 2009
本文編號:3024094
【文章來源】:湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)湖南省
【文章頁數(shù)】:83 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
玻璃扯旗魚Figure1-1Pristellamaxillaris
圖 1-2 DEAD-box RNA 解旋酶參與細(xì)胞的過程[55]Figure 1-2 Cellular processes require DEAD-box RNA helicases[55]07 年)[73]、中國明對蝦(2007 年)[74]、太平洋白蝦(2007 年)[75]、仿08 年)[76]、南方鲇(2008 年)[77]、刺參(2008 年)[78]、日本沼蝦([79]、金槍魚(2009 年)[80]、蝦夷馬糞海膽(2010 年)[81]、擬穴青蟹([82]、中華絨螯蟹(2010 年)[83]、中華卵索線蟲(2011 年)[84]、黑脊倒11 年)[85]、半滑舌鰨(2012 年)[86]、大菱鲆(2013 年)[87]、牙鲆([88]、塞內(nèi)加爾鰨(2013 年)[89]、哲羅魚(2014 年)[90]、日本血吸蟲([91]、翹嘴紅鲌(2014 年)[92]、脊尾白蝦(2014 年)[93]、優(yōu)雅蟈螽([94]、馬氏珠母貝(2016 年)[95]、中華鱉(2017)[96]等。通過對多類物因編碼的氨基酸數(shù)目統(tǒng)計(jì),陳玉冬(2010 年)等人發(fā)現(xiàn)不同物種之間大,其中家蠶一種 isoform(亞型)的 Vasa 基因只能編碼最少的 93 個(gè)而櫛孔扇貝 Vasa mRNA 最多可以編碼 801 個(gè)氨基酸[95]。Vasa 基因的外
在之前的一部分研究中,如呂博彥(2010 年)、林帆(2013 年)、黃進(jìn)強(qiáng)014 年)等人認(rèn)為 Vasa 與 PL10、P68 亞族一樣,具有 8 個(gè) DEAD-box 家族蛋型的保守結(jié)構(gòu)域[52,53,97],即 AxxGxGKT、PTREL、GG、TPGR、DEAD、S、ARGID 和 HRxGRxGR,如圖 1-3 所示[96]。而 Rocak 和 Linder 的研究中確
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期刊論文
[1]中華鱉vasa基因克隆及在卵母細(xì)胞中的表達(dá)分析[J]. 張飄逸,李偉,朱新平,洪孝友,陳昆慈,徐紅艷. 水生生物學(xué)報(bào). 2017(02)
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[3]卡拉白魚性腺發(fā)育組織學(xué)觀察[J]. 姜愛蘭,劉俊得,丁辰龍,王信海,藺玉華. 青島農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2016(02)
[4]馬氏珠母貝PmCOLVIA6基因的克隆和表達(dá)分析[J]. 梁金連,鄭哲,黃榮蓮,王慶恒,鄧岳文,焦鈺,杜曉東. 基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué). 2016(04)
[5]EE2抑制斑馬魚雌性內(nèi)源雌激素合成酶的表達(dá)[J]. 劉虹余,蔡靜,饒劍軍,劉智皓. 重慶師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2016(01)
[6]優(yōu)雅蟈螽VASA蛋白cDNA序列的克隆與生物信息學(xué)分析[J]. 寇曉艷,劉靜,周志軍,騫蕾陽,石福明. 環(huán)境昆蟲學(xué)報(bào). 2015(03)
[7]人工養(yǎng)殖七彩神仙魚性腺發(fā)育的研究[J]. 徐亞飛,陳再忠,高建忠,謝松. 安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2015(01)
[8]魚類性別異形和性別決定的遺傳基礎(chǔ)及其生物技術(shù)操控[J]. 梅潔,桂建芳. 中國科學(xué):生命科學(xué). 2014(12)
[9]翹嘴紅鲌Vasa基因cDNA克隆及其組織表達(dá)特征[J]. 曹訪,劉莉,采克俊,李景芬. 中國畜牧雜志. 2014(13)
[10]脊尾白蝦(Exopalaemon carinicauda)vasa基因cDNA克隆及其在卵巢發(fā)育中的表達(dá)分析[J]. 徐文斐,劉萍,李吉濤,李健,陳萍. 海洋與湖沼. 2014(03)
博士論文
[1]SF-1是尼羅羅非魚性類固醇激素生成、性腺發(fā)育以及性別分化所必需的關(guān)鍵因子[D]. 謝慶平.西南大學(xué) 2016
[2]半滑舌鰨生殖細(xì)胞標(biāo)記基因的克隆、表達(dá)及調(diào)控區(qū)功能驗(yàn)證[D]. 黃進(jìn)強(qiáng).中國海洋大學(xué) 2014
[3]基于vasa/dnd基因標(biāo)記的兩種海水魚原始生殖細(xì)胞發(fā)生發(fā)育的研究[D]. 林帆.中國科學(xué)院研究生院(海洋研究所) 2013
[4]羅非魚和南方鲇生殖細(xì)胞幾種分子標(biāo)記的克隆和表達(dá)研究[D]. 胡重江.西南大學(xué) 2008
碩士論文
[1]雌、雄激素對羅非魚性別分化和性腺基因表達(dá)的影響[D]. 陳立黎.西南大學(xué) 2016
[2]哲羅魚早期發(fā)育階段免疫指標(biāo)變化及vasa基因的克隆與表達(dá)分析[D]. 豐程程.上海海洋大學(xué) 2014
[3]日本血吸蟲Vasa樣蛋白基因的獲得、表達(dá)及初步鑒定[D]. 刁玉潔.安徽醫(yī)科大學(xué) 2014
[4]牙鲆vasa基因的克隆、表達(dá)分析及其啟動(dòng)子調(diào)控的GFP報(bào)告載體構(gòu)建[D]. 吳曉萌.中國海洋大學(xué) 2013
[5]青鳉性腺發(fā)育的組織學(xué)觀察和DMY、Dmrt1基因的表達(dá)分析[D]. 張靜.上海海洋大學(xué) 2013
[6]黑脊倒刺鲃幾種生殖系標(biāo)記基因的克隆、鑒定及其在生殖細(xì)胞發(fā)育中的表達(dá)[D]. 呂博彥.福建師范大學(xué) 2011
[7]久效磷農(nóng)藥對斑馬魚性別分化的影響及機(jī)制研究[D]. 高蕾.中國海洋大學(xué) 2011
[8]中華絨螯蟹(Eriocheir sinensis)精巢vasa基因克隆與表達(dá)分析[D]. 孫江玲.華東師范大學(xué) 2010
[9]斑馬魚早期性腺發(fā)育及甲基睪酮對其性分化的影響[D]. 張立濤.河北大學(xué) 2010
[10]久效磷對斑馬魚性別決定相關(guān)基因Vasa和Cyp3cl基因表達(dá)影響的研究[D]. 尹德玉.中國海洋大學(xué) 2009
本文編號:3024094
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