大黃魚（Larimichthys crocea）,隸屬鱸形目、石首魚科（Sciaenidae）,曾廣泛分布于中國東海、南海以及黃海南部,是我國特有的地方性魚類。大黃魚現(xiàn)已發(fā)展成為我國海水網(wǎng)箱養(yǎng)殖量最大的魚種,具有很高的經(jīng)濟效益。近年來,由弧菌屬細菌引起的弧菌病呈爆發(fā)趨勢。該病傳播速度快、死亡率高,對大黃魚養(yǎng)殖業(yè)造成了嚴重沖擊。補體是魚類免疫系統(tǒng)最重要的組成部分,具有識別和消除外來病原體,激活免疫細胞,調(diào)控獲得性免疫等功能。在免疫組織中,補體調(diào)節(jié)因子大約占據(jù)了補體成分的二分之一,當受到外界病原刺激時會迅速活化為補體成分,并且進一步聚合形成酶復(fù)合物發(fā)揮一系列免疫效應(yīng)。本文以大黃魚為對象研究補體調(diào)節(jié)因子CFH、CFHR1、CFHR2在大黃魚組織中的表達特異性,并通過溶藻弧菌侵染大黃魚實驗研究補體調(diào)節(jié)基因的急相反應(yīng),對基因序列進行了生物信息學和系統(tǒng)進化分析,并對功能進行初步探索。一、從大黃魚基因數(shù)據(jù)庫中獲得三種補體調(diào)節(jié)因子cDNA序列:L.c-cfh cDNA全長1332bp,編碼443個氨基酸,多肽相對分子質(zhì)量為49.96KDa,等電點為6.66,GenBank登錄號為KP710858;L.... 

【文章來源】：浙江海洋大學浙江省

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

魚類補體系統(tǒng)的激活途徑（引自王志平）

圖 1-2 RCA 家族主要成員及分類（引自王菲）Fig. 1-2 The RCA family genes and their classify.1.4.2 CFH 及其相關(guān)蛋白的研究進展CFH 是 RCA 家族的重要成員，也是替代途徑中最重要的鑒別成分，CFH 能與胞膜結(jié)合形成膜結(jié)合蛋白識別自身與外源細胞[53]。它在 C3b 的表面有多個結(jié)合位點在體液中和細胞表面都能發(fā)揮作用，能夠有效地抑制 factor B 與 C3b 結(jié)合形成 C3 化酶。它既可以在液相中發(fā)揮作用，還能在細胞表面調(diào)節(jié)補體的激活。此外在替代徑中還可以促進 CFI 有效酶解 C3b，進一步阻止 C3 轉(zhuǎn)化酶的形成[54]。在人體中，些補體調(diào)節(jié)因子的基因都緊密連鎖在 1 號染色體的長臂上(1q32)[55]，CFHR1-5 基因位于 CFH 基因下游，相互之間具有很高的同源性，而且它們主要都在肝臟中表達受到外源病菌侵襲后，魚類肝臟能快速作出免疫應(yīng)答，大量合成補體調(diào)節(jié)因子 CF

圖 2-1 用于序列擴增的肝組織的總 RNA 電泳圖ctrophoresis of extracted total RNA from the liver of L體調(diào)節(jié)因子 CFH(Lc-cfh)基因全長 CDNA 的全基因組數(shù)據(jù)庫，獲得了 L.c-cfh 序列，基因’端的起始密碼子(ATG)和 3’端的終止密碼子k 數(shù)據(jù)庫，數(shù)據(jù)庫的登錄號為 KP710858。利讀框進行搜索，發(fā)現(xiàn)其 ORF(open reading fra端含有 24 個氨基酸的信號肽序列(用紅色下劃 預(yù)測的多肽的分子量約為 49.96kDa，編碼一，等電點為 6.66。使用 DNAMAN 得到其多肽 2-2 所示，其中含有 100 個疏水氨基酸 64 個列存在 1 個潛在的 N-糖基化位點(Asn237)。

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：2980301