鰻鱺作為廣泛分布的降海洄游類魚類,其肉質(zhì)鮮美,營養(yǎng)價(jià)值豐富,因而被大多數(shù)國家所喜愛,像日本就以喜食河鰻而聞名;但在目前關(guān)于鰻鱺的繁殖育種仍有很多未解之謎,本研究主要集中在鰻鱺（花鰻鱺和日本鰻鱺）人工繁殖過程中血液和性腺內(nèi)類固醇激素的含量以及其變化。性類固醇激素是動(dòng)物體內(nèi)性腺生長發(fā)育的必要激素,尤其對于硬骨魚類人工繁殖過程中,睪酮（T）、孕酮（P）、雌酮（E1）、雌二醇（E2）、雌三醇（E3）、17α,20β-二羥基-4-孕烯-3-酮（DHP）、17α-羥基孕酮（17α-OHP）在性腺的發(fā)育前期、發(fā)育中期以及發(fā)育末期對卵細(xì)胞的卵黃形成以及胚泡破裂有重要作用。對池塘養(yǎng)殖的花鰻鱺多次注射鯉魚腦垂體（carp pituitary extract,20mg/kg·周）和人絨毛膜促性腺激素（hCG,300IU/kg·周）誘導(dǎo)花鰻鱺性腺發(fā)育以及成熟,采用貝克曼庫爾特免疫分析儀通過化學(xué)發(fā)光免疫分析法（CLIA）研究此過程中,血清中游離類固醇類激素和糖蛋白類激素的變化,分析比較了不同成熟時(shí)期花鰻鱺血清中三種類固醇激素,即睪酮、孕酮、17β-雌二醇和三種糖蛋白類激素,卵泡刺激素（FSH）、黃體生成激素（L... 

【文章來源】：上海海洋大學(xué)上海市

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

花鰻鱺卵巢發(fā)育的不同階段；（A）卵黃階早期卵黃階段卵巢組織切片，比例為100μm；（C

上海海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文圖2 誘導(dǎo)雌性花鰻鱺成熟過程中血清中a:雌二醇（E2）Pmol/L、b:孕酮（P）IU/L、c:睪酮（T）nmol/L的含量變化各值為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差, 柱上不同字母表示差異顯著(P<0.05, Duncan氏檢驗(yàn), n=3)Fig.2 Changes in serum levels of Estradiol (E2),a; Progesterone(P),b; Testosterone(T),c ;duringartificial maturation in Anguilla marmorata. Symbols as described in Fig. 1. Values representmean±SEM3.4.2 血清中糖蛋白激素-FSH、LH、HCG的含量變化人工催熟過程中花鰻鱺的血清中糖蛋白激素（FSH、LH、HCG）的變化如圖3（a、b、c）所示；圖3 a中對照組FSH的含量在發(fā)育前期最高位(21.35±2.39)IU/L，發(fā)育中期會(huì)略有降低，之后會(huì)穩(wěn)定在平均值為(16.47±3.69)IU/L，實(shí)驗(yàn)組會(huì)在發(fā)育后期到達(dá)最高值(42.70±2.89)IU/L,之后在發(fā)育末期迅速降低至(5.56±3.89)IU/L；小周期的變化如a中折線所示，均在24h會(huì)略有升高，72h時(shí)略有下降；圖3 b中對照組LH的平均值為(245.81±49.18)IU，實(shí)驗(yàn)組的LH會(huì)隨著發(fā)育階段的變化而逐漸升高至發(fā)育后期到達(dá)最高(343.9±36.79)IU，發(fā)育末期是降至bc22

將標(biāo)準(zhǔn)溶液按照體積分別加入通過4.1.2.1的方法處理得到的對照組的樣品中，使其濃度分別為1、5、25、50、100、200ng/ml。圖4 睪酮（a）、孕酮（b）、雌二醇（c）、雌三醇（d）、17α，20β-二羥基-4-孕烯-3-酮（e）、17α-羥基孕酮（f）結(jié)構(gòu)式Fig.4 Structures of testosterone(a), progesterone(b), estradiol-17β(c), estriol(d),17α,20β-dihydroxy-4-pregnen-3-one(e) and 17α-hydroxyprogesterone(f)4.1.3 色譜與質(zhì)譜條件UPLC 的色譜條件為：色譜柱：xBridge-C18（2.1mm×100mm，5μm）；柱溫：40℃；流速：0.30 mL/min；進(jìn)樣量：10μL；分析時(shí)間：12min；梯度洗脫。梯度洗脫的具體程序見表 3。表 3. 目標(biāo)物的 UPLC 流動(dòng)相梯度參數(shù)設(shè)置Table 1 Gradient UPLC method時(shí)間(min) %A %B 線性（Curve）0.00 95.0 5.0 06.50 0.0 100.0 610.00 0.0 100.0 610.1 95.0 5.0 112.00 95.0 5.0 1流動(dòng)相 A：水（含 2 mmol/L 乙酸銨，0.1%氨水），B：甲醇。abcd ef27

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜結(jié)合譜庫檢索測定豬組織中的9種β-興奮劑殘留量[J]. 蔡勤仁,吳潔珊,錢振杰,彭玉芬,蔡杰,杜志峰.  色譜. 2013(03)
[2]高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法同時(shí)測定水產(chǎn)品中24種性激素[J]. 李向軍,于慧娟,馮兵,沈康俊,李冰.  分析試驗(yàn)室. 2012(05)
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[4]人工誘導(dǎo)花鰻鱺卵巢發(fā)育成熟及相關(guān)激素和組織的作用[J]. 林浩然,齊鑫,周雯伊,尹紹武,黃海,張勇,劉曉春,陳國華.  水產(chǎn)學(xué)報(bào). 2010(07)
[5]花鰻鱺腦cDNA文庫的構(gòu)建及GnRH基因克隆與表達(dá)分析[J]. 黃海,張勇,劉曉春,尹紹武,楊麗萍,朱培,齊興柱,林浩然.  水生生物學(xué)報(bào). 2009(02)
[6]黃鱔肌肉中的20種性激素同時(shí)測定的氣質(zhì)聯(lián)用檢測方法[J]. 湛嘉,俞雪鈞,李佐卿,謝東華,樊苑牧,陳樹兵.  食品科學(xué). 2008(06)
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[9]雄烯二酮和甲基睪酮誘導(dǎo)雄性日本鰻鱺性腺發(fā)育的作用[J]. 張利紅,張為民,林浩然.  動(dòng)物學(xué)研究. 2001(02)
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