一氧化氮是一種多功能的氣態(tài)生物信使,由多種細胞或組織產生,它可以降低甚至殺滅感染因子,而過量的一氧化氮又會造成機體組織損傷,加快炎癥進程,誘導型一氧化氮合成酶（i NOS）是合成一氧化氮分子的關鍵限速酶,因此掌握i NOS的作用機制從而對其調控顯得至關重要。實驗旨在獲得i NOS的全長c DNA序列,為進一步利用RT-PCR、Northernblot等方法研究i NOS蛋白在鯉魚中的調節(jié)機制奠定基礎,并利用熒光定量技術檢測i NOS在體內體外受到外來刺激后的表達變化情況,以及其表達是否有組織特異性。實驗目的:獲得鯉魚誘導型一氧化氮合成酶c DNA全長序列,并通過體內體外實驗探究i NOS在刺激因子刺激下的表達變化及其組織特異性表達規(guī)律;實驗方法:以鯉魚外周血白細胞c DNA文庫中獲得的i NOS的EST序列為基礎,采用文庫篩選和c DNA 5’末端快速擴增技術（5’-RACE）相結合的方法,獲得鯉i NOS c DNA全長序列,體外實驗用脂多糖（LPS,1.0μg/m L）刺激原代培養(yǎng)的外周血白細胞4 h、12 h,刀豆蛋白A（Con A,1.0μg/m L）刺激4 h、24 h,提取... 

【文章來源】：吉林大學吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
前言
第一篇 文獻綜述
    第一章 魚類先天性免疫研究進展
        1 魚類先天性免疫概述
        2 魚類先天性免疫器官
        3 魚類先天性免疫細胞
        4 先天性免疫分子
    第二章 誘導型一氧化氮合成酶研究進展
        1 iNOS的結構和功能
        2 iNOS的表達及表達調控機制
        3 iNOS與炎癥疾病的關系
第二篇 研究內容
    第一章 鯉魚iNOS全長cDNA的獲得及鑒定分析
        1 材料與方法
        2 結果
        3 討論
        4 小結
    第二章 絲裂原刺激前后iNOS在白細胞中的差異表達分析
        1 材料與方法
        2 結果
        3 討論
        4 小結
    第三章 鞭毛蛋白誘導iNOS在頭腎組織中的表達
        1 材料與方法
        2 結果
        3 討論
        4 小結
    第四章 嗜水氣單胞菌感染鯉魚后iNOS在不同組織中的表達
        1 材料與方法
        2 結果
        3 討論
結論
參考文獻
導師簡介
作者簡介
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
[1]鯉魚TLR5基因克隆、鑒定及對嗜水氣單胞菌感染的應答[D]. 孫真.吉林大學 2014



本文編號：2898023