【摘要】：灘涂貝類養(yǎng)殖業(yè)是我省漁業(yè)經(jīng)濟(jì)的重要支柱,近年來(lái)養(yǎng)殖品種、養(yǎng)殖模式日益多樣化,養(yǎng)殖技術(shù)逐漸進(jìn)步,產(chǎn)量不斷增多。但是隨著貝類養(yǎng)殖業(yè)的高速發(fā)展和養(yǎng)殖環(huán)境污染等問(wèn)題,病害愈發(fā)嚴(yán)重。其中弧菌病對(duì)貝類養(yǎng)殖業(yè)帶來(lái)嚴(yán)重危害。因此貝類弧菌的流行情況和防控技術(shù)是亟待解決的科學(xué)問(wèn)題。本研究開(kāi)展了對(duì)2017年和2018年山東濱州、青島、煙臺(tái)、威海、東營(yíng)等7個(gè)沿海養(yǎng)殖地區(qū)養(yǎng)殖的菲律賓蛤仔、蟶子、斑紋棱蛤、扁玉螺、脈紅螺、扇貝、毛蚶、牡蠣和貽貝等弧菌的流行病學(xué)調(diào)查。通過(guò)對(duì)分離弧菌的分析比較,了解貝類弧菌病的流行性。并對(duì)分離率較高的3種弧菌進(jìn)行了藥敏試驗(yàn),研究其耐藥情況,同時(shí)研究了各弧菌毒力基因的攜帶情況。本研究共分離細(xì)菌155株,屬不同的27種,其中弧菌24種,其他菌3種。分離出的弧菌包括溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)、哈氏弧菌(Vibrio harveyi)、副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)、杭州弧菌(Vibrio hangzhouensis)、需鈉弧菌(Vibrio natriegens)、Vibrio owensii、Vibrio chagasii等。其他菌包括Photobacterium damsetae、Enterobacter cloacae和Photobacterium swingsii。統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明,檢出率比較高的是哈氏弧菌、溶藻弧菌和副溶血弧菌,分別為23%、24%和9%;弧菌總體的檢出率為95%,其他菌為5%。其中哈氏弧菌和溶藻弧菌每年檢出率都在20%以上,其他弧菌的檢出率相對(duì)而言較低。不同貝類中弧菌的檢出率也不相同,副溶血弧菌在貽貝、毛蚶和蟶子中的分離率較高,分別為62%,18%和22%;哈氏弧菌在四角蛤、毛蚶和菲律賓蛤仔中分離率較高,分別為38%、35%和28%;溶藻弧菌在牡蠣、蟶子和菲律賓蛤仔中的分離率較高,分別為41%、36%和21%。不同地區(qū)中弧菌的檢出率是不同的,其中哈氏弧菌在濱州、東營(yíng)和濰坊的檢出率較高,為25%,44%和28%;溶藻弧菌在日照,威海,煙臺(tái)的檢出率較高為52%,43%和37%;副溶血弧菌在濱州和日照的檢出率較高為18%和13%。本試驗(yàn)對(duì)這兩年分離率較高的3種弧菌進(jìn)行了藥敏試驗(yàn)。使用氨芐西林、阿莫西林、哌拉西林、頭孢呋辛、頭孢噻吩、鏈霉素、慶大霉素、卡那霉素、阿米卡星、恩諾沙星、萘啶酸、紅霉素、四環(huán)素、復(fù)方新諾明、氟苯尼考和氨曲南這些藥敏片。藥敏結(jié)果表明,氟苯尼考和萘啶酸對(duì)弧菌的敏感率達(dá)到100%;復(fù)方新諾明、紅霉素對(duì)弧菌的敏感率達(dá)到95%,并且沒(méi)有耐藥菌株的出現(xiàn);恩諾沙星、四環(huán)素、氨曲南等抗生素對(duì)弧菌的敏感率也達(dá)到了90%以上,沒(méi)有耐藥菌株;90.8%和86.2%的弧菌對(duì)氨芐西林和阿莫西林表現(xiàn)為耐藥,分別只有2%和1%表現(xiàn)為敏感;弧菌對(duì)頭孢噻吩和卡那霉素敏感率在50%左右,耐藥率分別是18.4%和10.3%;哌拉西林的耐藥率是8%;本試驗(yàn)對(duì)分離的各弧菌進(jìn)行了毒力基因檢測(cè)。檢測(cè)的毒力基因包括tdh、trh、ure C、lux R、Omp W、vvh A和vac O等。結(jié)果表明,哈氏弧菌中tox R基因、pap6基因、lux R基因攜帶率較高分別為47%、39%和28%;副溶血弧菌中vscC2基因攜帶率最高為35%,而ure C基因和trh基因的攜帶率為14%和21%;溶藻弧菌中Omp W基因攜帶率較高,為29%。本試驗(yàn)通過(guò)對(duì)2017年和2018年山東省貝類弧菌病的流行病學(xué)調(diào)查,掌握貝類弧菌病的流行情況,為弧菌病的防控提供了依據(jù);通過(guò)對(duì)弧菌的藥敏試驗(yàn),為對(duì)貝類弧菌病的藥物防治提供了科學(xué)方法;同時(shí)檢測(cè)主要毒力基因在一些分離的弧菌中的分布,為毒力菌株的鑒定提供相關(guān)資料,同時(shí)為有效地預(yù)防弧菌傳染病的大面積暴發(fā)提供科學(xué)依據(jù),具有重要研究意義。
【圖文】：

山東省貝類弧菌流行病學(xué)調(diào)查及毒力基因檢測(cè)3 結(jié)果3.1 弧菌形態(tài)特征TCBS 培養(yǎng)基生長(zhǎng)的在貝類樣本中分離出的弧菌，在 30℃溫箱過(guò)夜培養(yǎng)，其中哈氏弧菌和溶藻弧菌在 TCBS 培養(yǎng)基上菌落顏色呈黃色，副溶血弧菌在 TCBS 培養(yǎng)基上菌落顏色呈綠色，如圖 1 所示。對(duì)弧菌進(jìn)行革蘭氏染色，都是革蘭氏陰性菌，有鞭毛無(wú)芽孢和莢膜，可以彎曲成弧形或者逗號(hào)狀，，短桿狀細(xì)菌。如圖 2 所示。

1 弧菌在 tcbs 培養(yǎng)基上生長(zhǎng)A:溶藻弧菌 B:副溶血弧菌Fig.1 Vibrio growing on tcbs mediumA: Vibrio alginolyticus B: Vibrio parahaemolyticus
【學(xué)位授予單位】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：S944

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2676690