【摘要】：近年來,為減少及替代抗生素的使用,國內(nèi)研究學(xué)者進行了大量研究。丁酸梭菌作為一種新興的益生菌,能厭氧生長并產(chǎn)生芽孢,具有耐熱、耐酸、耐堿及耐高溫等特性。比當前被普遍添加的芽孢桿菌、乳酸桿菌等添加劑更具有開發(fā)價值,是飼用益生菌的理想菌種。本文分別以歐洲鰻鱺和美洲鰻鱺為研究對象,探究飼料中添加丁酸梭菌對鰻鱺生長和健康的促進作用,以期尋找一種高性價比的抗生素替代品,促進養(yǎng)殖動物的健康成長。結(jié)果如下:1、探究丁酸梭菌對歐洲鰻鱺生長及健康的影響,為抗生素的替代提供參考依據(jù)。將初始均重172.050 g左右的5282 kg歐洲鰻鱺(Anguilla anguilla),隨機放養(yǎng)于6口30 m~2的大池中。隨機分為空白對照組(C組,僅基礎(chǔ)飼料)和丁酸梭菌組(D組,飼料中添加1×10~8cfu/kg丁酸梭菌),每組3個重復(fù),養(yǎng)殖121天。結(jié)果表明:(1)丁酸梭菌組歐洲鰻鱺末重、增重率、特定生長率、攝食率均顯著升高(P0.05),但對鰻鱺常規(guī)體成分、臟體比、肝體比、肥滿度無顯著影響;(2)丁酸梭菌顯著提高了血清中免疫酶活性(ACP、AKP、LYS、ALB)(P0.05),使血清中HDL-C和AST活性顯著降低(P0.05);(3)與空白組對照組相比,丁酸梭菌顯著提高了肝臟GST、T-SOD、T-AOC活性,肝臟中MDA、ALT和AST活性得到顯著降低(P0.05),但對肝臟CAT活性無顯著影響;(4)丁酸梭菌顯著提高了歐洲鰻鱺腸道T-AOC、GSH活性、脂肪酶活性、蛋白酶活性以及腸道皺襞長度(P0.05);(5)利用高通量測序技術(shù)對兩組歐洲鰻鱺腸道內(nèi)容物菌群結(jié)構(gòu)進行分析,兩組樣品Chao1、Shannon值未表現(xiàn)出顯著性差異,兩組共有核心菌群主要以螺旋菌門(Spirochaetae)、軟壁菌門(Tenericutes)、厚壁菌門(Firmicutes)、變形菌門(Proteobacteria)和擬桿菌門(Bacteroidetes)為主,且各菌在兩組間差異不顯著。2、飼料長期儲存過程中易產(chǎn)生有害物質(zhì)組胺,威脅動物健康。因此本試驗進一步探究丁酸梭菌對組胺的緩解作用,為動物的健康生長提供保障。將均重10.987 g的360尾美洲鰻鱺(Anguilla rostrata),隨機分成3個組,每組4個重復(fù),分別記為C(基礎(chǔ)飼料)、H(300 mg/kg組胺)、HD(300 mg/kg組胺+1×10~8 cfu/kg丁酸梭菌)組,養(yǎng)殖周期77天。結(jié)果表明:(1)HD組美洲鰻鱺末重、增重率、特定生長率顯著高于H組(P0.05),但常規(guī)體成分、臟體比、肝體比、肥滿度在各組間無顯著性差異;(2)H組血清中D-乳酸、DAO、ALB、LYS活性顯著低于C、HD組(P0.05),且ALT和AST活性顯著升高(P0.05);(3)C組肝臟T-SOD活性顯著高于H、HD組(P0.05),CAT活性顯著高于H組(P0.05),MDA、T-AOC活性在各組間無顯著性差異;(4)HD組腸道CAT、T-SOD、T-AOC活性顯著高于C、H組(P0.05),且MDA活性也顯著低于C、H組。與空白組相比組胺顯著增加了腸道MDA活性以及T-SOD活性;(5)與C、H組相比HD組極顯著提高了腸道蛋白酶和脂肪酶活性(P0.01),且淀粉酶活性顯著高于C組(P0.05),但與H組差異不顯著;(6)與C組相比,組胺顯著降低了美洲鰻鱺腸道皺襞長度(P0.05),丁酸梭菌的添加極顯著地緩解由組胺引起的皺襞長度變短(P0.01),并顯著高于C組(P0.05);(7)利用高通量測序技術(shù)對3組美洲鰻鱺腸道內(nèi)容物菌群結(jié)構(gòu)進行分析發(fā)現(xiàn),各處理組美洲鰻鱺腸道內(nèi)容物16 S rRNA基因的豐度(Chao1指數(shù))和多樣性(Shannon)無顯著差異。但與空白組相比組胺的添加顯著增加了美洲鰻鱺腸道內(nèi)容物中芽孢桿菌屬(Bacillus)、短波單胞菌(Brevundimonas)的比例(P0.05)。丁酸梭菌的添加顯著增加了美洲鰻鱺腸道內(nèi)容物中梭菌屬(Clostridium)、芽孢桿菌屬(Bacillus)和短波單胞菌屬(Brevundimonas)的比例(P0.05),鯨桿菌屬(Cetobacterium)和Romboutsia屬的比例顯著低于C、H組(P0.05)。綜合以上實驗結(jié)果,說明飼料中添加丁酸梭菌可以顯著提高鰻鱺的生長性能和抗氧化能力,并維護鰻鱺的腸道健康,可作為一種有效的抗生素替代品。
【圖文】：

17（c） （d）圖 2-1 歐洲鰻鱺腸道切片顯微觀察（HE 染色）Fig 2-1 Microstructure of Intestinal Tract of Anguilla Anguilla (HE Dye)中（a）（b）是空白對照組歐洲鰻鱺腸道在 5×10、5×20（目鏡放大倍數(shù)×物鏡放大倍數(shù)）倍鏡下的顯微觀察（d）是丁酸梭菌組歐洲鰻鱺腸道在 5×10、5×20 倍鏡下的顯微觀察圖。Fig (a) (b) is a microscopic observation of the intestinal tract of Anguilla anguilla in the blank control group under 5×20 (eyepiece magnification×objective magnification) magnification; (c) (d) is a microscopic observation of the intefAnguilla anguilla in Clostridium butyricum group under 5×10 and 5×20magnification.

圖 2-2 歐洲鰻鱺腸道皺襞長度Fig 2-2 Intestinal fold length of Anguilla Anguilla別表示空白對照組和丁酸梭菌組，下同。 D in the figure indicate the blank control group and Clostridium butyricum菌對歐洲鰻鱺腸道內(nèi)容物菌群多樣性的影生物豐富度及多樣性測序檢測歐洲鰻鱺腸道內(nèi)容物 16S rRNA 基因 V3-V中共獲得 640095 個序列。經(jīng)過優(yōu)化和質(zhì)量控制，平均列長度在 420-440 bp，說明樣品已基本測通 V3-V4 區(qū)用 Qime 軟件從個樣品中抽取 23088 條序列構(gòu)建數(shù)據(jù)（圖 2-3）可知，每個樣品中的物種已趨于穩(wěn)定，說況。兩組的樣本覆蓋率均達到 96%以上。但從微生物hao1 和 Shannon 雖有增高的趨勢，但與空白對照組
【學(xué)位授予單位】：集美大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：S965.223

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本文編號：2651079