【摘要】：1.發(fā)酵豆粕替代魚粉對凡納濱對蝦生長,免疫相關酶活及免疫相關基因表達的影響近年來發(fā)酵豆粕作為魚粉替代物的研究已受到越來越多關注,但有關其影響水產動物生長的健康及免疫機能機制尚不明確。免疫相關酶、基因與水產動物健康、免疫機能密切相關。本實驗擬從免疫相關酶活及基因轉錄水平探討發(fā)酵豆粕替代魚粉對凡納濱對蝦生長影響的健康及免疫機能機制。設置5種實用飼料,以30%魚粉組(FM)為對照組,分別設置用4%(FSM4)、8%(FSM8)、12%(FSM12)和16%(FSM16)的發(fā)酵豆粕,相應替代9.7%、19.4%、29.1%和38.8%的魚粉飼料組,飼養(yǎng)體重為(7.62±0.23)g的凡納濱對蝦60天后,統計生長性能,檢測肌肉營養(yǎng)成分、血清及肝胰腺免疫酶活性,肝胰腺HSP70mRNA和鰓Toll受體mRNA、IMDmRNA、溶菌酶(LZM)mRNA免疫相關基因的表達水平。結果表明:1)發(fā)酵豆粕替代魚粉在凡納濱對蝦成活率上與對照組相比無顯著影響(P0.05);過低和過高的發(fā)酵豆粕添加量皆會影響凡納濱對蝦的特定生長率(P0.05)。2)肌肉粗蛋白含量在發(fā)酵豆粕添加組都低于對照組,除FSM12外差異不顯著(P0.05);粗脂肪含量隨著發(fā)酵豆粕添加量的升高而降低,FSM16組表現最低。3)免疫指標中,FSM4和FSM16組血清谷丙轉氨酶(ALT)活性顯著高于對照組(P0.05),堿性磷酸酶(ALP)活性除FSM12組外其余發(fā)酵豆粕組顯著高于對照組(P0.05),谷草轉氨酶(AST)活性分別在FSM4組和FSM8組出現最高值和最低值,血清總蛋白(TP)含量與肝胰腺丙二醛(MDA)含量除FSM16組外其余發(fā)酵豆粕組與對照組無顯著性差異(P0.05)。4)鰓Toll受體(TLR)mRNA隨著發(fā)酵豆粕添加量的增大有上升趨勢,鰓IMDmRNA表達量隨發(fā)酵豆粕添加量的增加呈先增后減趨勢,過高的添加量會降低鰓LZMmRNA表達量,而肝胰腺HSP70mRNA表達量則隨著發(fā)酵豆粕添加量的增加不斷上升。綜上所述,發(fā)酵豆粕適量替代魚粉對凡納濱對蝦生長性能無明顯影響,并可提高免疫相關酶活,上調免疫相關基因的表達,具有改善機體免疫機能的效果。本實驗條件下適宜替代魚粉比例以8%-12%為宜;發(fā)酵豆粕替代魚粉過高會引起機體不同程度的應激反應2.大豆抗原蛋白對凡納濱對蝦的生長,免疫酶活及免疫相關基因表達的影響設置兩組實驗,實驗一為兩種實用飼料,含24.9%的豆粕(SBM),8%的發(fā)酵豆粕和16.95%的豆粕(FSBM);實驗2為兩種半純化飼料,為高抗原蛋白(SPD1)組和低抗原蛋白(SPD2)組,其中的抗原蛋白含量(大豆球蛋白和β球蛋白)分別與實驗一豆粕組和發(fā)酵豆粕組相同,旨在比較發(fā)酵豆粕(FSBM)和豆粕(SBM)對凡納濱對蝦生長性能、基因表達、氧化狀態(tài)和非特異性免疫反應的影響,及其中的抗原蛋白對凡納濱生長,免疫健康等影響機制。實驗對蝦初重為7.62±0.23g,每組飼料設4平行,投喂60天。結果顯示,在實驗一中,對蝦體增重和特定生長率在兩組實用飼料組中無顯著性差異(P0.05),但在SBM組中,血清ALP、AST、ALT和肝胰腺SOD、LZM的活性顯著高于FSBM組(P0.05),而MDA的含量上無顯著差異(P0.05),而對于對蝦鰓中TLR、LZM、IMD和肝胰腺HSP70的基因表達水平上同樣SBM組顯著高于FSBM組(P0.05);實驗二,SPD2組的增重率和特定生長率顯著高于SPD1組(P0.05),免疫相關指標中,SPD1組與SPD2組相比具有更高的ALP,ALT和LZM活性,而TLRmRNA,LZMmRNA和IMDmRNA的表達水平低于SPD2組,HSP70mRNA的表達水平SPD1組顯著高于SPD2組(P0.05)�？偨Y,在凡納濱對蝦飼料中,豆粕比發(fā)酵豆粕更有可能誘發(fā)非特異性免疫反應和氧化應激。豆粕中的抗原蛋白是降低對蝦的免疫力,損害肝臟腺健康的主要原因。3.發(fā)酵豆粕替代魚粉時添加不同水平晶體精氨酸對凡納濱對蝦生長和抗應激能力的免疫調控發(fā)酵豆粕作為魚粉替代物已廣泛應用于水產動物飼料中,但在替代時會出現氨基酸平衡性問題,精氨酸作為一種必需氨基酸,在水產動物的新陳代謝中起著重要的作用,為了探討發(fā)酵豆粕替代魚粉時精氨酸的重要性,本實驗以凡納濱對蝦為研究對象(初重0.62±0.1g),在以魚粉(22.5%)和發(fā)酵豆粕(10%)為主要蛋白源,精氨酸含量為1.98%的基礎飼料中,分別添加0,0.2%,0.4%,0.6%,0.8%的晶體精氨酸。養(yǎng)殖60天后,統計對蝦生長情況,檢測體成分,肝胰腺氧化、血清免疫指標和基因表達水平,并進行耐低氧和抗弧菌實驗,結果顯示:5組飼料在對蝦成活率上無顯著性差異(P0.05),0.2%組和0.8%組增重率和特定生長率顯著高于其它組(P0.05)。血清MDA各組間無顯著性差異(P0.05),血清AST、ALT活性在0.2%組最高,0.8%組最低且與其他組差異顯著(P0.05);肝胰腺MDA含量在0.2%組最低。耐低氧和抗弧菌能力皆在0.2%組出現最高值,其次為0.8%組。檢測低(0.0%)中(0.4%)高(0.8%)水平相關基因表達量發(fā)現0.4%添加組在IMD、LZM、MyD88基因表達上皆為最低(P0.05),ATF4基因在0.0%組表達量最高且顯著高于另兩組(P0.05)。綜合生長、肝胰腺健康、抗應激能力和基因表達水平,在魚粉用量為22.5%,發(fā)酵豆粕用量為10%時,添加0.4%的晶體精基酸能有效調控凡納濱對蝦的免疫系統,增強機體的抗應激能力,保護肝胰腺健康,降低肝胰腺氧化應激且不影響對蝦的生長性能。4.發(fā)酵豆粕替代魚粉時添加不同水平晶體蛋氨酸對凡納濱對蝦生長和抗應激能力的免疫調控發(fā)酵豆粕作為魚粉替代物已廣泛應用于水產動物當中,但在替代時會出現氨基酸平衡性問題。蛋氨酸作為常見的第一限制性氨基酸,在魚粉替代時的添加顯得比其他必需氨基酸更為重要。為此,本實驗以凡納濱對蝦為研究對象(初重0.62±0.1g),在前期研究的基礎上,以含有22.5%魚粉和10%發(fā)酵豆粕為主要蛋白源,蛋氨酸含量為0.81%的飼料作為基礎飼料,配制5組不同晶體蛋氨酸添加量(0.00%,0.12%,0.24%,0.36%,0.48%)的飼料,養(yǎng)殖60天探討其對凡納濱對蝦生長、血清和肝胰腺指標、相關基因表達水平、耐低氧和抗弧菌能力的影響。結果顯示:5組飼料在對蝦成活率,增重率和特定生長率上無顯著性差異(P0.05)。血清MDA五組之間無顯著性差異(P0.05),血清AST,ALT活性在0.00%和0.48%組顯著高于其他組(P0.05);肝胰腺MDA含量在0.24%組最低。耐低氧能力,0.00%組顯著高于其他組,抗弧菌能力在0.12%和0.24%組出現最高值,選取了低(0.00%)、中(0.24%)、高(0.48%)三種水平蛋氨酸飼料組進行對蝦基因表達量的檢測,發(fā)現0.24%組TLR基因相對表達量顯著高于其他組,IMD基因0.00%組顯著低于另兩組,LZM基因表達量隨著蛋氨酸量增加而降低,ATF4基因0.00%組顯著高于0.24%組,綜上可知,在魚粉用量為22.5%,發(fā)酵豆粕用量為10%時,添加0.24%的晶體蛋基酸能更有效,增強凡納濱對蝦抗弧菌能力,降低對蝦肝胰腺氧化程度,保護肝胰腺健康,且不影響其生長性能。
【圖文】：

上海海洋大學碩士學位論文導致水質環(huán)境的污染進一步嚴重，水產品安全問題也隨之而出[2-5]，科主要從對蝦飼料配方的優(yōu)化來提高對蝦免疫抗病力以解決對蝦病害爆發(fā)用等問題[6-9]。

主要從對蝦飼料配方的優(yōu)化來提高對蝦免疫抗病力以解決對蝦病害爆用等問題[6-9]。圖 1-1.近幾年我國對蝦養(yǎng)殖產量Fig1-1.The production of shrimp aquaculture in China in recent years.
【學位授予單位】：上海海洋大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：S968.22

【參考文獻】

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本文編號：2626770