發(fā)布時間：2024-12-19 01:19

　　低溫脅迫嚴重干擾水稻的生長發(fā)育和新陳代謝過程,由此引發(fā)的水稻減產(chǎn)現(xiàn)象是我國迫切需要解決的問題。闡明水稻響應(yīng)低溫冷害的分子機制,為水稻耐冷性分子育種提供理論基礎(chǔ),對于提高水稻穩(wěn)產(chǎn)具有重要意義。轉(zhuǎn)錄因子針對植物抵抗逆境能力的增強主要是運用對一些基因轉(zhuǎn)錄表達的激活與抑制功能來實現(xiàn)。本研究中,通過前期田間耐冷性鑒定發(fā)現(xiàn)水稻轉(zhuǎn)基因植株NV-ZFP151(轉(zhuǎn)錄增強植物表達載體),NE-ZFP151-1(轉(zhuǎn)錄抑制植物表達載體)和NE-ZFP151-2(轉(zhuǎn)錄抑制植物表達載體)以及水稻品種Kitaake相對耐冷性之間存在表型差異。因此,通過對其生物信息學(xué)、表達模式和生物學(xué)功能等方面的研究,分析水稻C2H2型轉(zhuǎn)錄因子Os ZFP151(Oryza sativa Zinc Finger Protein 151)響應(yīng)抗低溫脅迫的分子機制,為轉(zhuǎn)錄因子在抗冷脅迫中的應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)。1、水稻基因Os ZFP151的生物信息學(xué)分析根據(jù)多重序列比對以及系統(tǒng)進化樹的分析,Os ZFP151和5個同源基因都是C2H2型雙鋅指蛋白,并且在蛋白的N端含有一個序列為KKKKR的核定位信號(NLS)。2、Os ZFP151蛋白亞細...

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮寫詞表
第1章 緒論
    1.1 植物耐低溫脅迫機理的研究進展
        1.1.1 低溫冷害
        1.1.2 植物低溫脅迫的應(yīng)答機制
    1.2 植物C2H2型鋅指蛋白的研究進展
        1.2.1 植物C2H2型鋅指蛋白的結(jié)構(gòu)特征
        1.2.2 植物C2H2型鋅指蛋白的功能
    1.3 合成型轉(zhuǎn)錄因子
    1.4 立題意義與依據(jù)
第2章 水稻OsZFP151基因的生物信息學(xué)分析
    2.1 試驗方法
    2.2 結(jié)果與分析
    2.3 討論
第3章 OsZFP151蛋白亞細胞定位
    3.1 試驗材料
        3.1.1 材料和培養(yǎng)方法
        3.1.2 主要試劑、菌株和溶液配置方法
    3.2 試驗方法
        3.2.1 重組載體pENSG-N-GFP-OsZFP151的構(gòu)建
        3.2.2 擬南芥原生質(zhì)體制備及轉(zhuǎn)化
    3.3 結(jié)果與分析
    3.4 討論
第4章 OsZFP151基因在低溫脅迫下的功能分析
    4.1 試驗材料
        4.1.1 材料
        4.1.2 主要試劑
    4.2 試驗方法
        4.2.1 OsZFP151轉(zhuǎn)基因材料的分子檢測
        4.2.2 OsZFP151基因和與冷脅迫相關(guān)的Marker基因的表達分析
        4.2.3 耐冷性表型分析
        4.2.4 OsZFP151轉(zhuǎn)基因水稻生理指標(biāo)的測定
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 OsZFP151轉(zhuǎn)基因材料的分子檢測
        4.3.2 OsZFP151基因在水稻不同組織中的轉(zhuǎn)錄表達分析
        4.3.3 OsZFP151轉(zhuǎn)基因水稻的耐冷性表型分析
        4.3.4 水稻OsZFP151基因在低溫脅迫下的表達分析
        4.3.5 OsZFP151基因調(diào)控與低溫脅迫相關(guān)Marker基因表達分析
        4.3.6 低溫脅迫下OsZFP151轉(zhuǎn)基因材料的生理生化指標(biāo)分析
    4.4 討論
第5章 OsZFP151互作蛋白的篩選與驗證
    5.1 試驗材料
        5.1.1 材料和主要試劑
        5.1.2 溶液的配置
    5.2 試驗方法
        5.2.1 重組誘餌載體的構(gòu)建
        5.2.2 Y2HGold酵母感受態(tài)細胞的制備與轉(zhuǎn)化
        5.2.3 酵母自激活的驗證
        5.2.4 利用酵母雙雜交系統(tǒng)篩選水稻cDNA文庫
        5.2.5 X-gal顯色分析
        5.2.6 酵母雙雜交試驗
        5.2.7 CPRG液體顯色試驗
        5.2.8 雙分子熒光互補（B FC）試驗
    5.3 結(jié)果與分析
        5.3.1 重組誘餌載體的自激活驗證
        5.3.2 利用酵母雙雜交系統(tǒng)篩庫的結(jié)果
        5.3.3 酵母雙雜交試驗結(jié)果分析
        5.3.4 CPRG液體顯色試驗結(jié)果分析
        5.3.5 BiFC試驗結(jié)果分析
    5.4 討論
第6章 結(jié)論
參考文獻
作者簡介
致謝



本文編號：4017425