低溫脅迫嚴(yán)重干擾水稻的生長(zhǎng)發(fā)育和新陳代謝過(guò)程,由此引發(fā)的水稻減產(chǎn)現(xiàn)象是我國(guó)迫切需要解決的問(wèn)題。闡明水稻響應(yīng)低溫冷害的分子機(jī)制,為水稻耐冷性分子育種提供理論基礎(chǔ),對(duì)于提高水稻穩(wěn)產(chǎn)具有重要意義。轉(zhuǎn)錄因子針對(duì)植物抵抗逆境能力的增強(qiáng)主要是運(yùn)用對(duì)一些基因轉(zhuǎn)錄表達(dá)的激活與抑制功能來(lái)實(shí)現(xiàn)。本研究中,通過(guò)前期田間耐冷性鑒定發(fā)現(xiàn)水稻轉(zhuǎn)基因植株NV-ZFP151(轉(zhuǎn)錄增強(qiáng)植物表達(dá)載體),NE-ZFP151-1(轉(zhuǎn)錄抑制植物表達(dá)載體)和NE-ZFP151-2(轉(zhuǎn)錄抑制植物表達(dá)載體)以及水稻品種Kitaake相對(duì)耐冷性之間存在表型差異。因此,通過(guò)對(duì)其生物信息學(xué)、表達(dá)模式和生物學(xué)功能等方面的研究,分析水稻C2H2型轉(zhuǎn)錄因子Os ZFP151(Oryza sativa Zinc Finger Protein 151)響應(yīng)抗低溫脅迫的分子機(jī)制,為轉(zhuǎn)錄因子在抗冷脅迫中的應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)。1、水稻基因Os ZFP151的生物信息學(xué)分析根據(jù)多重序列比對(duì)以及系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)的分析,Os ZFP151和5個(gè)同源基因都是C2H2型雙鋅指蛋白,并且在蛋白的N端含有一個(gè)序列為KKKKR的核定位信號(hào)(NLS)。2、Os ZFP151蛋白亞細(xì)...

【文章頁(yè)數(shù)】：64 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮寫(xiě)詞表
第1章 緒論
    1.1 植物耐低溫脅迫機(jī)理的研究進(jìn)展
        1.1.1 低溫冷害
        1.1.2 植物低溫脅迫的應(yīng)答機(jī)制
    1.2 植物C2H2型鋅指蛋白的研究進(jìn)展
        1.2.1 植物C2H2型鋅指蛋白的結(jié)構(gòu)特征
        1.2.2 植物C2H2型鋅指蛋白的功能
    1.3 合成型轉(zhuǎn)錄因子
    1.4 立題意義與依據(jù)
第2章 水稻OsZFP151基因的生物信息學(xué)分析
    2.1 試驗(yàn)方法
    2.2 結(jié)果與分析
    2.3 討論
第3章 OsZFP151蛋白亞細(xì)胞定位
    3.1 試驗(yàn)材料
        3.1.1 材料和培養(yǎng)方法
        3.1.2 主要試劑、菌株和溶液配置方法
    3.2 試驗(yàn)方法
        3.2.1 重組載體pENSG-N-GFP-OsZFP151的構(gòu)建
        3.2.2 擬南芥原生質(zhì)體制備及轉(zhuǎn)化
    3.3 結(jié)果與分析
    3.4 討論
第4章 OsZFP151基因在低溫脅迫下的功能分析
    4.1 試驗(yàn)材料
        4.1.1 材料
        4.1.2 主要試劑
    4.2 試驗(yàn)方法
        4.2.1 OsZFP151轉(zhuǎn)基因材料的分子檢測(cè)
        4.2.2 OsZFP151基因和與冷脅迫相關(guān)的Marker基因的表達(dá)分析
        4.2.3 耐冷性表型分析
        4.2.4 OsZFP151轉(zhuǎn)基因水稻生理指標(biāo)的測(cè)定
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 OsZFP151轉(zhuǎn)基因材料的分子檢測(cè)
        4.3.2 OsZFP151基因在水稻不同組織中的轉(zhuǎn)錄表達(dá)分析
        4.3.3 OsZFP151轉(zhuǎn)基因水稻的耐冷性表型分析
        4.3.4 水稻OsZFP151基因在低溫脅迫下的表達(dá)分析
        4.3.5 OsZFP151基因調(diào)控與低溫脅迫相關(guān)Marker基因表達(dá)分析
        4.3.6 低溫脅迫下OsZFP151轉(zhuǎn)基因材料的生理生化指標(biāo)分析
    4.4 討論
第5章 OsZFP151互作蛋白的篩選與驗(yàn)證
    5.1 試驗(yàn)材料
        5.1.1 材料和主要試劑
        5.1.2 溶液的配置
    5.2 試驗(yàn)方法
        5.2.1 重組誘餌載體的構(gòu)建
        5.2.2 Y2HGold酵母感受態(tài)細(xì)胞的制備與轉(zhuǎn)化
        5.2.3 酵母自激活的驗(yàn)證
        5.2.4 利用酵母雙雜交系統(tǒng)篩選水稻cDNA文庫(kù)
        5.2.5 X-gal顯色分析
        5.2.6 酵母雙雜交試驗(yàn)
        5.2.7 CPRG液體顯色試驗(yàn)
        5.2.8 雙分子熒光互補(bǔ)（B FC）試驗(yàn)
    5.3 結(jié)果與分析
        5.3.1 重組誘餌載體的自激活驗(yàn)證
        5.3.2 利用酵母雙雜交系統(tǒng)篩庫(kù)的結(jié)果
        5.3.3 酵母雙雜交試驗(yàn)結(jié)果分析
        5.3.4 CPRG液體顯色試驗(yàn)結(jié)果分析
        5.3.5 BiFC試驗(yàn)結(jié)果分析
    5.4 討論
第6章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)介
致謝



本文編號(hào)：4017425