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棉花酪氨酸蛋白磷酸酶基因GhIBR5的分離及功能分析

發(fā)布時(shí)間:2024-10-05 02:17
  植物與其他多細(xì)胞生物體存在明顯的差異,植物只能依靠高度敏感的應(yīng)答機(jī)制去適應(yīng)環(huán)境的變化,但它不能通過自身的運(yùn)動來躲避惡劣的自然環(huán)境。當(dāng)植物受到各類環(huán)境脅迫傷害之后,會激活一系列錯綜復(fù)雜的防衛(wèi)反應(yīng)來抵御這些逆境脅迫,并調(diào)控相關(guān)基因的表達(dá)。蛋白磷酸酶(protein phosphatase,PP)和蛋白激酶(protein kinase,PK)調(diào)控蛋白質(zhì)的可逆磷酸化,這個(gè)過程在防衛(wèi)反應(yīng)中起到了關(guān)鍵性的作用。作為一種調(diào)控蛋白,蛋白磷酸酶參與植物體內(nèi)逆境脅迫誘導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程。酪氨酸蛋白磷酸酶(protein tyrosine phosphatases,PTPs)作為一類典型的蛋白磷酸酶,已被證實(shí)介入到植物響應(yīng)逆境脅迫的信號過程以及控制生長發(fā)育的許多生理過程。棉花是關(guān)系國計(jì)民生的戰(zhàn)略物資,應(yīng)用分子生物學(xué)方法分離抗逆基因,培育抗逆棉花物種是當(dāng)代農(nóng)業(yè)研究的重要目標(biāo)。本研究中,我們以陸地棉(Gossypium hirsutum L.)(魯棉22)為材料,分離得到了一個(gè)PTPs家族的IBR5基因,并且命名為GhIBR5。我們對該基因進(jìn)行了序列對比分析、蛋白亞細(xì)胞定位、表達(dá)特性分析及生物學(xué)功能鑒定,主要研究...

【文章頁數(shù)】:83 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

圖3-4GhIBR5與同源基因的基因組結(jié)構(gòu)比較

圖3-4GhIBR5與同源基因的基因組結(jié)構(gòu)比較

棉花酪氨酸蛋白磷酸酶基因GhIBR5的分離及功能分析3.2GhIBR5基因組序列的分離及分析為了得到GhIBR5的基因組序列,我們利用擴(kuò)全長的引物CSF和CSR(表1)。以棉花DNA為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增,電泳檢測,結(jié)果處理方法同3.1.1中提到的。....


圖3-14GhIBR5轉(zhuǎn)基因超表達(dá)煙草植株降低了對立枯絲核菌的抗性(A)注射立枯病菌處理5d后,超表達(dá)植株和野生型植株中葉片的表型;(B)A圖中葉片病斑大小的測量

圖3-14GhIBR5轉(zhuǎn)基因超表達(dá)煙草植株降低了對立枯絲核菌的抗性(A)注射立枯病菌處理5d后,超表達(dá)植株和野生型植株中葉片的表型;(B)A圖中葉片病斑大小的測量

棉花酪氨酸蛋白磷酸酶基因GhIBR5的分離及功能分析3.8立枯絲核菌處理后煙草植株的表型分析3.8.1立枯絲核菌侵染后GhIBR5超表達(dá)植株的敏感性增加為了探究GhIBR5基因與生物脅迫之間的聯(lián)系,我們選取了立枯絲核菌作為病原物,探討GhIBR5過表達(dá)株系與立....


圖3-16ROS清除相關(guān)基因的表達(dá)和酶活性分析

圖3-16ROS清除相關(guān)基因的表達(dá)和酶活性分析

棉花酪氨酸蛋白磷酸酶基因GhIBR5的分離及功能分析歧化酶(SOD)。處理之前,這三種抗氧化酶在轉(zhuǎn)基因植株中的活性都略低于野生型,立枯絲核菌處理后,轉(zhuǎn)基因植株中POD的活性要略高于野生型煙草植株(圖3-16B)。以上結(jié)果均可以表明,GhIBR5的超表達(dá)激活了轉(zhuǎn)基因植株....


圖3-19GhIBR5和MAPKs互作的酵母雙雜交分析

圖3-19GhIBR5和MAPKs互作的酵母雙雜交分析

棉花酪氨酸蛋白磷酸酶基因GhIBR5的分離及功能分析IBR5/GhMPK12質(zhì)粒組也能正常生長。為了進(jìn)一步驗(yàn)證質(zhì)粒間的這種互作關(guān)系這些陽性結(jié)果轉(zhuǎn)移到含有X-α-gal和真菌抗生素金擔(dān)子素A(AureobasidinA,缺固體培養(yǎng)基上,結(jié)果發(fā)現(xiàn)菌落生長正常并且菌落為....



本文編號:4007423

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