黃精(Polygonatum sibiricumRed)是我國傳統(tǒng)的藥用植物,為百合科黃精屬多年生草本植物,具有藥食兩用的特性,在藥用、保健品及食用方面均具有較高的經(jīng)濟(jì)價值和開發(fā)潛力。甾體皂苷作為黃精的特征產(chǎn)物,已被證實具有良好的抗腫瘤、抗菌等藥理作用。目前關(guān)于黃精甾體皂苷的研究主要集中在化學(xué)成分的分離和鑒定上,其具體合成途徑和關(guān)鍵酶基因等還不清楚�；诖�,本課題開展的工作如下:1.收集、整理、比較了 14個不同產(chǎn)地的野生黃精種質(zhì),檢測其中皂苷含量,結(jié)果顯示河南洛陽產(chǎn)黃精(3.14 mg/g)和陜西略陽產(chǎn)黃精(9.58 mg/g)中甾體皂苷含量差異顯著,以這兩個產(chǎn)地的黃精為材料進(jìn)行高通量轉(zhuǎn)錄組測序,共得到72.06 Gb Clean Data,Denovo組裝后獲得 74,130 條 Unigene。其中 35,793 條能與 NR、Swiss-Prot、GO、COG、KOG、KEGG、Pfam 等公共數(shù)據(jù)庫匹配,注釋率為 48.28%,成功構(gòu)建了黃精轉(zhuǎn)錄組文庫。2.在黃精轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)中,系統(tǒng)分析參與甾體皂苷生物合成相關(guān)的潛在Unigene。結(jié)果顯示146條Unigene對應(yīng)到黃精甾體皂...

【文章頁數(shù)】：75 頁

【學(xué)位級別】：碩士

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圖２－１轉(zhuǎn)錄組測序?qū)嶒灹鞒虉D??Ｆｉｇ．２－１?Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ?ｆｌｏｗ?ｃｈａｒｔ?ｏｆ?ＲＮＡ－Ｓｅｑ??（４）轉(zhuǎn)錄組測序數(shù)據(jù)分析??在上述平臺測序后所得到的原始數(shù)據(jù)需要進(jìn)行一系列的處理，分別為：原始??數(shù)據(jù)的處理、序列組裝、１）｜１啦１＾功能注釋、１＾詠１＾０００注釋、１＾詠１＾００分??

第２章材料和方法??反應(yīng)中發(fā)生片段自連，還需在平末端片段末端加上Ａ尾。??接接頭并ＰＣＲ富集ＤＮＡ??鏈ｃＤＮＡ兩端連接多重標(biāo)記的接頭后進(jìn)行ＰＣＲ，為了避時循環(huán)數(shù)應(yīng)盡可能小。??測序??Ｉｌｌｕｍｉｎａ測序，該平臺采用獨(dú)特的橋式ＰＣＲ進(jìn)行擴(kuò)增０平臺上的ｆｌｏｗ?ｃｅｌ丨自動延伸和....

圖３－１薯蕷皂苷元對照品溶液的標(biāo)準(zhǔn)曲線??Ｆｉｇ．３－１?Ｓｔａｎｄａｒｄ?ｃｕｒｖｅ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｄｉｏｓｇｅｎｉｎ?ｓｏｌｕｔｉｏｎ??

第３章實驗結(jié)果??轉(zhuǎn)錄組測序樣品篩選??驗采取比色法以薯蕷皂苷元標(biāo)準(zhǔn)品作為對照品進(jìn)行總皂苷含中多糖含量較高，所以使用顯色效果良好，且受糖類成分影酸－高氯酸作為顯色劑［７３，７４］。該法也已成功應(yīng)用于黃精總皂苷曲線及回歸方程??照品的質(zhì)量濃度Ｃ（ｍｇ／ｍＬ）為橫坐標(biāo)，吸光度ＡＢＳ為....

圖３－２不同產(chǎn)地黃精的總皂苷含量??Ｆｉｇ．３－２?Ｔｏｔａｌ?ｓａｐｏｎｉｎｓ?ｃｏｎｔｅｎｔ?ｉｎ?ｔｈｅ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｏｒｉｇｉｎ?ｏｆ?Ｐ．?ｓｉｂｉｒｉｃｕｍ??

陜西師范大學(xué)碩士學(xué)位論文??圖３－２）。各個產(chǎn)地的黃精中總皂苷含量存在差異，其中總皂苷含量最高的是陜西略??陽產(chǎn)黃精（９．５８?ｍｇ／ｇ）約是總皂苷含量最低的河南洛陽產(chǎn)黃精（３．１４?ｍｇ／ｇ）的３倍，經(jīng)??過差異顯著性分析，發(fā)現(xiàn)這兩個產(chǎn)地黃精總皂苷含量存在顯著性差異。??測定陜....

圖３－３黃精根莖、莖和葉中的總皂苷含量??Ｆｉｇ．３－３?Ｔｏｔａｌ?ｓａｐｏｎｉｎｓ?ｃｏｎｔｅｎｔ?ｉｎ?ｔｈｅ?ｔｕｂｅｒ，?ｓｔｅｍ?ａｎｄ?ｌｅａｆ?ｏｆ?Ｐ．?ｓｉｂｉｒｉｃｕｍ??

陜西師范大學(xué)碩士學(xué)位論文??圖３－２）。各個產(chǎn)地的黃精中總皂苷含量存在差異，其中總皂苷含量最高的是陜西略??陽產(chǎn)黃精（９．５８?ｍｇ／ｇ）約是總皂苷含量最低的河南洛陽產(chǎn)黃精（３．１４?ｍｇ／ｇ）的３倍，經(jīng)??過差異顯著性分析，發(fā)現(xiàn)這兩個產(chǎn)地黃精總皂苷含量存在顯著性差異。??測定陜....

本文編號：3941035