籽粒莧AhPPDK原核表達(dá)及AhPEPC啟動(dòng)子遺傳轉(zhuǎn)化研究
【文章頁數(shù)】:65 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
圖3.1PCR擴(kuò)增AhPPDK目的基因M:DL5000DNAMarker;1,2:PCR擴(kuò)增產(chǎn)物
析及原核表達(dá)載體構(gòu)建體pUC-AhPPDK為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增,克隆Ah膠電泳,可見大約3kb的片段(如圖3.1)。將該片段回收,構(gòu)建形成重組質(zhì)粒pEASY-E1-AhPPDK,對(duì)重組質(zhì)粒進(jìn)baⅠ和SacⅠ分別單酶切檢測(cè)(如圖3.2),
圖3.2重組原核表達(dá)載體pEASY-E1-AhPPDK的酶切檢測(cè)M:DL5000DNAMarker;1-3:SacⅠ、XbaⅠ、EcoRⅠ分別單酶切
3.2重組原核表達(dá)載體pEASY-E1-AhPPDK的酶切檢測(cè)000DNAMarker;1-3:SacⅠ、XbaⅠ、EcoRⅠ分別單SY-E1-AhPPDK上,AhPPDK序列上游為6-His測(cè)序結(jié)果表明,6-His-AhPPDK不會(huì)出現(xiàn)移碼原核表達(dá)載體構(gòu)建正確....
圖3.4SDS-PAGE電泳分析pEASY-E1-AhPPDK的表達(dá)情況
圖3.4SDS-PAGE電泳分析pEASY-E1-AhPPDK的表達(dá)情況M:蛋白marker44.3-200KDa;1、2、3分別為AhPPDK基因經(jīng)IPTG誘導(dǎo)6h、4:AhPPDK基因未誘導(dǎo)圖3.5SDS-PAGE電泳分析pEASY-E1....
圖3.5SDS-PAGE電泳分析pEASY-E1-AhPPDK誘導(dǎo)6h的沉淀和上清表達(dá)情況
.5SDS-PAGE電泳分析pEASY-E1-AhPPDK誘導(dǎo)6h的沉marker44.3-200KDa;1、2分別為pEASY-E1-AhPPDK誘酶液磷酸雙激酶的酶活測(cè)定表達(dá)的大腸桿菌的菌液超聲波破碎,收集上清和沉PPDK酶的活性,如表3.2所示,結(jié)....
本文編號(hào):3928837
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