馬鈴薯栽培種(Solanum tuberosum L.)高度雜合,且呈四倍體遺傳,使得該作物科研和育種進(jìn)展緩慢。本研究以自交親和、雜合的二倍體馬鈴薯S.verrucosum(PI 275256)為供體材料,研究了花苞大小與小孢子發(fā)育時(shí)期的對(duì)應(yīng)關(guān)系,不同培養(yǎng)基激素配比對(duì)再生植株誘導(dǎo)率的影響。通過花藥培養(yǎng)獲得了23份再生植株,并對(duì)上述再生植株進(jìn)行倍性鑒定和純合分析。主要結(jié)果如下:1、確定了單核靠邊期對(duì)應(yīng)的花苞大小。單核靠邊期是花藥培養(yǎng)最合適誘導(dǎo)的時(shí)期,當(dāng)PI 275256子代的花苞長度約6.0 mm,花藥長度約4.0 mm,以淺綠色為主時(shí),為該材料的單核靠邊期。2、建立了高效穩(wěn)定的花藥培養(yǎng)體系。以MS培養(yǎng)基為基礎(chǔ),添加不同濃度的NAA、6-BA、KT,共設(shè)計(jì)了11種誘導(dǎo)培養(yǎng)基。研究發(fā)現(xiàn)2 mg/L NAA+1 mg/L 6-BA+0.5 mg/L KT+MS誘導(dǎo)培養(yǎng)基誘導(dǎo)率最高,響應(yīng)率為11.88%。通過花藥培養(yǎng)共獲得了23份再生植株。3、明確了再生植株的倍性。經(jīng)保衛(wèi)細(xì)胞葉綠體計(jì)數(shù)法和流式細(xì)胞術(shù)倍性鑒定,23株再生材料有單倍體17株、二倍體6株。4、初步鑒定了再生植株的純合度。利用位于不同...

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略詞表
一、引言
    1.1 馬鈴薯作為研究材料存在的問題
        1.1.1 栽培馬鈴薯(S.tuberosumL.)作為研究材料存在的問題
        1.1.2 S.verrucosum材料特性
    1.2 獲取馬鈴薯純合體方法的研究進(jìn)展
        1.2.1 連續(xù)自交
        1.2.2 孤雌生殖
        1.2.3 花粉培養(yǎng)
        1.2.4 花藥培養(yǎng)
    1.3 影響花藥培養(yǎng)的因素
        1.3.1 基因型的研究
        1.3.2 小孢子發(fā)育時(shí)期的研究
        1.3.3 供體植株的生理狀態(tài)和生長條件的研究
        1.3.4 預(yù)處理方法的研究
        1.3.5 表面消毒和花藥剝離的研究
        1.3.6 培養(yǎng)基成分的研究
        1.3.7 培養(yǎng)條件的研究
        1.3.8 愈傷組織的分化和植株再生的研究
    1.4 馬鈴薯花藥培養(yǎng)研究進(jìn)展
        1.4.1 S.tuberosum及其它馬鈴薯花藥培養(yǎng)研究進(jìn)展
        1.4.2 S.verrucosum花藥培養(yǎng)研究進(jìn)展
    1.5 研究目的及意義
二、材料與方法
    2.1 試驗(yàn)材料
    2.2 試劑與儀器
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 小孢子發(fā)育時(shí)期的鑒定
        2.3.2 花苞預(yù)處理
        2.3.3 愈傷誘導(dǎo)培養(yǎng)基
        2.3.4 愈傷組織的繼代、分化培養(yǎng)
        2.3.5 再生植株倍性鑒定
        2.3.6 再生植株純合分析
        2.3.7 再生植株親緣關(guān)系鑒定
三.結(jié)果與分析
    3.1 花藥培養(yǎng)獲得再生植株
        3.1.1 花苞大小與花粉發(fā)育時(shí)期的對(duì)應(yīng)關(guān)系
        3.1.2 花藥培養(yǎng)獲得再生苗
        3.1.3 不同激素配比對(duì)花藥愈傷組織誘導(dǎo)的影響
        3.1.4 ZIG培養(yǎng)基誘導(dǎo)再分化
    3.2 再生植株的倍性鑒定
        3.2.1 氣孔保衛(wèi)細(xì)胞葉綠體計(jì)數(shù)法進(jìn)行倍性鑒定
        3.2.2 流式細(xì)胞分析法進(jìn)行倍性分析
    3.3 再生植株的純合分析
        3.3.1 多態(tài)性引物篩選
        3.3.2 純合分析
    3.4 再生植株的親緣關(guān)系鑒定
四.討論
    4.1 花藥培養(yǎng)響應(yīng)率
    4.2 再生植株純合鑒定
五 全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
附錄1 培養(yǎng)基及緩沖液的配方
附錄2 實(shí)驗(yàn)方法及操作
附錄3 SSR引物信息
致謝



本文編號(hào)：3921170