植物NADPH氧化酶又被稱為呼吸爆發(fā)氧化同源蛋白(respiratory burst oxidase homologue,RBOH),它是一類以胞質(zhì)中的NADPH為電子供體,將氧催化生成活性氧(Reactive OxygenSpecies,ROS)的氧化酶,作為植物“氧爆”發(fā)生的主要來源之一,它主要通過調(diào)節(jié)活性氧的產(chǎn)生,在植物生長發(fā)育、逆境脅迫和細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)中發(fā)揮作用。研究表明,植物NADPH氧化酶基因是一個(gè)多基因家族,不同的RBOH基因存在組織分布、基因表達(dá)情況的差異,并且執(zhí)行著不同的功能。本實(shí)驗(yàn)以超強(qiáng)抗寒冬油菜隴油6號和抗寒性較弱的天油2號為材料,分析不同逆境條件下RBOHA/RBOHD基因的表達(dá)模式,研究在低溫和鹽處理?xiàng)l件下,MAP激酶信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑、NADPH氧化酶及H₂O₂產(chǎn)生之間的交互作用和調(diào)控關(guān)系,以期為植物抵御非生物脅迫的作用機(jī)制補(bǔ)充新的理論依據(jù)。主要結(jié)果如下:1、隴油6號和天油2號油菜的RBOHA/RBOHD基因的表達(dá)沒有組織特異性,在兩種油菜的根、莖、葉和下胚軸中均有表達(dá)。2、用不同時(shí)段的低溫(2℃)和鹽(200 mM)以及...

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級別】：碩士

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摘要
Abstract
縮寫詞
第一章 引言
    1.1 植物體內(nèi)的活性氧
        1.1.1 活性氧的產(chǎn)生
        1.1.2 活性氧的清除機(jī)制
        1.1.3 活性氧的作用
    1.2 植物NADPH氧化酶
        1.2.1 植物NADPH氧化酶的結(jié)構(gòu)和研究進(jìn)展
        1.2.2 植物NADPH氧化酶的功能
            1.2.2.1 植物NADPH氧化酶在生物脅迫中的作用
            1.2.2.2 植物NADPH氧化酶在非生物脅迫中的作用
            1.2.2.3 植物NADPH氧化酶在植物生長發(fā)育中的作用
        1.2.3 植物NADPH氧化酶活性的調(diào)節(jié)機(jī)制
    1.3 MPK級聯(lián)系統(tǒng)
        1.3.1 MPK級聯(lián)系統(tǒng)的組成和分類
        1.3.2 MPK級聯(lián)系統(tǒng)和由NADPH氧化酶產(chǎn)生的H2O2的交叉響應(yīng)
    1.4 研究材料背景
    1.5 立題依據(jù)和研究內(nèi)容
        1.5.1 立題依據(jù)
        1.5.2 研究內(nèi)容和技術(shù)路線
第二章 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料和方法
        2.1.1 植物材料處理
        2.1.2 總RNA的提取
        2.1.3 cDNA合成
        2.1.4 實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析
    2.2 油菜生理指標(biāo)的測定
        2.2.1 H₂O₂和·OH的測定方法
        2.2.2 抗氧化酶活性的測定方法
    2.3 試劑和儀器
        2.3.1 主要生化試劑
        2.3.2 主要儀器設(shè)備
        2.3.3 實(shí)時(shí)熒光定量PCR引物的設(shè)計(jì)
    2.4 數(shù)據(jù)分析
第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 逆境脅迫對油菜RBOHA/RBOHD基因表達(dá)的影響
        3.1.1 逆境脅迫對油菜RBOHA基因表達(dá)的影響
        3.1.2 逆境脅迫對油菜RBOHD基因表達(dá)的影響
        3.1.3 DPI、U0126、DMTU預(yù)處理后再經(jīng)鹽和低溫脅迫油菜RBOHA/RBOHD基因的表達(dá)分析
        3.1.4 油菜RBOHA/RBOHD基因的組織特異性表達(dá)分析
    3.2 鹽脅迫下油菜生理指標(biāo)的變化
        3.2.1 鹽脅迫下油菜ROS含量的變化
        3.2.2 鹽脅迫下油菜抗氧化酶活性的變化
        3.2.3 DPI、U0126、DMTU預(yù)處理后再經(jīng)鹽脅迫油菜ROS含量的變化
        3.2.4 DPI、U0126、DMTU預(yù)處理后再經(jīng)鹽脅迫油菜抗氧化酶活性的變化
    3.3 低溫脅迫下油菜生理指標(biāo)的變化
        3.3.1 低溫脅迫下油菜ROS含量的變化
        3.3.2 低溫脅迫下油菜抗氧化酶活性的變化
        3.3.3 DPI、U0126、DMTU預(yù)處理后再經(jīng)低溫脅迫油菜ROS含量的變化
        3.3.4 DPI、U0126、DMTU預(yù)處理后再經(jīng)低溫脅迫油菜抗氧化酶活性的變化
第四章 討論
    4.1 RBOHA/RBOHD基因在逆境脅迫下的表達(dá)分析
    4.2 MPK級聯(lián)途徑參與逆境脅迫下RBOHA/RBOHD基因的表達(dá)
    4.3 MPK級聯(lián)途徑參與ROS的產(chǎn)生和清除
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士期間發(fā)表論文情況
致謝



本文編號：3838358