栽培一粒小麥C末端區(qū)域帶有提前終止密碼子的高分子量谷蛋白亞基1Ay的表達鑒定
發(fā)布時間:2023-05-20 10:04
小麥屬及其近緣物種中蘊藏著豐富且可利用的優(yōu)良基因,這些基因不僅可以改進小麥遺傳基礎還能在提高小麥品質中發(fā)揮重要作用。栽培一粒小麥(Triticum monococcum L.ssp.monococcum,AmAm,2n = 2x = 14)是普通小麥的二級基因源,是小麥的重要基礎物種。高分子量谷蛋白亞基(HMW-GS)是小麥重要的儲藏蛋白,其組成和數量在小麥加工品質中起著重要的作用。然而1Ay亞基在普通小麥中通常是沉默的,但是在四倍體小麥和二倍體小麥中通常是表達的。提前終止密碼子在沉默的1Ay亞基中扮演著重要的角色。本研究通過SDS-PAGE分析、目的基因克隆、3’-RACE、原核表達、MALDI-TOF質譜分析、原生質體瞬時表達等方法對栽培一粒小麥10-1可表達的1Ay8.3亞基的表達進行了研究,主要結果如下:1.SDS-PAGE分析結果表明,栽培一粒小麥10-1的y-型高分子量谷蛋白亞基的電泳遷移率介于普通小麥地方品種“中國春”的1Bx7和1By8之間,依據電泳遷移率的大小將該亞基命名1Ay8.3。2.栽培一粒小麥10-1的y-型高分子量谷蛋白亞基1Ay8.3的編碼基因(GenBa...
【文章頁數】:61 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
1 文獻綜述
1.1 小麥加工品質與小麥種子貯藏蛋白
1.2 高分子量谷蛋白亞基
1.3 HMW-GS亞基的染色體定位和命名
1.4 HMW-GS的結構特征
1.5 HMW-GS與小麥加工品質的關系
1.6 小麥HMW-GS 1Ay亞基的研究進展
1.7 栽培一粒小麥高分子量谷蛋白1Ay亞基研究進展
1.7.1 栽培一粒小麥
1.7.2 栽培一粒小麥1Ay亞基的研究進展
1.8 立題依據
2 材料與方法
2.1 材料
2.2 方法
2.2.1 種子蛋白提取
2.2.2 SDS-PAGE分析
2.2.3 1Ay基因克隆
2.2.4 3'-RACE技術
2.2.5 1Ay基因的體外表達
2.2.6 1Ay基因的定點突變
2.2.7 質譜分析
2.2.8 1Ay基因葉片原生質體的瞬時表達
3 結果與分析
3.1 SDS-PAGE分析
3.2 1Ay8.3亞基的分子克隆及序列比對分析
3.3 1Ay8.3亞基的轉錄水平分析
3.4 1Ay8.3亞基的體外表達
3.5 表達蛋白的質譜鑒定分析
3.6 1Ay8.3基因體內的瞬時表達
4 討論
5 總結
參考文獻
致謝
碩士期間發(fā)表的文章
本文編號:3820921
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【學位級別】:碩士
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摘要
abstract
1 文獻綜述
1.1 小麥加工品質與小麥種子貯藏蛋白
1.2 高分子量谷蛋白亞基
1.3 HMW-GS亞基的染色體定位和命名
1.4 HMW-GS的結構特征
1.5 HMW-GS與小麥加工品質的關系
1.6 小麥HMW-GS 1Ay亞基的研究進展
1.7 栽培一粒小麥高分子量谷蛋白1Ay亞基研究進展
1.7.1 栽培一粒小麥
1.7.2 栽培一粒小麥1Ay亞基的研究進展
1.8 立題依據
2 材料與方法
2.1 材料
2.2 方法
2.2.1 種子蛋白提取
2.2.2 SDS-PAGE分析
2.2.3 1Ay基因克隆
2.2.4 3'-RACE技術
2.2.5 1Ay基因的體外表達
2.2.6 1Ay基因的定點突變
2.2.7 質譜分析
2.2.8 1Ay基因葉片原生質體的瞬時表達
3 結果與分析
3.1 SDS-PAGE分析
3.2 1Ay8.3亞基的分子克隆及序列比對分析
3.3 1Ay8.3亞基的轉錄水平分析
3.4 1Ay8.3亞基的體外表達
3.5 表達蛋白的質譜鑒定分析
3.6 1Ay8.3基因體內的瞬時表達
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