小麥屬及其近緣物種中蘊(yùn)藏著豐富且可利用的優(yōu)良基因,這些基因不僅可以改進(jìn)小麥遺傳基礎(chǔ)還能在提高小麥品質(zhì)中發(fā)揮重要作用。栽培一粒小麥(Triticum monococcum L.ssp.monococcum,AmAm,2n = 2x = 14)是普通小麥的二級(jí)基因源,是小麥的重要基礎(chǔ)物種。高分子量谷蛋白亞基(HMW-GS)是小麥重要的儲(chǔ)藏蛋白,其組成和數(shù)量在小麥加工品質(zhì)中起著重要的作用。然而1Ay亞基在普通小麥中通常是沉默的,但是在四倍體小麥和二倍體小麥中通常是表達(dá)的。提前終止密碼子在沉默的1Ay亞基中扮演著重要的角色。本研究通過(guò)SDS-PAGE分析、目的基因克隆、3’-RACE、原核表達(dá)、MALDI-TOF質(zhì)譜分析、原生質(zhì)體瞬時(shí)表達(dá)等方法對(duì)栽培一粒小麥10-1可表達(dá)的1Ay8.3亞基的表達(dá)進(jìn)行了研究,主要結(jié)果如下:1.SDS-PAGE分析結(jié)果表明,栽培一粒小麥10-1的y-型高分子量谷蛋白亞基的電泳遷移率介于普通小麥地方品種“中國(guó)春”的1Bx7和1By8之間,依據(jù)電泳遷移率的大小將該亞基命名1Ay8.3。2.栽培一粒小麥10-1的y-型高分子量谷蛋白亞基1Ay8.3的編碼基因(GenBa...

【文章頁(yè)數(shù)】：61 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
1 文獻(xiàn)綜述
    1.1 小麥加工品質(zhì)與小麥種子貯藏蛋白
    1.2 高分子量谷蛋白亞基
    1.3 HMW-GS亞基的染色體定位和命名
    1.4 HMW-GS的結(jié)構(gòu)特征
    1.5 HMW-GS與小麥加工品質(zhì)的關(guān)系
    1.6 小麥HMW-GS 1Ay亞基的研究進(jìn)展
    1.7 栽培一粒小麥高分子量谷蛋白1Ay亞基研究進(jìn)展
        1.7.1 栽培一粒小麥
        1.7.2 栽培一粒小麥1Ay亞基的研究進(jìn)展
    1.8 立題依據(jù)
2 材料與方法
    2.1 材料
    2.2 方法
        2.2.1 種子蛋白提取
        2.2.2 SDS-PAGE分析
        2.2.3 1Ay基因克隆
        2.2.4 3'-RACE技術(shù)
        2.2.5 1Ay基因的體外表達(dá)
        2.2.6 1Ay基因的定點(diǎn)突變
        2.2.7 質(zhì)譜分析
        2.2.8 1Ay基因葉片原生質(zhì)體的瞬時(shí)表達(dá)
3 結(jié)果與分析
    3.1 SDS-PAGE分析
    3.2 1Ay8.3亞基的分子克隆及序列比對(duì)分析
    3.3 1Ay8.3亞基的轉(zhuǎn)錄水平分析
    3.4 1Ay8.3亞基的體外表達(dá)
    3.5 表達(dá)蛋白的質(zhì)譜鑒定分析
    3.6 1Ay8.3基因體內(nèi)的瞬時(shí)表達(dá)
4 討論
5 總結(jié)
參考文獻(xiàn)
致謝
碩士期間發(fā)表的文章



本文編號(hào)：3820921