發(fā)布時(shí)間：2022-11-10 21:38

　　靈芝是具有廣闊應(yīng)用前景的藥用原材料,其關(guān)鍵活性成分三萜化合物具有重要藥理作用。但靈芝細(xì)胞中三萜含量和產(chǎn)量均較低,限制了其規(guī)�；瘧�(yīng)用。本論文采用液體深層發(fā)酵（細(xì)胞培養(yǎng)）技術(shù),研究了外源誘導(dǎo)子薏苡仁油對(duì)靈芝深層發(fā)酵過程中三萜合成的影響,發(fā)現(xiàn)適宜濃度的薏苡仁油可顯著提高靈芝三萜的合成量和產(chǎn)量;進(jìn)一步從信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的角度分析了薏苡仁油誘導(dǎo)靈芝三萜合成的基本作用機(jī)制。主要研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下:1.誘導(dǎo)子（薏苡仁油）在1.5g/L濃度下,可顯著促進(jìn)靈芝菌絲體生長和靈芝三萜的合成量,且誘導(dǎo)子在菌絲體細(xì)胞指數(shù)生長末期到穩(wěn)定期早期加入表現(xiàn)最為敏感,這種作用可在較長時(shí)間內(nèi)誘導(dǎo)靈芝菌絲體細(xì)胞產(chǎn)次級(jí)代謝產(chǎn)物。2.添加薏苡仁油可有效誘導(dǎo)靈芝細(xì)胞中NO濃度、PAL活性和CYP450含.量的增加,且NO可以作為PAL活化和CYP450產(chǎn)生的上游信號(hào)分子起作用,它是薏苡仁油誘導(dǎo)靈芝菌絲體細(xì)胞中PAL活化和CYP450產(chǎn)生信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、靈芝三萜合成積累途徑中必定產(chǎn)生、但不是唯一的信號(hào)分子。3.H2O2位于PAL活化和CYP450產(chǎn)生的上游,薏苡仁油誘導(dǎo)靈芝三萜合成通過H2O2所介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑,但H2O2途徑并不是薏苡仁油誘導(dǎo)... 

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
1 研究背景
    1.1 微生物深層發(fā)酵生產(chǎn)次生代謝產(chǎn)物的研究現(xiàn)狀
    1.2 微生物細(xì)胞次生代謝產(chǎn)物合成調(diào)控研究現(xiàn)狀
        1.2.1 營養(yǎng)物質(zhì)對(duì)代謝產(chǎn)物的影響
        1.2.2 前體物質(zhì)的添加對(duì)次生代謝的影響
        1.2.3 環(huán)境因素對(duì)次生代謝的影響
        1.2.4 誘導(dǎo)子對(duì)次生代謝的影響
    1.3 NO和H_2O_2對(duì)微生物細(xì)胞次生代謝產(chǎn)物合成的作用
        1.3.1 NO和H_2O_2產(chǎn)生的途徑及生理功能
        1.3.2 NO和H_2O_2的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制及相互作用
    1.4 靈芝三萜的結(jié)構(gòu)、種類、代謝物產(chǎn)生途徑、誘導(dǎo)子的調(diào)節(jié)及其藥理作用
        1.4.1 靈芝三萜的結(jié)構(gòu)及種類
        1.4.2 靈芝三萜的代謝物產(chǎn)生途徑
        1.4.3 靈芝三萜合成的誘導(dǎo)調(diào)節(jié)
        1.4.4 靈芝三萜的生理作用
    1.5 論文選題目的和意義
2 薏苡仁油誘導(dǎo)靈芝菌絲體合成靈芝三萜
    2.1 引言
    2.2 材料和方法
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.2.3 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.2.4 實(shí)驗(yàn)方法
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 熊果酸標(biāo)準(zhǔn)曲線制作
        2.3.2 靈芝菌絲體細(xì)胞生長曲線
        2.3.3 薏苡仁油對(duì)靈芝菌絲體細(xì)胞生長的影響
        2.3.4 薏苡仁油對(duì)靈芝三萜含量的影響
    2.4 結(jié)論與討論
3 NO介導(dǎo)薏苡仁油誘導(dǎo)靈芝三萜合成的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)
    3.1 引言
    3.2 材料和方法
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        3.2.3 實(shí)驗(yàn)儀器
        3.2.4 誘導(dǎo)及處理方法
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 NaNO_2標(biāo)準(zhǔn)曲線
        3.3.2 牛血清蛋白標(biāo)準(zhǔn)曲線
        3.3.3 薏苡仁油誘導(dǎo)細(xì)胞中NO釋放、PAL活化及CYP450產(chǎn)生
        3.3.4 NO是薏苡仁油誘發(fā)PAL活化及CYP450產(chǎn)生的上游信號(hào)
        3.3.5 SNP對(duì)PAL活性和CYP450含量的影響
        3.3.6 cPITO和L-NNA對(duì)薏苡仁油誘導(dǎo)細(xì)胞合成靈芝三萜的影響
    3.4 結(jié)論與討論
4 H_2O_2介導(dǎo)薏苡仁油誘導(dǎo)靈芝三萜合成的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)
    4.1 引言
    4.2 材料與方法
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        4.2.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        4.2.3 實(shí)驗(yàn)儀器
        4.2.4 誘導(dǎo)及處理方法
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 過氧化氫標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制
        4.3.2 薏苡仁油誘發(fā)細(xì)胞中H_2O_2釋放、PAL活化和CYP450產(chǎn)生
        4.3.3 H_2O_2對(duì)PAL活化和CYP450產(chǎn)生的作用
        4.3.4 薏苡仁油誘導(dǎo)下PAL活性和CYP450含量對(duì)H_2O_2濃度的依賴性
    4.4 結(jié)論與討論
5 NO和H_2O_2在薏苡仁油誘導(dǎo)靈芝三萜生物合成過程中的相互作用
    5.1 引言
    5.2 材料和方法
        5.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        5.2.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        5.2.3 實(shí)驗(yàn)儀器
        5.2.4 誘導(dǎo)及處理方法:
    5.3 結(jié)果與分析
        5.3.1 H_2O_2在介導(dǎo)薏苡仁油誘導(dǎo)靈芝三萜合成過程對(duì)NO的依賴性
        5.3.2 NO在介導(dǎo)薏苡仁油誘導(dǎo)靈芝三萜合成過程對(duì)H_2O_2的依賴性
        5.3.3 H_2O_2與NO通過獨(dú)立途徑介導(dǎo)薏苡仁油誘導(dǎo)靈芝三萜的生物合成
    5.4 結(jié)論和討論
6 主要結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄 攻讀學(xué)位期間的主要學(xué)術(shù)成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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