近年來,我國茶園干旱災(zāi)害頻發(fā),對茶葉生產(chǎn)造成不良影響,研究茶樹如何響應(yīng)干旱脅迫很有必要。生長素是重要的植物激素,越來越多的研究表明其參與植物干旱脅迫響應(yīng),而生長素響應(yīng)因子作為生長素信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中重要的轉(zhuǎn)錄因子,研究其是否在茶樹干旱脅迫響應(yīng)過程發(fā)揮作用以及發(fā)揮何種作用具有重要意義。本研究基于茶樹基因組和轉(zhuǎn)錄組測序結(jié)果,克隆獲得茶樹生長素響應(yīng)因子CsARF8-2的cDNA和啟動子序列,預(yù)測編碼的氨基酸序列,并對其進(jìn)行生物信息學(xué)分析。對龍井43等4個品種兩年生盆栽扦插茶苗進(jìn)行自然干旱處理,通過測定自然干旱脅迫后茶樹葉片相對含水量、丙二醛含量、抗氧化物酶活性、凈光合速率和色素含量,利用耐旱性隸屬函數(shù)值分析法比較品種間耐旱性關(guān)系,分析CsARF8-2在干旱脅迫后的表達(dá)模式。利用實時熒光定量PCR和組織化學(xué)染色法分析CsARF8-2的組織特異性表達(dá)。通過觀察GFP熒光確定CsARF8-2的亞細(xì)胞定位。借助在模式植物擬南芥中過表達(dá)CsARF8-2進(jìn)行功能驗證。主要研究結(jié)果如下:1.克隆并測序獲得茶樹CsARF8-2基因cDNA和啟動子序列,生物信息學(xué)分析結(jié)果表明,開放閱讀框長度為2496 bp,編碼... 

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 引言
    1.1 干旱脅迫對茶樹的影響
        1.1.1 形態(tài)學(xué)變化
        1.1.2 生理響應(yīng)
    1.2 生長素響應(yīng)因子研究進(jìn)展
        1.2.1 生長素響應(yīng)因子的結(jié)構(gòu)
        1.2.2 生長素響應(yīng)因子轉(zhuǎn)錄后調(diào)控
        1.2.3 生長素響應(yīng)因子的時空表達(dá)模式與功能
        1.2.4 生長素響應(yīng)因子的作用機(jī)制
    1.3 生長素響應(yīng)因子與植物干旱脅迫的研究進(jìn)展
    1.4 研究目的與內(nèi)容
        1.4.1 研究目的和意義
        1.4.2 研究內(nèi)容
        1.4.3 技術(shù)路線
第二章 茶樹CsARF8-2基因克隆與生物信息學(xué)分析
    2.1 材料與方法
        2.1.1 材料與試劑
        2.1.2 CsARF8-2cDNA序列擴(kuò)增
        2.1.3 CsARF8-2基因啟動子克隆
        2.1.4 生物信息學(xué)分析
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 CsARF8-2基因克隆
        2.2.2 生物信息學(xué)分析
    2.3 討論
第三章 CsARF8-2基因?qū)?個茶樹品種自然干旱脅迫的響應(yīng)
    3.1 材料與方法
        3.1.1 試驗材料與處理
        3.1.2 生理指標(biāo)測定
        3.1.3 耐旱性隸屬函數(shù)值分析
        3.1.4 CsARF8-2表達(dá)模式分析
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 植株形態(tài)變化
        3.2.2 生理響應(yīng)
        3.2.3 耐旱性隸屬函數(shù)分析
        3.2.4 CsARF8-2在自然干旱脅迫下的表達(dá)模式分析
    3.3 討論
第四章 茶樹CsARF8-2功能初步分析
    4.1 材料與方法
        4.1.1 試驗材料與試劑
        4.1.2 實時熒光定量PCR
        4.1.3 GUS染色
        4.1.4 GFP熒光觀察
        4.1.5 過表達(dá)CsARF8-2擬南芥ABA與干旱處理
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 CsARF8-2組織特異性表達(dá)分析
        4.2.2 亞細(xì)胞定位分析
        4.2.3 過表達(dá)CsARF8-2擬南芥表型分析
    4.3 討論
        4.3.1 組織特異性表達(dá)分析
        4.3.2 亞細(xì)胞定位分析
        4.3.3 過表達(dá)CsARF8-2擬南芥表型分析
第五章 全文結(jié)論與展望
    5.1 全文結(jié)論
    5.2 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡歷



本文編號：3665267