玉米（Zeamay L.）作為重要的糧食作物和飼料加工原料,其產(chǎn)量和品質(zhì)受到病蟲害和雜草的影響逐漸下降,而抗蟲抗除草劑轉(zhuǎn)基因玉米可以有效地提高害蟲和雜草防治效率,降低生產(chǎn)成本。本研究主要通過對(duì)本實(shí)驗(yàn)室自主研發(fā)的一種抗蟲抗除草劑性狀玉米ZD12-6進(jìn)行檢測(cè)分析和功能評(píng)價(jià)。該轉(zhuǎn)基因玉米含有Bt（Bacillus thuringiensis）抗蟲基因cry Ab/cry2Aj和抗草甘膦基因G10evo-epsps,其中抗蟲基因是由cry1Ab和cry2Aj兩個(gè)基因融合而成,以擴(kuò)大殺蟲譜的范圍,G10evo-epsps是一種新的抗草甘膦基因,具有很強(qiáng)的抗草甘膦活性。本研究對(duì)ZD12-6進(jìn)行室內(nèi)和田間試驗(yàn),以檢測(cè)和評(píng)估該玉米的昆蟲抗性和草甘膦耐受性以及目的基因表達(dá)情況。利用westernblot檢測(cè)出在玉米的葉片、雌穗、苞葉、雄穗和花絲中均有Cry1Ab/Cry2Aj蛋白和G10evo-EPSPS蛋白的表達(dá);酶聯(lián)免疫法定量分析ZD12-6不同組織的基因表達(dá)量情況,結(jié)果顯示,心葉中表達(dá)的Cry1Ab/Cry2Aj蛋白和G1Oevo-EPSPS蛋白的量是相對(duì)最多的,分別為17.8μg/g和11.2μ... 

【文章來源】：浙江大學(xué)浙江省211工程院校985工程院校教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
致謝
摘要
Abstract
1 文獻(xiàn)綜述
    1.1 轉(zhuǎn)基因玉米的研究現(xiàn)狀
    1.2 全球轉(zhuǎn)基因作物的研究進(jìn)展
    1.3 轉(zhuǎn)基因抗蟲玉米的發(fā)展進(jìn)程
        1.3.1 殺蟲晶體蛋白
        1.3.2 Cry蛋白的分類
        1.3.3 Cry蛋白的結(jié)構(gòu)
        1.3.4 Cry蛋白的殺蟲機(jī)理
        1.3.5 昆蟲對(duì)Cry蛋白的抗性
        1.3.6 抗性治理策略
    1.4 轉(zhuǎn)基因抗草甘膦作物研究進(jìn)展及應(yīng)用
        1.4.1 轉(zhuǎn)基因抗草甘膦作物的研究現(xiàn)狀
        1.4.2 草甘膦的作用機(jī)制
        1.4.3 抗草甘膦轉(zhuǎn)基因作物的抗性機(jī)制
    1.5 轉(zhuǎn)基因玉米的安全性評(píng)價(jià)
    1.6 本研究的目的和意義
2 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 植物材料
        2.1.2 常用試劑、試劑盒
        2.1.3 各種溶液及培養(yǎng)基的配制
        2.1.4 常用儀器
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 Western blot印跡檢測(cè)
        2.2.2 原核表達(dá)的蛋白樣品制備
        2.2.3 Cry1Ab和EPSPS ELISA定量測(cè)定
        2.2.4 室內(nèi)殺蟲活性測(cè)定
        2.2.5 轉(zhuǎn)基因玉米溫室草甘膦抗性測(cè)定
        2.2.6 田間草甘膦耐受性測(cè)定
        2.2.7 大田接蟲試驗(yàn)
3 結(jié)果與分析
    3.1 ZD12-6目的基因蛋白表達(dá)分析
        3.1.1 Western blot分析
        3.1.2 ELISA測(cè)定結(jié)果分析
    3.2 ZD12-6室內(nèi)昆蟲生測(cè)結(jié)果分析
        3.2.1 棉鈴蟲生測(cè)結(jié)果分析
        3.2.2 亞洲玉米螟生測(cè)結(jié)果分析
        3.2.3 黏蟲生測(cè)結(jié)果分析
    3.3 ZD12-6溫室草甘膦抗藥性測(cè)定結(jié)果分析
    3.4 ZD12-6田間草甘膦抗藥性測(cè)定結(jié)果分析
    3.5 ZD12-6大田抗蟲性測(cè)試分析
4 討論
參考文獻(xiàn)
附錄A
附錄B


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]轉(zhuǎn)cry1Ac玉米對(duì)亞洲玉米螟的抗性評(píng)價(jià)[J]. 王培,何康來,王振營,王應(yīng)倫.  植物保護(hù)學(xué)報(bào). 2012(05)
[2]轉(zhuǎn)cry1Ab基因玉米對(duì)粘蟲的抗性評(píng)價(jià)[J]. 常雪,常雪艷,何康來,王振營,白樹雄.  植物保護(hù)學(xué)報(bào). 2007(03)



本文編號(hào)：3645213