發(fā)布時間：2022-02-27 09:35

　　玉米（Zeamay L.）作為重要的糧食作物和飼料加工原料,其產(chǎn)量和品質(zhì)受到病蟲害和雜草的影響逐漸下降,而抗蟲抗除草劑轉(zhuǎn)基因玉米可以有效地提高害蟲和雜草防治效率,降低生產(chǎn)成本。本研究主要通過對本實驗室自主研發(fā)的一種抗蟲抗除草劑性狀玉米ZD12-6進行檢測分析和功能評價。該轉(zhuǎn)基因玉米含有Bt（Bacillus thuringiensis）抗蟲基因cry Ab/cry2Aj和抗草甘膦基因G10evo-epsps,其中抗蟲基因是由cry1Ab和cry2Aj兩個基因融合而成,以擴大殺蟲譜的范圍,G10evo-epsps是一種新的抗草甘膦基因,具有很強的抗草甘膦活性。本研究對ZD12-6進行室內(nèi)和田間試驗,以檢測和評估該玉米的昆蟲抗性和草甘膦耐受性以及目的基因表達情況。利用westernblot檢測出在玉米的葉片、雌穗、苞葉、雄穗和花絲中均有Cry1Ab/Cry2Aj蛋白和G10evo-EPSPS蛋白的表達;酶聯(lián)免疫法定量分析ZD12-6不同組織的基因表達量情況,結(jié)果顯示,心葉中表達的Cry1Ab/Cry2Aj蛋白和G1Oevo-EPSPS蛋白的量是相對最多的,分別為17.8μg/g和11.2μ... 

【文章來源】：浙江大學(xué)浙江省211工程院校985工程院校教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
致謝
摘要
Abstract
1 文獻綜述
    1.1 轉(zhuǎn)基因玉米的研究現(xiàn)狀
    1.2 全球轉(zhuǎn)基因作物的研究進展
    1.3 轉(zhuǎn)基因抗蟲玉米的發(fā)展進程
        1.3.1 殺蟲晶體蛋白
        1.3.2 Cry蛋白的分類
        1.3.3 Cry蛋白的結(jié)構(gòu)
        1.3.4 Cry蛋白的殺蟲機理
        1.3.5 昆蟲對Cry蛋白的抗性
        1.3.6 抗性治理策略
    1.4 轉(zhuǎn)基因抗草甘膦作物研究進展及應(yīng)用
        1.4.1 轉(zhuǎn)基因抗草甘膦作物的研究現(xiàn)狀
        1.4.2 草甘膦的作用機制
        1.4.3 抗草甘膦轉(zhuǎn)基因作物的抗性機制
    1.5 轉(zhuǎn)基因玉米的安全性評價
    1.6 本研究的目的和意義
2 材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 植物材料
        2.1.2 常用試劑、試劑盒
        2.1.3 各種溶液及培養(yǎng)基的配制
        2.1.4 常用儀器
    2.2 實驗方法
        2.2.1 Western blot印跡檢測
        2.2.2 原核表達的蛋白樣品制備
        2.2.3 Cry1Ab和EPSPS ELISA定量測定
        2.2.4 室內(nèi)殺蟲活性測定
        2.2.5 轉(zhuǎn)基因玉米溫室草甘膦抗性測定
        2.2.6 田間草甘膦耐受性測定
        2.2.7 大田接蟲試驗
3 結(jié)果與分析
    3.1 ZD12-6目的基因蛋白表達分析
        3.1.1 Western blot分析
        3.1.2 ELISA測定結(jié)果分析
    3.2 ZD12-6室內(nèi)昆蟲生測結(jié)果分析
        3.2.1 棉鈴蟲生測結(jié)果分析
        3.2.2 亞洲玉米螟生測結(jié)果分析
        3.2.3 黏蟲生測結(jié)果分析
    3.3 ZD12-6溫室草甘膦抗藥性測定結(jié)果分析
    3.4 ZD12-6田間草甘膦抗藥性測定結(jié)果分析
    3.5 ZD12-6大田抗蟲性測試分析
4 討論
參考文獻
附錄A
附錄B


【參考文獻】：
期刊論文
[1]轉(zhuǎn)cry1Ac玉米對亞洲玉米螟的抗性評價[J]. 王培,何康來,王振營,王應(yīng)倫.  植物保護學(xué)報. 2012(05)
[2]轉(zhuǎn)cry1Ab基因玉米對粘蟲的抗性評價[J]. 常雪,常雪艷,何康來,王振營,白樹雄.  植物保護學(xué)報. 2007(03)



本文編號：3645213