蛋白質(zhì)中天冬氨酸和天冬酰胺自發(fā)形成的異構天冬氨酸殘基是組織細胞中常見的蛋白質(zhì)共價損傷.在前人的研究中, PIMT1介導的種子壽命提高,很可能是由于修復了種胚中因老化處理而過量累積的含異構天冬氨酸（isoaspartyl, isoAsp）蛋白,維持了種胚的活性.然而,異構天冬氨酸蛋白甲基轉移酶（protein L-isoaspartyl methyltransferase, PIMT）對于水稻種子活力的作用機制,仍然不甚明確.本研究利用RNAi干擾技術獲得了穩(wěn)定的OsPIMT1的低表達株系.種子經(jīng)人工老化后,結果表明OsPIMT1的低表達影響種子發(fā)芽活力.隨后對種胚中含異構天冬氨酸的蛋白進行動態(tài)檢測,結果顯示在未吸脹和吸脹過后的種子中,種胚中的OsPIMT1的表達都能降低isoAsp的累積.而RNAi株系中OsPIMT1的低表達導致isoAsp的過度積累,進而影響種子活力.同時利用老化5 d后的水稻種胚蛋白進行雙向電泳,分析RNAi干擾種子老化過程中異構天冬氨酸過度積累對于種胚蛋白的影響,鑒定到與種子老化相關的氧化脅迫相關蛋白、糖酵解以及熱激蛋白分子伴侶等蛋白.為進一步研究OsPIMT1... 

【文章來源】：科學通報. 2020,65(Z1)北大核心EICSCD

【文章頁數(shù)】：11 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 OsPIMT1干擾轉基因材料的創(chuàng)制
    1.2 轉基因材料的分子檢測
    1.3 種子老化處理
    1.4 isoAsp含量的液相色譜分析
    1.5 水稻種胚總蛋白提取的優(yōu)化
    1.6 雙向電泳與生物信息學分析
2 結果
    2.1 RNAi株系分子檢測與老化分析
    2.2 OsPIMT1干擾植株的異構天冬氨酸定量分析
    2.3 種胚蛋白的雙向電泳分析
    2.4 差異蛋白的GO與KEGG分析
3 討論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]Proteomic analysis of blast-resistant near-isogenic lines derived from japonica rice, var. Yunyin, infected with Magnaporthe oryzae[J]. Weimin Xue,Xiaohui Mao,Yidong Wei,Lian Ling,Yongsheng Zhu,Shuilin He,Jianfu Zhang,Huaan Xie.  Chinese Science Bulletin. 2014(32)
[2]水稻種子人工老化與自然老化的分析比較[J]. 許惠濱,魏毅東,連玲,朱永生,謝華安,王宗華,張建福.  分子植物育種. 2013(05)
[3]稻谷儲藏特性及其與秈粳特性的關系研究[J]. 曾大力,錢前,國廣泰史,滕勝,藤本寬.  作物學報. 2002(04)

碩士論文
[1]水稻耐貯藏種質(zhì)的篩選及遺傳育種研究[D]. 曾大力.中國農(nóng)業(yè)科學院 2002



本文編號：3644555