水稻水浸狀葉片突變體wss1的性狀分析及分子標(biāo)記定位
發(fā)布時(shí)間:2022-02-25 06:04
水稻(Oryza.sativa)作為全世界上最重要的糧食作物之一,是全球半數(shù)以上的人口食物的主要來源,在糧食生產(chǎn)中占據(jù)重要地位。本實(shí)驗(yàn)室在篩選EMS處理的JG30突變體庫時(shí),發(fā)現(xiàn)了一個(gè)在分蘗盛期部分葉片表現(xiàn)出水浸狀,至孕穗期水浸狀葉片枯死的突變體,命名為wss1。本文對水稻水浸狀突變體wss1進(jìn)行了較系統(tǒng)的研究,獲得了如下結(jié)果:1.通過農(nóng)藝性狀考查,水浸狀突變體wss1與野生型相比株高降低30%、結(jié)實(shí)率降低22%、穗粒數(shù)減少50%、葉片早衰,粒形與千粒重未發(fā)生明顯變化。2.通過光學(xué)顯微鏡觀察突變體水浸狀葉片與JG30葉片的表皮細(xì)胞,水浸狀突變體wss1與野生型相比下表皮細(xì)胞形狀發(fā)生變化,細(xì)胞排列變的不規(guī)則、細(xì)胞膜被破壞、液泡解體。3.用白葉枯病菌PXO99A對野生型與突變體進(jìn)行接種鑒定,接種15天時(shí)觀察,發(fā)現(xiàn)與野生型相比突變體wss1的病斑長度更長。4.將wss1突變體與02428雜交,構(gòu)建F2分離群體,遺傳分析表明水浸狀性狀由隱性基因控制。5.根據(jù)JG30與02428重測序的結(jié)果,在水稻12條染色體上開發(fā)了240對InDel標(biāo)記。6.運(yùn)用分...
【文章來源】:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市
【文章頁數(shù)】:57 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
英文縮略表
第一章 引言
1.1 植物細(xì)胞膜系統(tǒng)
1.2 植物逆境生理
1.2.1 植物響應(yīng)非生物逆境脅迫的研究進(jìn)展
1.2.2 與Ca~(2+)偶聯(lián)的CDPK和SOS信號(hào)傳導(dǎo)途徑
1.2.3 與Ca~(2+)信號(hào)無關(guān)的的MAPK信號(hào)傳遞途徑
1.2.4 依賴ABA的信號(hào)傳導(dǎo)途徑
1.2.5 植物不依賴ABA的信號(hào)傳導(dǎo)途徑
1.2.6 與非生物逆境脅迫應(yīng)答相關(guān)的基因產(chǎn)物
1.3 表觀遺傳學(xué)
1.3.1 表觀遺傳學(xué)定義
1.3.2 甲基化
1.3.3 組蛋白修飾
1.4 分子標(biāo)記
1.4.1 簡單重復(fù)序列(SSR)
1.4.2 單核苷酸多態(tài)(SNP)
1.4.3 限制性片斷長度多態(tài)性(RFLP)
1.4.4 隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA(RAPD)
1.4.5 擴(kuò)增片段長度多態(tài)性(AFLP)
1.4.6 表達(dá)序列標(biāo)簽(EST)及EST-SSR
1.4.7 序列標(biāo)簽位點(diǎn)(STS)
1.4.8 插入/缺失分子標(biāo)記(InDel)
1.5 本研究的目的及意義
第二章 材料與方法
2.1 實(shí)驗(yàn)材料與試劑
2.1.1 植物材料
2.1.2 常用化學(xué)試劑
2.2 試驗(yàn)方法
2.2.1 突變體庫構(gòu)建
2.2.2 農(nóng)藝性狀考察
2.2.3 葉片下表皮細(xì)胞觀察
2.2.4 葉片細(xì)胞膜透性觀察
2.2.5 水稻白葉枯病原菌接種
2.2.6 InDel分子標(biāo)記的開發(fā)
2.2.7 F_2群體構(gòu)建與遺傳分析
2.2.8 基因定位
2.2.8.1 提取水稻葉片基因組DNA
2.2.8.2 瓊脂糖凝膠電泳
2.2.8.3 聚丙烯酰胺凝膠電泳
2.2.8.4 基因初步定位
2.2.9 水稻葉片總RNA的提取、純化及反轉(zhuǎn)
2.2.9.1 提取水稻葉片總RNA
2.2.9.2 純化水稻葉片RNA
2.2.9.3 水稻葉片RNA的反轉(zhuǎn)
2.2.10 熒光定量PCR(qRT-PCR)
第三章 結(jié)果與分析
3.1 突變體庫篩選及表型分析
3.2 葉片細(xì)胞學(xué)觀察
3.3 葉片細(xì)胞膜透性觀察
3.4 野生型突變體田間接種鑒定
3.5 突變體的遺傳分析
3.6 水浸狀突變體wss1的分子標(biāo)記定位
3.7 候選基因測序及分析
3.8 預(yù)測功能基因的表達(dá)分析
第四章 討論
4.1 水浸狀突變性狀的初探
4.2 定位群體偏分離及分子標(biāo)記定位較遠(yuǎn)的可能原因
4.3 候選基因分析
第五章 全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡歷
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]遺傳群體偏分離研究進(jìn)展[J]. 劉海燕,崔金騰,高用明. 植物遺傳資源學(xué)報(bào). 2009(04)
[2]鹽脅迫對苜蓿葉綠素、甜菜堿含量和細(xì)胞膜透性的影響[J]. 王玉祥,張博,王濤. 草業(yè)科學(xué). 2009(03)
[3]水稻基因設(shè)計(jì)育種的研究進(jìn)展與展望[J]. 郭龍彪,程式華,錢前. 中國水稻科學(xué). 2008(06)
[4]InDel和SNP標(biāo)記在水稻圖位克隆中的應(yīng)用[J]. 潘存紅,王子斌,馬玉銀,殷躍軍,張亞芳,左示敏,陳宗祥,潘學(xué)彪. 中國水稻科學(xué). 2007(05)
[5]水稻微衛(wèi)星標(biāo)記與遺傳多樣性的檢測[J]. 吳秋花,李曉方,毛興學(xué). 分子植物育種. 2005(05)
[6]SSR標(biāo)記及其在水稻分子生物學(xué)研究中的應(yīng)用[J]. 楊杰,仲維功,王才林,陳志德. 金陵科技學(xué)院學(xué)報(bào). 2004(04)
[7]植物基因克隆技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 李敏,李煥秀,李靖. 生命科學(xué)研究. 2004(S1)
[8]水分脅迫對樹莓、黑莓不同品種生長及膜脂過氧化作用的影響[J]. 郭軍戰(zhàn),彭少兵. 西北林學(xué)院學(xué)報(bào). 2004(04)
[9]單核苷酸多態(tài)性(SNP)的研究進(jìn)展和應(yīng)用[J]. 李艷杰,龍火生,李影,楊公社. 畜牧獸醫(yī)雜志. 2003(04)
[10]水稻微衛(wèi)星標(biāo)記的發(fā)展和應(yīng)用[J]. 李文濤,張桂權(quán). 生命科學(xué). 2000(05)
碩士論文
[1]水稻抗白葉枯病新基因Xa32(t)的鑒定、分子標(biāo)記定位及其近等基因系的培育[D]. 鄭崇珂.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
本文編號(hào):3643837
【文章來源】:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市
【文章頁數(shù)】:57 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
英文縮略表
第一章 引言
1.1 植物細(xì)胞膜系統(tǒng)
1.2 植物逆境生理
1.2.1 植物響應(yīng)非生物逆境脅迫的研究進(jìn)展
1.2.2 與Ca~(2+)偶聯(lián)的CDPK和SOS信號(hào)傳導(dǎo)途徑
1.2.3 與Ca~(2+)信號(hào)無關(guān)的的MAPK信號(hào)傳遞途徑
1.2.4 依賴ABA的信號(hào)傳導(dǎo)途徑
1.2.5 植物不依賴ABA的信號(hào)傳導(dǎo)途徑
1.2.6 與非生物逆境脅迫應(yīng)答相關(guān)的基因產(chǎn)物
1.3 表觀遺傳學(xué)
1.3.1 表觀遺傳學(xué)定義
1.3.2 甲基化
1.3.3 組蛋白修飾
1.4 分子標(biāo)記
1.4.1 簡單重復(fù)序列(SSR)
1.4.2 單核苷酸多態(tài)(SNP)
1.4.3 限制性片斷長度多態(tài)性(RFLP)
1.4.4 隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA(RAPD)
1.4.5 擴(kuò)增片段長度多態(tài)性(AFLP)
1.4.6 表達(dá)序列標(biāo)簽(EST)及EST-SSR
1.4.7 序列標(biāo)簽位點(diǎn)(STS)
1.4.8 插入/缺失分子標(biāo)記(InDel)
1.5 本研究的目的及意義
第二章 材料與方法
2.1 實(shí)驗(yàn)材料與試劑
2.1.1 植物材料
2.1.2 常用化學(xué)試劑
2.2 試驗(yàn)方法
2.2.1 突變體庫構(gòu)建
2.2.2 農(nóng)藝性狀考察
2.2.3 葉片下表皮細(xì)胞觀察
2.2.4 葉片細(xì)胞膜透性觀察
2.2.5 水稻白葉枯病原菌接種
2.2.6 InDel分子標(biāo)記的開發(fā)
2.2.7 F_2群體構(gòu)建與遺傳分析
2.2.8 基因定位
2.2.8.1 提取水稻葉片基因組DNA
2.2.8.2 瓊脂糖凝膠電泳
2.2.8.3 聚丙烯酰胺凝膠電泳
2.2.8.4 基因初步定位
2.2.9 水稻葉片總RNA的提取、純化及反轉(zhuǎn)
2.2.9.1 提取水稻葉片總RNA
2.2.9.2 純化水稻葉片RNA
2.2.9.3 水稻葉片RNA的反轉(zhuǎn)
2.2.10 熒光定量PCR(qRT-PCR)
第三章 結(jié)果與分析
3.1 突變體庫篩選及表型分析
3.2 葉片細(xì)胞學(xué)觀察
3.3 葉片細(xì)胞膜透性觀察
3.4 野生型突變體田間接種鑒定
3.5 突變體的遺傳分析
3.6 水浸狀突變體wss1的分子標(biāo)記定位
3.7 候選基因測序及分析
3.8 預(yù)測功能基因的表達(dá)分析
第四章 討論
4.1 水浸狀突變性狀的初探
4.2 定位群體偏分離及分子標(biāo)記定位較遠(yuǎn)的可能原因
4.3 候選基因分析
第五章 全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡歷
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]遺傳群體偏分離研究進(jìn)展[J]. 劉海燕,崔金騰,高用明. 植物遺傳資源學(xué)報(bào). 2009(04)
[2]鹽脅迫對苜蓿葉綠素、甜菜堿含量和細(xì)胞膜透性的影響[J]. 王玉祥,張博,王濤. 草業(yè)科學(xué). 2009(03)
[3]水稻基因設(shè)計(jì)育種的研究進(jìn)展與展望[J]. 郭龍彪,程式華,錢前. 中國水稻科學(xué). 2008(06)
[4]InDel和SNP標(biāo)記在水稻圖位克隆中的應(yīng)用[J]. 潘存紅,王子斌,馬玉銀,殷躍軍,張亞芳,左示敏,陳宗祥,潘學(xué)彪. 中國水稻科學(xué). 2007(05)
[5]水稻微衛(wèi)星標(biāo)記與遺傳多樣性的檢測[J]. 吳秋花,李曉方,毛興學(xué). 分子植物育種. 2005(05)
[6]SSR標(biāo)記及其在水稻分子生物學(xué)研究中的應(yīng)用[J]. 楊杰,仲維功,王才林,陳志德. 金陵科技學(xué)院學(xué)報(bào). 2004(04)
[7]植物基因克隆技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 李敏,李煥秀,李靖. 生命科學(xué)研究. 2004(S1)
[8]水分脅迫對樹莓、黑莓不同品種生長及膜脂過氧化作用的影響[J]. 郭軍戰(zhàn),彭少兵. 西北林學(xué)院學(xué)報(bào). 2004(04)
[9]單核苷酸多態(tài)性(SNP)的研究進(jìn)展和應(yīng)用[J]. 李艷杰,龍火生,李影,楊公社. 畜牧獸醫(yī)雜志. 2003(04)
[10]水稻微衛(wèi)星標(biāo)記的發(fā)展和應(yīng)用[J]. 李文濤,張桂權(quán). 生命科學(xué). 2000(05)
碩士論文
[1]水稻抗白葉枯病新基因Xa32(t)的鑒定、分子標(biāo)記定位及其近等基因系的培育[D]. 鄭崇珂.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
本文編號(hào):3643837
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