丹參（Salviamiltiorrhiza Bunge）,多年生藥用草本植物,藥用成分為根和根莖,主要有效成分為丹酚酸類和丹參酮類次生代謝產(chǎn)物,被用于治療冠心病、腦血管疾病、神經(jīng)退行性疾病、失眠和骨質(zhì)流失等多種疾病。利用植物基因工程手段提高丹參中酚酸類或丹參酮類活性成分的含量是當(dāng)前的研究熱點(diǎn)。已知茉莉酸及其衍生物可有效提高丹參中次生代謝產(chǎn)物的含量,茉莉酸信號(hào)途徑上的JAZ、MYC2等蛋白均參與次生代謝產(chǎn)物生物合成的調(diào)控。JAM（JASMONATE-ASSOCIATED MYC2-LIKE）蛋白屬于 bHLH 轉(zhuǎn)錄因子家族的 Ⅲd亞家族,是響應(yīng)茉莉酸甲酯的負(fù)調(diào)節(jié)因子。已知,擬南芥bHLH轉(zhuǎn)錄因子Ⅲd亞家族成員JAM1、JAM2、JAM3與Ⅲe亞家族成員MYC2、MYC3、MYC4拮抗調(diào)控茉莉酸誘導(dǎo)的下游生物學(xué)反應(yīng)。東北紅豆杉中,JAM蛋白TcJAMYC1,TcJAMYC2和TcJAMYC4負(fù)調(diào)控紫杉醇生物合成基因。在丹參中對(duì)JAM蛋白的研究未見報(bào)道,本實(shí)驗(yàn)從丹參中克隆獲得了 bHLH轉(zhuǎn)錄因子Ⅲd亞家族基因SmbHLH53,對(duì)其次生代謝調(diào)控的功能進(jìn)行了初步研究。本研究的主要內(nèi)容與結(jié)果如下:... 

【文章來源】：陜西師范大學(xué)陜西省211工程院校教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：88 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－２丹參中丹參酮的生物合成

?ｔｅｔｒｕｇｔｎｏｉ?ｍｄｌｉｒｏｎｅ??圖１－２丹參中丹參酮的生物合成。實(shí)線箭頭表示建立的關(guān)系，虛線箭頭表示假設(shè)的關(guān)系。ＩＰＰ：??異戊烯基焦磷酸，ＤＭＡＰＰ：二甲基烯丙基焦磷酸，ＩＰＩ：?ＩＰＰ異構(gòu)酶，ＧＰＰ：香葉基二磷酸，ＧＰＰＳ：??ＧＰＰ合酶，ＦＰＰ：法尼基二磷酸，ＦＰＰＳ：?ＦＰＰ合成酶，ＧＧＰＰ：?ｇｅ牛兒基ｇｅ牛兒基二磷酸，ＧＧＰＰ??合酶，ＣＰＰ：?ｃｏｐａｌｙｌ二鱗酸酯，ＳｒｎＣＰＳ：?ＣＰＰ合酶，ＳｍＫＳＬ：金雀稀合成酶樣環(huán)化酶Ｕ。??Ｆｉｇ．?１－２?Ｂｉｏｓ＞ｎｔｈｅｔｈｓｉｓ?ｏｆ?ｌａｎｓｈｉｎｏｎｅｓ?ｉｎ?Ｓａｌｖｉａ?ｍＵｔｉｏｒｒｈｉｚａ．?Ｓｏｌｉｄ?ａｒｒｏｗｓ?ｉｎｄｉｃａｔｅ?ｔｈｅ?ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ??ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓ，?ａｎｄ?ｄａｓｈｅｄ?ａｒｒｏｗｓ?ｉｎｄｉｃａｔｅ?ｈｙｐｏｔｈｅｔｉｃａｌ?ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓ．?ＩＰＰ：?ｉｓｏｐｅｎｔｅｎｙｌ?ｐｙｒｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ．??ＤＭＡＰＰ：?ｄｉｍｃｔｈｙｌａｌｌｙｌ?ｐｙｒｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ，?１ＰＩ：?ＩＰＰ?ｉｓｏｍｃｒａｓｅ，?ＧＰＰ：?ｇｅｒａｎｙｌ?ｄｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ，?ＧＰＰＳ：?ＧＰＰ??ｓｙｎｔｈａｓｅ．?ＦＰＰ：?ｆａｍｅｓｙｌ?ｄｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ，?ＦＰＰＳ：?ＦＰＰ?ｓｙｎｔｈａｓｅ，?ＧＧＰＰ：?ｇｅｒａｎｙｌｇｅｒａｎｙｌ?ｄｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ，??ＧＧＰＰＳ：?ＧＧＰＰ?ｓｙｎｔｈａｓｅ

?基因的克隆結(jié)果??通過ＰＣＲ技術(shù)，分別從ＤＮＡ和ｃＤＮＡ水平擴(kuò)増獲得基因，結(jié)果??如圖２－１所示：ＤＮＡ和ｃＤＮＡ水平克隆所得片段大小均在１５００?ｂｐ至２０００?ｂｐ之間。??華大基因測(cè)序結(jié)果顯示．■?基因全長(zhǎng)為１７９９?ｂｐ，包含１個(gè)丨１?ｂｐ的內(nèi)含??子，ｃＤＮＡ長(zhǎng)度為１７８８?ｂｐ，編碼５９５個(gè)氨基酸殘基。??２０００?響?１??ｉＭＨＨ??ｌｏｏ?ＪＬ?ｗｙＪｆｅ：；?＾??■??圖２－１丹參加擴(kuò)增產(chǎn)物凝膠電泳檢測(cè)??Ｍ：?ＤＬ２０００?ｍａｒｋｅｒ；?１：以?ｃＤＮＡ?為模板?的擴(kuò)增產(chǎn)物；２：以?ＤＮＡ?為模板??的擴(kuò)增產(chǎn)物；??Ｆｉｇ．?２－１?ＰＣＲ?ａｍｐｌｉｃａｔｉｏｎ?ｐｒｏｄｕｃｔｓ?ｏｆ?ＳｍｂＨＬＨ５３．??Ｍ：?ＤＬ２０００?ｍａｒｋｅｒ；?１：?ＰＣＲ?ａｍｐｌｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｃＤＮＡ?ｆｒａｇｍｅｎｔ?ｏｆ?ＳｍｂＨＬＨ５３＼?２：?ＰＣＲ?ａｍｐｌｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ??ＤＮＡ?ｆｒａｇｍｅｎｔ?ｏｆ?ＳｍｂＨＬＨ５３．??２．３．２?ＳｍｂＨＬＨ５３生物信息學(xué)分析結(jié)果??ＰｒｏｔＰａｒａｍ在線預(yù)測(cè)ＳｍｂＨＬＨ５３蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)結(jié)果顯示ＳｍｂＨＬＨ５３蛋白??分子式為Ｃ２８４ＱＨ４５３５Ｎ８４５?０?８９５?Ｓ２７，相對(duì)分子質(zhì)量６５．７ｋＤ，理論等電點(diǎn)．７．５２，蛋白疏??１４??

【參考文獻(xiàn)】：
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碩士論文
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本文編號(hào)：3625141