花生（Arachis hypogaea L.）是我國(guó)重要的油料作物,在我國(guó)食用油供給中具有重要作用。干旱也是影響花生生長(zhǎng)發(fā)育和產(chǎn)量的重要因素,因此闡明花生應(yīng)答干旱脅迫機(jī)制對(duì)于培育抗逆性強(qiáng)的花生新品種具有重要意義。目前,在我國(guó)花生生產(chǎn)方面普遍存在嚴(yán)重影響花生產(chǎn)量和品質(zhì)的干旱、病蟲(chóng)害等關(guān)鍵問(wèn)題,但關(guān)于花生干旱脅迫下基因和miRNA變化的文獻(xiàn)和報(bào)道不多。通過(guò)對(duì)花生轉(zhuǎn)錄組和小RNA的深入研究可以發(fā)掘出花生抗旱相關(guān)基因和miRNA,研究其在干旱脅迫條件下的差異表達(dá),結(jié)果可為開(kāi)展花生抗旱性研究,以及抗旱新品種的培育提供理論依據(jù)。本研究采用15%PEG6000模擬干旱脅迫處理的花生根部（1³天）,及未經(jīng)處理的花生根部為試材（HS15₀、HS15₁、HS15₂和HS15₃）進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組和小RNA測(cè)序統(tǒng)計(jì)并分析了與干旱相關(guān)的差異表達(dá)基因和miRNA;測(cè)定花生葉片中葉綠素、丙二醛、脯氨酸及可溶性蛋白含量,觀察其在水分脅迫下的動(dòng)態(tài)變化;對(duì)ahyNAC25基因進(jìn)行了克隆及遺傳轉(zhuǎn)化擬南芥進(jìn)一步研究其功能及... 

【文章來(lái)源】：廣西師范大學(xué)廣西壯族自治區(qū)

【文章頁(yè)數(shù)】：100 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

脅迫下生理指標(biāo)含量測(cè)定

112.3.1.2干旱脅迫對(duì)可溶性蛋白及丙二醛的影響一般情況下，植物在受到干旱脅迫情況下丙二醛、脯氨酸、可溶性蛋白含量升高。在本研究中，如圖1-B和圖1-C所示，脯氨酸和可溶性蛋白的含量在0-2天顯著提高，在第三天稍微下降，但仍高于未進(jìn)行干旱脅迫的植株；丙二醛含量隨著脅迫時(shí)間的增長(zhǎng)而顯著提高（圖1-D）。2.3.2RNA的質(zhì)量檢測(cè)對(duì)15%PEG6000模擬干旱脅迫處理不同天數(shù)的花生根部提取的RNA進(jìn)行質(zhì)量檢測(cè)，結(jié)果見(jiàn)圖2和表3。四個(gè)樣品的RIN值在8.3-9.2之間，OD260/280值在2.0-2.05之間，說(shuō)明這四個(gè)樣品提取的RNA合格，質(zhì)量滿足建庫(kù)測(cè)序的標(biāo)準(zhǔn)。圖2花生根部總RNA的質(zhì)量檢測(cè)Fig.2ThequalityoftotalRNAinpeanutroots

13力的轉(zhuǎn)錄本有13387條。在具有蛋白編碼13387條中，屬于已知基因的具有編碼潛力的轉(zhuǎn)錄本為11590條，占86.57%，而屬于新基因的具有編碼潛力的轉(zhuǎn)錄本為1797條，占13.42%。圖3已知轉(zhuǎn)錄本的長(zhǎng)度分布Fig.3Thelengthdistributionofknowntranscripts2.3.4轉(zhuǎn)錄因子家族分類與統(tǒng)計(jì)分析注釋到的轉(zhuǎn)錄因子家族的基因分類及數(shù)量見(jiàn)附錄Ⅰ。轉(zhuǎn)錄因子家族主要集中在FAR1和MYB類，基因數(shù)目分別為313和226個(gè)；其次是AP2-EREBP類和bHLH類，基因數(shù)目分別為159和150個(gè)。其中可能涉及干旱脅迫響應(yīng)的轉(zhuǎn)錄因子家族為NAC、bZIP、WRKY、MYB。NAC家族的基因?yàn)?1個(gè)，在HS15_0-vs-HS15_1、HS15_1-vs-HS15_2和HS15_2-vs-HS15_3三個(gè)比較組中，有31個(gè)為差異表達(dá)的基因，其中上調(diào)的有22個(gè)，下調(diào)的有9個(gè)。bZIP家族的基因?yàn)?7個(gè)，三個(gè)比較組中有11個(gè)為差異表達(dá)的基因，其中上調(diào)的有5個(gè)，下調(diào)的有6個(gè)。WRKY家族有88個(gè)基因，三個(gè)比較組中有51個(gè)為差異表達(dá)的基因，其中上調(diào)的有27個(gè)，下調(diào)的有24個(gè)。MYB家族有226個(gè)基因，三個(gè)比較組中，有99個(gè)為差異表達(dá)的基因，其中上調(diào)的有44個(gè)，下調(diào)的有55個(gè)。2.3.5基因定量分析2.3.5.1基因表達(dá)量統(tǒng)計(jì)分析統(tǒng)計(jì)每個(gè)樣品在不同F(xiàn)PKM區(qū)間（FPKM<=1、FPKM1~10、FPKM>=10）的基因數(shù)目，結(jié)果見(jiàn)表4。HS15_0樣品中，F(xiàn)PKM<=1的數(shù)目最少，F(xiàn)PKM>=10的數(shù)目最多；HS15_1樣品中，F(xiàn)PKM<=1的數(shù)目最少，F(xiàn)PKM1~10的數(shù)目最多；HS15_2樣品

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]棉花E3泛素連接酶基因GhRING1-like的克隆及功能分析[J]. 夏朝陽(yáng),安曉暉,張中起,葛冬冬,劉康.  南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2019(01)
[2]影響南方農(nóng)業(yè)干旱災(zāi)損率的氣候要素關(guān)鍵期特征[J]. 張強(qiáng),韓蘭英,王勝,王興,林婧婧.  科學(xué)通報(bào). 2018(23)
[3]轉(zhuǎn)IbLEA 14基因楊樹(shù)增強(qiáng)耐旱性的生理機(jī)制[J]. 喬煥煥,李紅兵,孫振玫,可慶波,王仕穩(wěn),郭尚洙,鄧西平.  分子植物育種. 2019(08)
[4]干旱脅迫下花生差異表達(dá)轉(zhuǎn)錄因子家族分析（英文）[J]. 趙小波,閆彩霞,張浩,王娟,李春娟,謝宏峰,單世華.  農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào). 2018(07)
[5]花生苗期干旱處理后轉(zhuǎn)錄和代謝通路分析[J]. 萬(wàn)麗云,蘇威,李蓓,雷永,晏立英,康彥平,淮東欣,陳玉寧,姜慧芳,廖伯壽.  中國(guó)油料作物學(xué)報(bào). 2018(03)
[6]黑麥熱激蛋白ScHsp90-1基因的克隆及表達(dá)分析[J]. 王利彬,董爽爽,王燦國(guó),程敦公,李豪圣,劉愛(ài)峰,宋健民,劉建軍,劉成,張玉梅,穆平,趙振東,曹新有.  山東農(nóng)業(yè)科學(xué). 2018(03)
[7]BnA7HSP70分子伴侶結(jié)合蛋白超表達(dá)能夠提高甘藍(lán)型油菜耐旱性[J]. 萬(wàn)麗麗,王轉(zhuǎn)茸,辛強(qiáng),董發(fā)明,洪登峰,楊光圣.  作物學(xué)報(bào). 2018(04)
[8]中國(guó)花生主產(chǎn)區(qū)種植面積變化的影響因素[J]. 周曙東,孟桓寬.  江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué). 2017(13)
[9]花生中三個(gè)LEA基因的克隆與表達(dá)分析[J]. 趙小波,張廷婷,閆彩霞,李春娟,王娟,張浩,石程仁,單世華.  花生學(xué)報(bào). 2016(04)
[10]甘蔗小分子量熱激蛋白（sHSP）基因克隆及水分脅迫下的表達(dá)分析[J]. 梁潘霞,黃杏,李楊瑞.  生物技術(shù)通報(bào). 2016(10)

碩士論文
[1]玉米干旱脅迫應(yīng)答NAC基因的克隆及功能分析[D]. 張麗.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2017
[2]玉米CCCH型鋅指蛋白基因ZmC3H54的抗逆功能分析[D]. 徐倩倩.安徽農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[3]花生中脅迫抗性microRNA的挖掘鑒定和功能分析[D]. 胡述浩.山東大學(xué) 2014
[4]干旱脅迫下花生苗期基因差異顯示及全長(zhǎng)cDNA文庫(kù)構(gòu)建[D]. 王叢叢.仲愷農(nóng)業(yè)工程學(xué)院 2013



本文編號(hào)：3607917