第一部分OsEMF2b參與水稻花器官發(fā)育的調(diào)控途徑研究EMBRYONIC FLOWER（EMF）是一個(gè)Polycomb-group protein（PcG）蛋白,其基因功能缺失使擬南芥植株未完成營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)過(guò)程便快速進(jìn)入生殖生長(zhǎng)階段,由于其植株沒(méi)有積累足夠的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),導(dǎo)致擬南芥植株矮小,生殖生長(zhǎng)階段出現(xiàn)花器官不正常發(fā)育等現(xiàn)象。在擬南芥中,EMF2與EMF1構(gòu)成PRC2蛋白通過(guò)H3K27me3的修飾方式調(diào)控花器官特異性基因表達(dá)。水稻中存在著兩個(gè)EMF2的同源基因:OsEMF2a,OsEMF2b,其中OsEMF2b通過(guò)H3K27me3的表觀遺傳修飾來(lái)調(diào)控水稻花器官發(fā)育。研究表明,在擬南芥中,Chromomethylase3（CMT3）一個(gè)作用于CNG位點(diǎn)的DNA甲基轉(zhuǎn)移酶,該酶僅僅在H3K27me3發(fā)生了 DNA甲基化,這暗示H3K27me3為DNA甲基化提供識(shí)別位點(diǎn),進(jìn)一步說(shuō)明了 DNA甲基化參與了花器官發(fā)育的調(diào)控途徑。為探究在水稻中DNA甲基化是否同樣起到了輔助調(diào)控作用,本研究以O(shè)sEMF2b的T-DNA插入突變體為實(shí)驗(yàn)材料,通過(guò)農(nóng)藝性狀調(diào)查,芯片分析,實(shí)時(shí)熒光定量PCR,亞硫酸鹽測(cè)序等實(shí)... 

【文章來(lái)源】：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)四川省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：66 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１重亞硫酸鹽測(cè)序原理示意圖??Ｆｉｇ．?１－１?Ｂｉｓｕｌｆｉｔｅ?Ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ?Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅ?Ｄｉａｇｒａｍ??３??

圖１－３?ＯＡＭＦ２６分子鑒定的電泳圖??Ｆｉｇ．?１－３?ＯｓＥＭＦ２ｂＭｏｌｅｃｕｌａｒ?ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｆｉｇｕｒｅ??所以從圖１－２中的電泳圖顯示結(jié)果可以看出，１、２為Ｏ＾ＥＭＦ２Ｚｊ野生型；３、７??為ａ也雜合體；４、５、６為突變體。??１．?２水稻ＯｓＢＦＡ突變體的農(nóng)藝性狀鑒定??１．?２．?１化突變體的植株形態(tài)??經(jīng)過(guò)對(duì)整體植株、穗部進(jìn)行觀測(cè)，在突變體與野生型對(duì)比下看，突變??體的植株比野生型植株矮小很多，分蘗數(shù)明顯減少；通過(guò)對(duì)純合突變體的??小穗進(jìn)行觀察，可以發(fā)現(xiàn)，其小穗數(shù)明顯減少，并且大部分小穗發(fā)育畸形（圖１－３）。??２２??

圖１－４?Ｏｓ￡ＭＦ２ｆｃ突變體與野生型的植株、穗部發(fā)育對(duì)比圖??Ｆｉｇ．?１－４?Ｔｈｅ?ｍｕｔａｎｔ?ａｎｄ?ｗｉｌｄ?ｔｙｐｅ?ｏｆ?ＯｓＥＭＦ２ｂｐ＼ａｎｔｓ，?ｐａｎｉｃｌｅ?ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ?ｆｉｇｕｒｅ．??（注：ＷＴ：野生型，ＭＴ：突變體。）??通過(guò)顯微鏡觀察，我們發(fā)現(xiàn)花器官的發(fā)育有著不同程度的缺陷，水稻花器官的四??輪結(jié)構(gòu)都沒(méi)有正常發(fā)育。（圖１－４）??１ＩｌｆｆｉＰｌ??圖１－５?Ｏ＾ＭＦ２Ｚ＞花器官的對(duì)比圖??Ｆｉｇ．?１－５?ＯｓＥＭＦ２ｂ?ｆｌｏｒａｌ?ｏｒｇａｎ?ｃｏｎｔｒａｓｔ?ｆｉｇｕｒｅ??注：ＷＴ?代表野生型；ｌｅ?代表?ｌｅｍｍａ；?ｐａ?代表?ｐａｌｅａ；?ｅｇ?代表?ｅｍｐｔｙ?ｇｌｕｍｅ；?ｌｏ?代表?ｌｏｄｉｃｕｌｅｓ；??ｓ代表ｓｔａｍｅｎ；?ｃ代表ｃａｒｐｅｌ．?Ａ－Ｆ分別代表的六種花器官突變類(lèi)型。Ａ：穎??殼輪生（箭頭所示）；Ｂ：外稃缺失；Ｃ：缺失漿片；Ｄ：雄蕊減少；Ｅ：子房叢生：??Ｆ：?—個(gè)小穗兩個(gè)小花。（該圖為本實(shí)驗(yàn)室蔣彬師兄拍攝）。??１．?２．?２化ｆ／ＪＦ％突變體的花粉粒育性??隨機(jī)取野生型及突變體的三朵小花，用染色液將其花粉染色，隨機(jī)挑取三個(gè)視野??進(jìn)行觀察。經(jīng)過(guò)觀察我們發(fā)現(xiàn)，純合突變體其花粉粒高度不育。??ｎｓ??２３??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
[1]雙胚苗水稻同源多倍體基因表達(dá)和DNA甲基化的研究[D]. 曾秀鳳.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012



本文編號(hào)：3586103