論文采用HPLC,紫外分光光度法等方法探明靈芝生長發(fā)育過程中藍(lán)光處理對生長素和有效成分（靈芝多糖和靈芝三萜酸）含量的影響。利用已經(jīng)獲得的靈芝基因組信息篩選生長素合成途徑中相關(guān)基因和靈芝藍(lán)光受體基因,進(jìn)行相關(guān)的生物信息學(xué)分析和功能預(yù)測。采用熒光定量PCR等方法了解生長素相關(guān)基因和藍(lán)光受體基因的時(shí)空表達(dá)情況,了解生長素對光的響應(yīng)和在靈芝形態(tài)建成中的作用,為開展內(nèi)源激素和光質(zhì)對藥用真菌生長發(fā)育作用的研究提供理論基礎(chǔ)。藍(lán)光對靈芝子實(shí)體生長素和三萜酸含量都有影響。在靈芝的生長發(fā)育過程中,藍(lán)光處理靈芝子實(shí)體的千重鮮重均高于對照組。生長素的含量在菌蓋形成期最高,對照組生長素的含量顯著高于藍(lán)光處理。采用HPLC對10種三萜酸含量進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)靈芝酸A是靈芝子實(shí)體內(nèi)含量最高的靈芝三萜酸,3種靈芝烯酸的含量極低,7種靈芝酸的含量均在彈孢前期最高,在彈孢后期藍(lán)光處理和對照組三萜酸含量均迅速降低。彈孢前期藍(lán)光處理的7種靈芝酸的含量均顯著高于對照組。利用KEGG網(wǎng)站對IAA合成途徑進(jìn)行預(yù)測,結(jié)果表明,IAA合成途徑包含在色氨酸代謝途徑中,編號為00380。靈芝編碼基因序列中與色氨酸代謝途徑相關(guān)的有41個(gè),其中有... 

【文章來源】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章頁數(shù)】：81 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
前言
文獻(xiàn)綜述
    1 生長素
        1.1 生長素的發(fā)現(xiàn)
        1.2 生長素的生理作用和作用機(jī)制
        1.3 生長素的合成途徑
        1.4 生長素的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)
    2 生長素在在藥用植物中的應(yīng)用
        2.1 促進(jìn)藥用植物插條發(fā)根及根的生長
        2.2 促進(jìn)藥用植物培養(yǎng)愈傷組織和不定根形成
        2.3 促進(jìn)藥用植物果實(shí)和花芽發(fā)育
        2.4 在藥用植物其它方面的作用研究
    3 展望
    參考文獻(xiàn)
第一章 藍(lán)光處理靈芝子實(shí)體不同生長發(fā)育階段生長素含量變化研究
    1 材料
        1.1 供試菌株
        1.2 試劑和儀器
    2 方法
        2.1 靈芝木段栽培法
        2.2 光質(zhì)處理
        2.3 靈芝樣品鮮重和干重的測定
        2.4 HPLC法檢測靈芝中生長素的含量
            2.4.1 分析樣品溶液的制備
            2.4.2 高效液相色譜條件
            2.4.3 IAA標(biāo)準(zhǔn)品的配制
            2.4.4 數(shù)據(jù)處理
    3 結(jié)果與分析
        3.1 靈芝子實(shí)體不同生長發(fā)育階段鮮重和干重的積累
        3.2 IAA標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
        3.3 靈芝子實(shí)體不同生長發(fā)育階段IAA含量
    4 討論
    參考文獻(xiàn)
第二章 靈芝中生長素的合成途徑研究
    1 方法
        1.1 靈芝生長素合成途徑預(yù)測
        1.2 生長素代謝相關(guān)基因的蛋白結(jié)構(gòu)域及保守基序分析
    2 結(jié)果與分析
        2.1 IAA生物合成途徑的預(yù)測
        2.2 靈芝生長素代謝相關(guān)基因的生物信息分析結(jié)果
            2.2.1 吲哚色胺途徑
                2.2.1.1 芳族基-L-氨基酸脫羧酶(DDC)
                2.2.1.2 單胺氧化酶(AOC1)
                2.2.1.3 醛脫氫酶(Aldh)
            2.2.2 吲哚丙酮酸途徑和吲哚乙酰胺途徑
                2.2.2.1 色氨酸轉(zhuǎn)氨酶(Tam1)
                2.2.2.2 酰胺酶(AMI)
    3 討論
    參考文獻(xiàn)
第三章 靈芝生長素合成相關(guān)酶基因相對表達(dá)量研究
    1 材料、試劑及儀器
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2 實(shí)驗(yàn)試劑和儀器
    2 方法
        2.1 靈芝木段栽培法
        2.2 光質(zhì)處理
        2.3 靈芝子實(shí)體RNA的提取
            2.3.1 RNA質(zhì)量檢測
            2.3.2 逆轉(zhuǎn)錄生成cDNA
        2.4 靈芝子實(shí)體不同發(fā)育時(shí)期cDNA的熒光定量PCR
    3 結(jié)果與分析
        3.1 不同生長發(fā)育階段靈芝子實(shí)體總RNA提取結(jié)果
        3.2 靈芝不同生長發(fā)育階段生長素合成關(guān)鍵酶基因相對表達(dá)量分析
            3.2.1 吲哚色胺途徑關(guān)鍵酶基因相對表達(dá)量分析
            3.2.2 吲哚丙酮酸途徑和吲哚乙酰胺途徑關(guān)鍵酶基因相對表達(dá)量分析
    4 討論
    參考文獻(xiàn)
第四章 藍(lán)光對靈芝子實(shí)體多糖和三萜酸含量的影響
    1 材料、試劑及儀器
        1.1 材料
        1.2 實(shí)驗(yàn)試劑和儀器
    2 方法
        2.1 靈芝木段栽培法
        2.2 光質(zhì)處理
        2.3 靈芝干重和鮮重的測定
        2.4 靈芝多糖測定
        2.5 檢測10種三萜酸含量
        2.6 數(shù)據(jù)處理與分析
    3 結(jié)果與分析
        3.1 靈芝多糖含量變化
        3.2 三萜酸總含量變化
        3.3 對10種三萜酸含量分析
    4 討論
    參考文獻(xiàn)
第五章 靈芝中藍(lán)光受體的克隆及分析
    1 材料、試劑及儀器
        1.1 材料及處理
        1.2 原始數(shù)據(jù)及引物設(shè)計(jì)
        1.3 實(shí)驗(yàn)試劑和儀器
    2 方法
        2.1 靈芝木段栽培法
        2.2 光質(zhì)處理
        2.3 靈芝wc-1和wc-2基因的序列驗(yàn)證
        2.4 GlWC-1和GlWC-2的蛋白結(jié)構(gòu)域及系統(tǒng)進(jìn)化分析
        2.5 不同時(shí)期藍(lán)光處理和對照組RNA提取
        2.6 熒光定量PCR
    3 結(jié)果與分析
        3.1 藍(lán)光處理和對照組靈芝不同生長發(fā)育階段總RNA提取結(jié)果
        3.2 Glwc-1和Glwc-2克隆結(jié)果和核酸序列分析
        3.3 靈芝GlWC-1和GlWC-2氨基酸序列與其他真菌藍(lán)光受體氨基酸序列比對
        3.4 GlWC-1和GlWC-2的系統(tǒng)進(jìn)化分析
        3.5 靈芝不同生長發(fā)育階段Glwc-1和Glwc-2相對表達(dá)量分析
    4 討論
    參考文獻(xiàn)
第六章 結(jié)論與展望
    1 結(jié)論
    2 展望
附錄
致謝
作者簡介與發(fā)表文章


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]普通煙草ARF基因家族序列的鑒定與表達(dá)分析[J]. 孫亭亭,張磊,陳樂,龔達(dá)平,王大偉,陳雅瓊,陳蕾,孫玉合.  植物遺傳資源學(xué)報(bào). 2016(01)
[2]檸檬F-box基因的克隆及表達(dá)分析[J]. 安振宇,張樹偉,何新華,李麗淑,羅聰,黃桂香,林蔚,胡穎,董龍.  分子植物育種. 2015(11)
[3]油菜F-BOX蛋白序列特征與生物信息學(xué)分析[J]. 劉中華,王俊生,譚光軒,仇麗燕.  南方農(nóng)業(yè). 2015(33)
[4]黃瓜生長素受體同源基因CsAFB和CsTIR在擬南芥中的轉(zhuǎn)化與功能表達(dá)[J]. 姚麗琴,陳哲皓,鮑林文,何露霞,王利琳.  農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào). 2016(02)
[5]麻花秦艽休眠芽離體培養(yǎng)時(shí)的叢生芽發(fā)生途徑研究[J]. 張延紅,高素芳.  中藥材. 2015(09)
[6]弱光下菊花‘清露’的激素水平及相關(guān)基因表達(dá)[J]. 韓霜,陳素梅,蔣甲福,房偉民,管志勇,陳發(fā)棣.  中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2015(02)
[7]不同基質(zhì)與生長素處理對長白山篤斯越桔嫩枝扦插生根的影響[J]. 李悅怡,巴春影,譚智文,曹后男,宗成文.  延邊大學(xué)農(nóng)學(xué)學(xué)報(bào). 2014(04)
[8]輪葉黨參不定根的誘導(dǎo)培養(yǎng)[J]. 李美陽.  安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2015(01)
[9]龍芽草組織培養(yǎng)和快速繁殖體系的建立[J]. 孫駿威,王飛娟,江瓊,丁艷菲.  貴州農(nóng)業(yè)科學(xué). 2014(12)
[10]落葉松LaIAA2基因的克隆及表達(dá)分析[J]. 馮健.  遼寧林業(yè)科技. 2014(06)

碩士論文
[1]擬南芥中一個(gè)SAUR基因的功能研究[D]. 朱宇斌.浙江大學(xué) 2010



本文編號：3577252