花生種質(zhì)資源白藜蘆醇檢測及高白藜蘆醇種質(zhì)篩選
發(fā)布時間:2022-01-04 11:21
花生(Arachis hypogaea L.),又名“落花生”或“長生果”,是一種營養(yǎng)豐富、食用廣泛的油料作物,在我國農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中占有重要地位;ㄉ粌H含有大量的脂類、蛋白質(zhì)和糖類,也含有一些具有保健功能的營養(yǎng)成分,如維生素E、白藜蘆醇、可溶性纖維等。白藜蘆醇屬于天然多酚類化合物,具有顯著的抗氧化活性,同時在預(yù)防癌癥及心血管疾病、增強(qiáng)免疫力等方面有重要作用;ㄉ浅咸、虎杖外的少數(shù)含白藜蘆醇的植物之一,選育高白藜蘆醇花生新品種,研究花生白藜蘆醇積累及調(diào)控機(jī)制,是花生育種發(fā)展的重要方向。本研究以花生籽仁為對象,在其他作物白藜蘆醇檢測方法的基礎(chǔ)上,優(yōu)化了花生籽仁白藜蘆醇的提取及檢測方法,并利用該方法對404份花生種質(zhì)資源進(jìn)行了多年多環(huán)境的白藜蘆醇含量測定,明確了花生資源白藜蘆醇含量的變異,發(fā)掘出高白藜蘆醇的特異種質(zhì)。主要研究結(jié)果如下:1、優(yōu)化了花生籽仁白藜蘆醇提取及檢測方法。針對傳統(tǒng)方法提取花生籽仁白藜蘆醇提取率低、提取時間長、提取物中容易混雜其他物質(zhì)等問題,研究優(yōu)化了花生籽仁白藜蘆醇提取及檢測方法。利用酶解和超聲處理相結(jié)合的方法提取花生籽仁白藜蘆醇,確定最適酶濃度為3 g/L、最佳酶解時...
【文章來源】:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市
【文章頁數(shù)】:46 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
白藜蘆醇的從頭合成途徑(周林芳,2019)
中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文第二章花生籽仁中白藜蘆醇含量檢測方法的優(yōu)化11表2-1正交實(shí)驗的因素與水平Table2-1Factorsandlevelsoforthogonalexperiment2.2.5統(tǒng)計方法本實(shí)驗所得的數(shù)據(jù)采用MicrosoftExcel2010、SpssStatisticsv23等軟件處理。差異性顯著水平設(shè)置p≤0.05。2.3技術(shù)路線利用酶解法聯(lián)合超聲萃取法提取花生籽仁中白藜蘆醇,主要技術(shù)路線如下:首先,通過單因素實(shí)驗和正交試驗優(yōu)化了提取工藝參數(shù),然后通過穩(wěn)定性實(shí)驗、回收率實(shí)驗、方法對實(shí)驗等方法對該提取工藝進(jìn)行驗證,最后利用HPLC法測定花生籽仁中白藜蘆醇含量(圖2-1)。圖2-1技術(shù)路線圖Fig.2-1Thetechnologicalprocessofthisstudy.水平Levels因素FactorsA酶解液濃度AEnzymeconcentration(g/L)B酶解時間BDigestiontime(min)C超聲時間CUltrasonictime(min)10302021.5604033906044.512080
中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文第二章花生籽仁中白藜蘆醇含量檢測方法的優(yōu)化122.4.1標(biāo)準(zhǔn)曲線及標(biāo)準(zhǔn)品、供試品溶液的色譜圖采用外標(biāo)法定量,以甲醇為溶劑,配制成不同濃度梯度(0.25、0.5、0.75、1、1.5、2、2.5、3、3.5、4mg/L)的白藜蘆醇標(biāo)準(zhǔn)品溶液,測定各個濃度對應(yīng)的峰面積。所得數(shù)據(jù)以峰面積為縱坐標(biāo),濃度為橫坐標(biāo),得到峰面積-濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線。從圖2-2中可以看出,線性方程為Y=65.186X-5.4539(R2=0.9991),其中X為反式白藜蘆醇濃度,Y為不同濃度下的相應(yīng)峰面積,結(jié)果表明該檢測方法白藜蘆醇濃度和峰面積在一定濃度范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系(圖2-2a)。在“2.2.2”的色譜條件下,白藜蘆醇標(biāo)準(zhǔn)品的出峰時間為13.8min左右,峰形對稱,基線平穩(wěn)(圖2-2b)。供試品溶液中,色譜圖中的紫外特征吸收峰與白藜蘆醇標(biāo)準(zhǔn)品相同,出峰時間一致,確定為白藜蘆醇,且峰形對稱,達(dá)到基線分離的效果(圖2-2c)。圖2-2白藜蘆醇標(biāo)準(zhǔn)曲線和標(biāo)準(zhǔn)品、供試品色譜圖Fig.2-2Standardcurveandthechromatogramsforstandardsolutionandsample注:a表示峰面積與白藜蘆醇濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線;字母b和c分別表示白藜蘆醇標(biāo)準(zhǔn)品和供試品色譜圖。Note:Theletter“a”representsthestandardcurveofpeakareaandresveratrolconcentration;“b”and“c”representthechromatogramsofstandardsolutionandsamplebythemethodoptimizedinthepresentstudy,respectively.2.4.2方法的檢出限(LOD)及定量限(LOQ)配制適當(dāng)濃度的白藜蘆醇標(biāo)準(zhǔn)液,以3倍和10倍的信噪比確定方法的檢出限(LOD,Limitofdetection)和定量限(LOQ,Limitofquantitation)(FANGetal.,2010)。如圖2-3所示,本檢測方法的檢出限和定量限分別為0.01mg/L和0.09mg/L,換算成樣品質(zhì)量單位分別為0.006μg/g和0.051μg/g。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]正交試驗法優(yōu)化菊花中總黃酮的提取工藝研究[J]. 陳婷. 工業(yè)微生物. 2019(04)
[2]白藜蘆醇及衍生物的研究進(jìn)展[J]. 樹林一,趙航,黃雯莉,宋光耀. 河北醫(yī)藥. 2019(13)
[3]白藜蘆醇聯(lián)合二苯乙烯苷通過抗衰老延緩糖尿病腎病進(jìn)展的研究[J]. 龐婉霞,朱澤兵,俠晨輝,葉霖,劉華鋒,劉玉寧,劉偉敬. 中國中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志. 2019(05)
[4]白藜蘆醇治療炎癥性腸病的研究進(jìn)展[J]. 陳香,許新微,張朝陽,趙明. 江蘇大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2019(02)
[5]白藜蘆醇在胰島素抵抗、糖尿病中的研究進(jìn)展[J]. 趙航,馬慧娟,樹林一,張運(yùn)佳,宋光耀. 醫(yī)學(xué)研究雜志. 2019(03)
[6]促進(jìn)花生生產(chǎn),保障我國糧油安全[J]. 陳清碩,孫雯,田冕. 農(nóng)村經(jīng)濟(jì)與科技. 2019(01)
[7]HPLC法測定山葡萄藤中白藜蘆醇含量[J]. 楊榮艷,劉琬暉,高楠楠. 中國衛(wèi)生產(chǎn)業(yè). 2018(15)
[8]酶法輔助提取海紅果中的白藜蘆醇[J]. 樊迎,陳毅,薛霖莉,連文綺,張丹. 山西農(nóng)業(yè)科學(xué). 2018(05)
[9]響應(yīng)面法優(yōu)化花生殼中白藜蘆醇提取工藝及其抗氧化活性研究[J]. 孫慧,林強(qiáng),魏微. 應(yīng)用化工. 2018(05)
[10]花生種子白藜蘆醇含量QTL定位分析[J]. 喻博倫,黃莉,邱西克,郭建斌,姜成紅,蔡巖,廖伯壽,姜慧芳,陳玉寧,劉念,陳偉剛,呂建偉,宋延濱,羅懷勇. 中國油料作物學(xué)報. 2018(01)
博士論文
[1]花生株高和出仁率QTL定位分析[D]. 呂建偉.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2019
[2]酶法提取虎杖中白藜蘆醇及白藜蘆醇酯的合成研究[D]. 周林芳.江南大學(xué) 2019
[3]山葡萄果實(shí)轉(zhuǎn)錄組分析及白藜蘆醇調(diào)控機(jī)理研究[D]. 殷向靜.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2016
[4]花生抗黃曲霉菌產(chǎn)毒機(jī)制的研究[D]. 王后苗.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2016
[5]花生品種間耐濕澇性差異及其機(jī)理研究[D]. 李林.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2004
碩士論文
[1]花生莢殼抗黃曲霉菌侵染種質(zhì)發(fā)掘及抗性關(guān)聯(lián)分析[D]. 邱西克.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2019
[2]白藜蘆醇的生物轉(zhuǎn)化途徑探索及生物活性研究[D]. 王珊珊.深圳大學(xué) 2016
[3]花生白藜蘆醇種質(zhì)的篩選研究[D]. 劉士壯.仲愷農(nóng)業(yè)工程學(xué)院 2015
[4]花生種質(zhì)資源耐漬性鑒定研究[D]. 邱柳.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[5]白藜蘆醇的提取純化及性能研究[D]. 蔡楊柳.北京化工大學(xué) 2010
本文編號:3568243
【文章來源】:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市
【文章頁數(shù)】:46 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
白藜蘆醇的從頭合成途徑(周林芳,2019)
中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文第二章花生籽仁中白藜蘆醇含量檢測方法的優(yōu)化11表2-1正交實(shí)驗的因素與水平Table2-1Factorsandlevelsoforthogonalexperiment2.2.5統(tǒng)計方法本實(shí)驗所得的數(shù)據(jù)采用MicrosoftExcel2010、SpssStatisticsv23等軟件處理。差異性顯著水平設(shè)置p≤0.05。2.3技術(shù)路線利用酶解法聯(lián)合超聲萃取法提取花生籽仁中白藜蘆醇,主要技術(shù)路線如下:首先,通過單因素實(shí)驗和正交試驗優(yōu)化了提取工藝參數(shù),然后通過穩(wěn)定性實(shí)驗、回收率實(shí)驗、方法對實(shí)驗等方法對該提取工藝進(jìn)行驗證,最后利用HPLC法測定花生籽仁中白藜蘆醇含量(圖2-1)。圖2-1技術(shù)路線圖Fig.2-1Thetechnologicalprocessofthisstudy.水平Levels因素FactorsA酶解液濃度AEnzymeconcentration(g/L)B酶解時間BDigestiontime(min)C超聲時間CUltrasonictime(min)10302021.5604033906044.512080
中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文第二章花生籽仁中白藜蘆醇含量檢測方法的優(yōu)化122.4.1標(biāo)準(zhǔn)曲線及標(biāo)準(zhǔn)品、供試品溶液的色譜圖采用外標(biāo)法定量,以甲醇為溶劑,配制成不同濃度梯度(0.25、0.5、0.75、1、1.5、2、2.5、3、3.5、4mg/L)的白藜蘆醇標(biāo)準(zhǔn)品溶液,測定各個濃度對應(yīng)的峰面積。所得數(shù)據(jù)以峰面積為縱坐標(biāo),濃度為橫坐標(biāo),得到峰面積-濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線。從圖2-2中可以看出,線性方程為Y=65.186X-5.4539(R2=0.9991),其中X為反式白藜蘆醇濃度,Y為不同濃度下的相應(yīng)峰面積,結(jié)果表明該檢測方法白藜蘆醇濃度和峰面積在一定濃度范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系(圖2-2a)。在“2.2.2”的色譜條件下,白藜蘆醇標(biāo)準(zhǔn)品的出峰時間為13.8min左右,峰形對稱,基線平穩(wěn)(圖2-2b)。供試品溶液中,色譜圖中的紫外特征吸收峰與白藜蘆醇標(biāo)準(zhǔn)品相同,出峰時間一致,確定為白藜蘆醇,且峰形對稱,達(dá)到基線分離的效果(圖2-2c)。圖2-2白藜蘆醇標(biāo)準(zhǔn)曲線和標(biāo)準(zhǔn)品、供試品色譜圖Fig.2-2Standardcurveandthechromatogramsforstandardsolutionandsample注:a表示峰面積與白藜蘆醇濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線;字母b和c分別表示白藜蘆醇標(biāo)準(zhǔn)品和供試品色譜圖。Note:Theletter“a”representsthestandardcurveofpeakareaandresveratrolconcentration;“b”and“c”representthechromatogramsofstandardsolutionandsamplebythemethodoptimizedinthepresentstudy,respectively.2.4.2方法的檢出限(LOD)及定量限(LOQ)配制適當(dāng)濃度的白藜蘆醇標(biāo)準(zhǔn)液,以3倍和10倍的信噪比確定方法的檢出限(LOD,Limitofdetection)和定量限(LOQ,Limitofquantitation)(FANGetal.,2010)。如圖2-3所示,本檢測方法的檢出限和定量限分別為0.01mg/L和0.09mg/L,換算成樣品質(zhì)量單位分別為0.006μg/g和0.051μg/g。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]正交試驗法優(yōu)化菊花中總黃酮的提取工藝研究[J]. 陳婷. 工業(yè)微生物. 2019(04)
[2]白藜蘆醇及衍生物的研究進(jìn)展[J]. 樹林一,趙航,黃雯莉,宋光耀. 河北醫(yī)藥. 2019(13)
[3]白藜蘆醇聯(lián)合二苯乙烯苷通過抗衰老延緩糖尿病腎病進(jìn)展的研究[J]. 龐婉霞,朱澤兵,俠晨輝,葉霖,劉華鋒,劉玉寧,劉偉敬. 中國中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志. 2019(05)
[4]白藜蘆醇治療炎癥性腸病的研究進(jìn)展[J]. 陳香,許新微,張朝陽,趙明. 江蘇大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2019(02)
[5]白藜蘆醇在胰島素抵抗、糖尿病中的研究進(jìn)展[J]. 趙航,馬慧娟,樹林一,張運(yùn)佳,宋光耀. 醫(yī)學(xué)研究雜志. 2019(03)
[6]促進(jìn)花生生產(chǎn),保障我國糧油安全[J]. 陳清碩,孫雯,田冕. 農(nóng)村經(jīng)濟(jì)與科技. 2019(01)
[7]HPLC法測定山葡萄藤中白藜蘆醇含量[J]. 楊榮艷,劉琬暉,高楠楠. 中國衛(wèi)生產(chǎn)業(yè). 2018(15)
[8]酶法輔助提取海紅果中的白藜蘆醇[J]. 樊迎,陳毅,薛霖莉,連文綺,張丹. 山西農(nóng)業(yè)科學(xué). 2018(05)
[9]響應(yīng)面法優(yōu)化花生殼中白藜蘆醇提取工藝及其抗氧化活性研究[J]. 孫慧,林強(qiáng),魏微. 應(yīng)用化工. 2018(05)
[10]花生種子白藜蘆醇含量QTL定位分析[J]. 喻博倫,黃莉,邱西克,郭建斌,姜成紅,蔡巖,廖伯壽,姜慧芳,陳玉寧,劉念,陳偉剛,呂建偉,宋延濱,羅懷勇. 中國油料作物學(xué)報. 2018(01)
博士論文
[1]花生株高和出仁率QTL定位分析[D]. 呂建偉.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2019
[2]酶法提取虎杖中白藜蘆醇及白藜蘆醇酯的合成研究[D]. 周林芳.江南大學(xué) 2019
[3]山葡萄果實(shí)轉(zhuǎn)錄組分析及白藜蘆醇調(diào)控機(jī)理研究[D]. 殷向靜.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2016
[4]花生抗黃曲霉菌產(chǎn)毒機(jī)制的研究[D]. 王后苗.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2016
[5]花生品種間耐濕澇性差異及其機(jī)理研究[D]. 李林.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2004
碩士論文
[1]花生莢殼抗黃曲霉菌侵染種質(zhì)發(fā)掘及抗性關(guān)聯(lián)分析[D]. 邱西克.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2019
[2]白藜蘆醇的生物轉(zhuǎn)化途徑探索及生物活性研究[D]. 王珊珊.深圳大學(xué) 2016
[3]花生白藜蘆醇種質(zhì)的篩選研究[D]. 劉士壯.仲愷農(nóng)業(yè)工程學(xué)院 2015
[4]花生種質(zhì)資源耐漬性鑒定研究[D]. 邱柳.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[5]白藜蘆醇的提取純化及性能研究[D]. 蔡楊柳.北京化工大學(xué) 2010
本文編號:3568243
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