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花生種質(zhì)資源白藜蘆醇檢測及高白藜蘆醇種質(zhì)篩選

發(fā)布時間:2022-01-04 11:21
  花生(Arachis hypogaea L.),又名“落花生”或“長生果”,是一種營養(yǎng)豐富、食用廣泛的油料作物,在我國農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中占有重要地位;ㄉ粌H含有大量的脂類、蛋白質(zhì)和糖類,也含有一些具有保健功能的營養(yǎng)成分,如維生素E、白藜蘆醇、可溶性纖維等。白藜蘆醇屬于天然多酚類化合物,具有顯著的抗氧化活性,同時在預(yù)防癌癥及心血管疾病、增強(qiáng)免疫力等方面有重要作用;ㄉ浅咸、虎杖外的少數(shù)含白藜蘆醇的植物之一,選育高白藜蘆醇花生新品種,研究花生白藜蘆醇積累及調(diào)控機(jī)制,是花生育種發(fā)展的重要方向。本研究以花生籽仁為對象,在其他作物白藜蘆醇檢測方法的基礎(chǔ)上,優(yōu)化了花生籽仁白藜蘆醇的提取及檢測方法,并利用該方法對404份花生種質(zhì)資源進(jìn)行了多年多環(huán)境的白藜蘆醇含量測定,明確了花生資源白藜蘆醇含量的變異,發(fā)掘出高白藜蘆醇的特異種質(zhì)。主要研究結(jié)果如下:1、優(yōu)化了花生籽仁白藜蘆醇提取及檢測方法。針對傳統(tǒng)方法提取花生籽仁白藜蘆醇提取率低、提取時間長、提取物中容易混雜其他物質(zhì)等問題,研究優(yōu)化了花生籽仁白藜蘆醇提取及檢測方法。利用酶解和超聲處理相結(jié)合的方法提取花生籽仁白藜蘆醇,確定最適酶濃度為3 g/L、最佳酶解時... 

【文章來源】:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】:46 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

花生種質(zhì)資源白藜蘆醇檢測及高白藜蘆醇種質(zhì)篩選


白藜蘆醇的從頭合成途徑(周林芳,2019)

技術(shù)路線圖,白藜蘆醇,花生,酶解


中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文第二章花生籽仁中白藜蘆醇含量檢測方法的優(yōu)化11表2-1正交實(shí)驗的因素與水平Table2-1Factorsandlevelsoforthogonalexperiment2.2.5統(tǒng)計方法本實(shí)驗所得的數(shù)據(jù)采用MicrosoftExcel2010、SpssStatisticsv23等軟件處理。差異性顯著水平設(shè)置p≤0.05。2.3技術(shù)路線利用酶解法聯(lián)合超聲萃取法提取花生籽仁中白藜蘆醇,主要技術(shù)路線如下:首先,通過單因素實(shí)驗和正交試驗優(yōu)化了提取工藝參數(shù),然后通過穩(wěn)定性實(shí)驗、回收率實(shí)驗、方法對實(shí)驗等方法對該提取工藝進(jìn)行驗證,最后利用HPLC法測定花生籽仁中白藜蘆醇含量(圖2-1)。圖2-1技術(shù)路線圖Fig.2-1Thetechnologicalprocessofthisstudy.水平Levels因素FactorsA酶解液濃度AEnzymeconcentration(g/L)B酶解時間BDigestiontime(min)C超聲時間CUltrasonictime(min)10302021.5604033906044.512080

色譜圖,白藜蘆醇,標(biāo)準(zhǔn)品,標(biāo)準(zhǔn)曲線


中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文第二章花生籽仁中白藜蘆醇含量檢測方法的優(yōu)化122.4.1標(biāo)準(zhǔn)曲線及標(biāo)準(zhǔn)品、供試品溶液的色譜圖采用外標(biāo)法定量,以甲醇為溶劑,配制成不同濃度梯度(0.25、0.5、0.75、1、1.5、2、2.5、3、3.5、4mg/L)的白藜蘆醇標(biāo)準(zhǔn)品溶液,測定各個濃度對應(yīng)的峰面積。所得數(shù)據(jù)以峰面積為縱坐標(biāo),濃度為橫坐標(biāo),得到峰面積-濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線。從圖2-2中可以看出,線性方程為Y=65.186X-5.4539(R2=0.9991),其中X為反式白藜蘆醇濃度,Y為不同濃度下的相應(yīng)峰面積,結(jié)果表明該檢測方法白藜蘆醇濃度和峰面積在一定濃度范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系(圖2-2a)。在“2.2.2”的色譜條件下,白藜蘆醇標(biāo)準(zhǔn)品的出峰時間為13.8min左右,峰形對稱,基線平穩(wěn)(圖2-2b)。供試品溶液中,色譜圖中的紫外特征吸收峰與白藜蘆醇標(biāo)準(zhǔn)品相同,出峰時間一致,確定為白藜蘆醇,且峰形對稱,達(dá)到基線分離的效果(圖2-2c)。圖2-2白藜蘆醇標(biāo)準(zhǔn)曲線和標(biāo)準(zhǔn)品、供試品色譜圖Fig.2-2Standardcurveandthechromatogramsforstandardsolutionandsample注:a表示峰面積與白藜蘆醇濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線;字母b和c分別表示白藜蘆醇標(biāo)準(zhǔn)品和供試品色譜圖。Note:Theletter“a”representsthestandardcurveofpeakareaandresveratrolconcentration;“b”and“c”representthechromatogramsofstandardsolutionandsamplebythemethodoptimizedinthepresentstudy,respectively.2.4.2方法的檢出限(LOD)及定量限(LOQ)配制適當(dāng)濃度的白藜蘆醇標(biāo)準(zhǔn)液,以3倍和10倍的信噪比確定方法的檢出限(LOD,Limitofdetection)和定量限(LOQ,Limitofquantitation)(FANGetal.,2010)。如圖2-3所示,本檢測方法的檢出限和定量限分別為0.01mg/L和0.09mg/L,換算成樣品質(zhì)量單位分別為0.006μg/g和0.051μg/g。

【參考文獻(xiàn)】:
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碩士論文
[1]花生莢殼抗黃曲霉菌侵染種質(zhì)發(fā)掘及抗性關(guān)聯(lián)分析[D]. 邱西克.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2019
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本文編號:3568243

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