茶樹轉(zhuǎn)錄因子CsEIN3/EILs基因的克隆及表達(dá)分析
發(fā)布時間:2021-12-29 14:03
乙烯在植物生長發(fā)育及逆境應(yīng)答中發(fā)揮重要的作用,其生理作用是通過調(diào)控信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑相關(guān)基因的表達(dá)實現(xiàn)的。Ethylene-insenstives3(EIN3)和EIN3-like(EIL)是乙烯信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子,然而關(guān)于茶樹EIN3/EILs轉(zhuǎn)錄因子及其在脅迫條件下的變化特征尚不清楚。進(jìn)一步探究茶樹CsEIN3/EILs轉(zhuǎn)錄因子家族在不同非生物脅迫下的表達(dá)特征對培育抗逆性較強(qiáng)的茶樹新品種具有重要的意義。本文主要對四個茶樹CzsEIN3/EILs基因進(jìn)行了cDNA克隆、鑒定及其表達(dá)特征分析、轉(zhuǎn)錄激活活性驗證和轉(zhuǎn)基因擬南芥的表達(dá)分析。主要研究結(jié)果如下:1.基于茶樹基因組和本課題組鹽脅迫轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫,克隆了四條茶樹CsEIN3/EILs基因,分別命名為CsEIL1、CsEIL2、CsEIL3和CsEIL4。CsEIL1基因開放閱讀框為1827 bp,編碼609個氨基酸;CsEIL2基因開放閱讀框為1872 bp,編碼624個氨基酸;CsEIL3基因開放閱讀框為1885 bp,編碼595個氨基酸;CsEIL4基因開放閱讀框為1917 bp,編碼639個氨基酸。理化性質(zhì)分析表明:CsEIL...
【文章來源】:西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:69 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
縮略詞表
第一章 文獻(xiàn)綜述
1.1 植物激素
1.2 乙烯信號通路
1.3 植物轉(zhuǎn)錄因子概述
1.4 EIN3/EILs蛋白家族簡介及研究現(xiàn)狀
1.4.1 EIN3/EILs家族轉(zhuǎn)錄因子
1.4.2 EIN3/EILs轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)
1.4.3 EIN3/EIL轉(zhuǎn)錄因子的功能
1.5 研究的目的與內(nèi)容
1.5.1 研究目的
1.5.2 研究內(nèi)容
1.5.3 技術(shù)路線
第二章 CsEIN3/EILs基因的克隆及生物信息學(xué)分析
2.1 試驗材料
2.1.1 植物材料
2.1.2 菌株和載體
2.1.3 試劑藥品
2.1.4 儀器設(shè)備
2.2 試驗方法
2.2.1 茶苗的培養(yǎng)及處理
2.2.2 茶樹CsEILs蛋白的全基因組鑒定
2.2.3 茶樹基因CsEILs的克隆
2.2.4 CsEILs基因序列的生物信息學(xué)分析
2.2.5 實時熒光定量PCR
2.3 結(jié)果與分析
2.3.1 茶樹CsEILs基因的克隆
2.3.2 茶樹CsEILs基因的生物信息學(xué)分析
2.3.3 茶樹CsEILs基因的組織特異性分析
2.3.4 茶樹CsEILs基因在非生物脅迫下的表達(dá)模式分析
2.4 討論
第三章 茶樹CsEIL1、CsEIL2基因的功能分析
3.1 材料與方法
3.1.1 植物材料
3.1.2 載體和菌株
3.1.3 試劑
3.1.4 儀器設(shè)備
3.2 試驗方法
3.2.1 轉(zhuǎn)錄自激活驗證
3.2.2 CsEIL1、CsEIL2的遺傳轉(zhuǎn)化
3.2.3 轉(zhuǎn)基因植株除草劑篩選
3.2.4 轉(zhuǎn)基因陽性植株P(guān)CR鑒定
3.2.5 轉(zhuǎn)基因擬南芥表達(dá)水平分析
3.3 結(jié)果與分析
3.3.1 茶樹CsEIL1、CsEIL2的轉(zhuǎn)錄自激活活性鑒定
3.3.2 轉(zhuǎn)基因植株篩選鑒定
3.3.3 轉(zhuǎn)基因擬南芥表達(dá)水平分析
3.3.4 ERF1表達(dá)水平分析
3.4 討論
第四章 結(jié)論與展望
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
個人簡歷
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]茶樹栽培與茶園管理技術(shù)發(fā)展探究[J]. 劉波. 現(xiàn)代園藝. 2019(06)
[2]擬南芥轉(zhuǎn)錄因子Ethylene-insensitive3(EIN3)抑制花青素的合成[J]. 徐夢珂,李丹,孟來生,蔣繼宏. 植物研究. 2018(01)
[3]茶樹轉(zhuǎn)錄因子基因CsDREB-A4的克隆與溫度脅迫響應(yīng)的分析[J]. 劉志薇,熊洋洋,李彤,嚴(yán)雅君,韓洪潤,吳致君,莊靜. 茶葉科學(xué). 2015(01)
[4]茶樹中兩個ERF類轉(zhuǎn)錄因子的分離及不同茶樹中溫度脅迫的響應(yīng)分析[J]. 劉志薇,熊洋洋,李彤,嚴(yán)雅君,韓洪潤,吳致君,莊靜. 植物生理學(xué)報. 2014(12)
[5]茶樹CsDREB-A1轉(zhuǎn)錄因子基因的克隆及其特性分析[J]. 劉志薇,吳致君,黎星輝,李彤,莊靜. 植物資源與環(huán)境學(xué)報. 2014(04)
[6]茶樹AP2/ERF-B3類轉(zhuǎn)錄因子基因的克隆與表達(dá)特性分析[J]. 吳致君,盧莉,黎星輝,房婉萍,周琳,譚國飛,莊靜. 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2014(04)
[7]甜瓜EIN3/EILs基因家族全基因組鑒定與進(jìn)化分析[J]. 馬勇,莘少紅,巴德仁貴,哈斯阿古拉. 基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué). 2014(01)
[8]植物激素乙烯作用機(jī)制的最新進(jìn)展[J]. 李文陽,馬夢迪,郭紅衛(wèi). 中國科學(xué):生命科學(xué). 2013(10)
[9]甘藍(lán)型油菜BnEIN3基因克隆及菌核病誘導(dǎo)表達(dá)[J]. 許李明,黃軍艷,劉學(xué)群,覃瑞,劉勝毅. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2009(14)
[10]植物轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)構(gòu)與調(diào)控作用[J]. 劉強(qiáng),張貴友,陳受宜. 科學(xué)通報. 2000(14)
博士論文
[1]植物激素乙烯調(diào)控擬南芥抗凍性的分子機(jī)制研究[D]. 田守蔚.中國農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
碩士論文
[1]桃果實幾個乙烯信號轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)基因的克隆及其表達(dá)[D]. 趙相娟.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
本文編號:3556271
【文章來源】:西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:69 頁
【學(xué)位級別】:碩士
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摘要
ABSTRACT
縮略詞表
第一章 文獻(xiàn)綜述
1.1 植物激素
1.2 乙烯信號通路
1.3 植物轉(zhuǎn)錄因子概述
1.4 EIN3/EILs蛋白家族簡介及研究現(xiàn)狀
1.4.1 EIN3/EILs家族轉(zhuǎn)錄因子
1.4.2 EIN3/EILs轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)
1.4.3 EIN3/EIL轉(zhuǎn)錄因子的功能
1.5 研究的目的與內(nèi)容
1.5.1 研究目的
1.5.2 研究內(nèi)容
1.5.3 技術(shù)路線
第二章 CsEIN3/EILs基因的克隆及生物信息學(xué)分析
2.1 試驗材料
2.1.1 植物材料
2.1.2 菌株和載體
2.1.3 試劑藥品
2.1.4 儀器設(shè)備
2.2 試驗方法
2.2.1 茶苗的培養(yǎng)及處理
2.2.2 茶樹CsEILs蛋白的全基因組鑒定
2.2.3 茶樹基因CsEILs的克隆
2.2.4 CsEILs基因序列的生物信息學(xué)分析
2.2.5 實時熒光定量PCR
2.3 結(jié)果與分析
2.3.1 茶樹CsEILs基因的克隆
2.3.2 茶樹CsEILs基因的生物信息學(xué)分析
2.3.3 茶樹CsEILs基因的組織特異性分析
2.3.4 茶樹CsEILs基因在非生物脅迫下的表達(dá)模式分析
2.4 討論
第三章 茶樹CsEIL1、CsEIL2基因的功能分析
3.1 材料與方法
3.1.1 植物材料
3.1.2 載體和菌株
3.1.3 試劑
3.1.4 儀器設(shè)備
3.2 試驗方法
3.2.1 轉(zhuǎn)錄自激活驗證
3.2.2 CsEIL1、CsEIL2的遺傳轉(zhuǎn)化
3.2.3 轉(zhuǎn)基因植株除草劑篩選
3.2.4 轉(zhuǎn)基因陽性植株P(guān)CR鑒定
3.2.5 轉(zhuǎn)基因擬南芥表達(dá)水平分析
3.3 結(jié)果與分析
3.3.1 茶樹CsEIL1、CsEIL2的轉(zhuǎn)錄自激活活性鑒定
3.3.2 轉(zhuǎn)基因植株篩選鑒定
3.3.3 轉(zhuǎn)基因擬南芥表達(dá)水平分析
3.3.4 ERF1表達(dá)水平分析
3.4 討論
第四章 結(jié)論與展望
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
個人簡歷
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]茶樹栽培與茶園管理技術(shù)發(fā)展探究[J]. 劉波. 現(xiàn)代園藝. 2019(06)
[2]擬南芥轉(zhuǎn)錄因子Ethylene-insensitive3(EIN3)抑制花青素的合成[J]. 徐夢珂,李丹,孟來生,蔣繼宏. 植物研究. 2018(01)
[3]茶樹轉(zhuǎn)錄因子基因CsDREB-A4的克隆與溫度脅迫響應(yīng)的分析[J]. 劉志薇,熊洋洋,李彤,嚴(yán)雅君,韓洪潤,吳致君,莊靜. 茶葉科學(xué). 2015(01)
[4]茶樹中兩個ERF類轉(zhuǎn)錄因子的分離及不同茶樹中溫度脅迫的響應(yīng)分析[J]. 劉志薇,熊洋洋,李彤,嚴(yán)雅君,韓洪潤,吳致君,莊靜. 植物生理學(xué)報. 2014(12)
[5]茶樹CsDREB-A1轉(zhuǎn)錄因子基因的克隆及其特性分析[J]. 劉志薇,吳致君,黎星輝,李彤,莊靜. 植物資源與環(huán)境學(xué)報. 2014(04)
[6]茶樹AP2/ERF-B3類轉(zhuǎn)錄因子基因的克隆與表達(dá)特性分析[J]. 吳致君,盧莉,黎星輝,房婉萍,周琳,譚國飛,莊靜. 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2014(04)
[7]甜瓜EIN3/EILs基因家族全基因組鑒定與進(jìn)化分析[J]. 馬勇,莘少紅,巴德仁貴,哈斯阿古拉. 基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué). 2014(01)
[8]植物激素乙烯作用機(jī)制的最新進(jìn)展[J]. 李文陽,馬夢迪,郭紅衛(wèi). 中國科學(xué):生命科學(xué). 2013(10)
[9]甘藍(lán)型油菜BnEIN3基因克隆及菌核病誘導(dǎo)表達(dá)[J]. 許李明,黃軍艷,劉學(xué)群,覃瑞,劉勝毅. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2009(14)
[10]植物轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)構(gòu)與調(diào)控作用[J]. 劉強(qiáng),張貴友,陳受宜. 科學(xué)通報. 2000(14)
博士論文
[1]植物激素乙烯調(diào)控擬南芥抗凍性的分子機(jī)制研究[D]. 田守蔚.中國農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
碩士論文
[1]桃果實幾個乙烯信號轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)基因的克隆及其表達(dá)[D]. 趙相娟.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
本文編號:3556271
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