靈芝（Ganoderma lucidum）作為一種重要的藥用真菌,具有較強的木質(zhì)素降解能力。漆酶是一種含銅的多酚氧化酶,作為靈芝分泌的胞外酶之一,在靈芝生長發(fā)育過程中通過降解環(huán)境木質(zhì)素,為靈芝提供營養(yǎng)成分,促進靈芝的發(fā)育及形態(tài)的產(chǎn)生。研究靈芝漆酶的變化規(guī)律對靈芝的產(chǎn)量和質(zhì)量具有重要意義。目前對靈芝漆酶降解木質(zhì)素機制的研究很少,漆酶與其編碼基因發(fā)揮作用的機理不明確,因此本文對已經(jīng)公布的靈芝漆酶同源基因及推斷的氨基酸序列進行生物信息學(xué)分析,利用實時熒光定量PCR（RT-PCR）對靈芝漆酶基因在靈芝生長的不同時期、不同濃度Cu2+誘導(dǎo)下的表達情況進行研究,以了解漆酶基因在靈芝生長過程中的變化規(guī)律,為探索漆酶在靈芝中的表達機制研究提供理論依據(jù)。本文研究內(nèi)容為以下幾個方面:（1）生物信息學(xué)分析顯示不同漆酶氨基酸序列的組成有所差異,使用Signal4.1Server對12個漆酶同源基因進行信號肽預(yù)測發(fā)現(xiàn),所有氨基酸序列N端中都具有信號肽,信號肽氨基酸殘基在18-24個aa之間;通過NCBI比對后,所有的漆酶基因都分別具有漆酶特征序列L1-L4,以及3個保守的銅氧化酶結(jié)構(gòu)域,說明推斷的氨基酸序列屬于... 

【文章來源】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

靈芝漆酶基因分類

圖 1.1 靈芝漆酶基因結(jié)構(gòu)Fig. 1.1 Gene structure of laccase of G. lucidum注：黑色框代表內(nèi)含子；直線代表內(nèi)含子；0、1、2 代表內(nèi)含子相位 1.2 靈芝漆酶基因分類。A：靈芝漆酶氨基酸序列系統(tǒng)進化樹。利用 Bioedite 軟件將序列進行比對，用 MEGA 軟件 Neighbor-Joining 法構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹，基準(zhǔn)尺距離為 0.05；B：靈芝漆酶基因內(nèi)含子置的分布。橫線表示漆酶基因，黑框代表內(nèi)含子位置。虛線表示內(nèi)含子打斷不同基因編碼序列相同

圖 2.1 靈芝屬不同菌種生長速率變化1 The changes of growth rate of different strains of G. luc同菌種鮮重及折干率的變化從第 3 天開始，在整個培養(yǎng)時期內(nèi)，鮮重增加均呈現(xiàn)不同柄樹舌的鮮重為 0.635 g，其他供試菌種鮮重基本相近；中芝26A的鮮重在培養(yǎng)第7天速度顯著增加，分別比第6天增 0.388g。樹舌的鮮重與對照云芝變化趨勢基本一致。如圖

【參考文獻】：
期刊論文
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[5]紫外誘變對側(cè)耳菌生長、酶活性及纖維降解的影響[J]. 劉延國,李杰,張琳,栗敏,王盼盼.  飼料工業(yè). 2015(04)
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[10]草菇生長發(fā)育過程中胞外酶活性變化[J]. 吳圣進,王燦琴,汪茜,韋仕巖.  中國食用菌. 2015(01)

博士論文
[1]基于全基因組的靈芝藥用模式真菌創(chuàng)建研究[D]. 徐江.北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 2013

碩士論文
[1]靈芝基因組中漆酶基因簇的生物信息學(xué)分析及Cu2+誘導(dǎo)表達[D]. 陳岳文.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[2]松杉靈芝漆酶基因的克隆及其qRT-PCR分析[D]. 柯萍萍.福建農(nóng)林大學(xué) 2012



本文編號：3544063